高效苯酚降解菌的筛选及其降解特性分析

以苯酚为唯一碳源利用梯度富集培养,从湖北省孝昌县污水处理厂曝气池的活性污泥中分离筛选出一株高效苯酚降解菌株,经16S r DNA序列分析,初步鉴定菌株为Rhodococcus biphenylivorans,命名为Rhodococcus biphenylivorans sp.B403(嗜联苯红球菌B403).该菌株在含苯酚500 mg/L的无机盐培养基处理30 h后,其OD600达到最高0. 974,苯酚降解率达到98%.比较不同培养基的菌株生长曲线和降解曲线发现,在苯酚-LB-无机盐混合培养基中菌株稳定期生物量比LB培养基高出30%～40%,15 h降解苯酚效率达到99%以上,18 h内实现苯酚完全降解,苯酚降解效率最佳,显著高于目前已报道菌株.说明在其他有机碳源存在的条件下,更有利于嗜联苯红球菌B403生长.该菌株可用于含酚类污染物的有机废水处理及有机质丰富的酚类污染土壤修复.     

一株耐盐苯酚降解菌的分离、鉴定及特性研究

从污水处理厂活性污泥中筛选到一株高效的耐盐苯酚降解菌,经形态观察及26SrRNA序列分析鉴定为假丝酵母菌Candida sp.,命名为W3.该菌株可以在1%～10%NaCl环境中生长,并可以利用苯酚为唯一碳源和能源.苯酚降解的最优条件为pH=7.0,温度30℃,NaCl质量分数5%.在NaCl质量分数为5%.苯酚浓度为...     

苯酚降解菌SZH3的分离及降解特性的初步研究

自上海市苏州河中游分离得到一株兼性厌氧苯酚降解菌SZH3,该菌株能够在以苯酚为唯一碳源和能源的培养基上生长,经形态、生理生化以及16S rDNA序列特性分析,初步将该菌株鉴定为泛菌属(Pantoea sp.).进一步研究发现,在初始苯酚浓度为500 mg,/L时,SzH3的苯酚降解率在60 h内就可达到95.4%.该菌株最高可耐受浓度为1300 mg/L的苯酚,对苯酚最适降解条件为pH 7.0,温度30 ℃,转速200 r/min.     

生物炭水凝胶固定微生物处理含酚废水

筛选和分离出一种高效的苯酚降解菌Bacillus sp. 26,以西瓜生物炭水凝胶作为载体,用海藻酸钠作为交联剂包埋该菌株.通过实验研究对比灭活的固定化Bacillus sp. 26细胞对苯酚的吸附;固定化Bacillus sp. 26细胞对苯酚的吸附和降解;游离Bacillus sp. 26细胞对苯酚的降解能力.结果表明:Bacillus sp. 26游离菌株具有高效降酚能力,可在1.0 d内降解浓度高达800 mg/L的高盐含酚废水;生物炭水凝胶固定化Bacillus sp. 26同样显示出高效降解苯酚废水的能力,且具有优良的循环使用性能,在循环使用3次后,对1 200 mg/L苯酚废水的降解效率仍达到100%;固定化后的Bacillus sp. 26在循环使用过程中性能不断提高,说明炭水凝胶为菌株提供良好的生长和增殖环境.生物炭水凝胶固定微生物的方法具有易于回收、分离和重复使用的特点,具有潜在的应用价值.所筛选出的菌株和发展的固定化方法,为固定化微生物技术处理苯酚废水提供新的材料和思路.     

混合菌群对原油的降解作用

从本研究室保藏的菌种中筛选到一组处理油田污水的混合菌群,经鉴定该菌群由N1、N2（假单胞菌属Pseu-domonas sp.）,N3（不动杆菌属Acinetobacter sp.）,N4（微杆菌属Microbacterium sp.）,N5（纤维单胞菌属Cellu-lomonas sp.）,N6（棒杆菌属Corynebacterium sp.）组成,利用气相色谱分析了各组成菌在降解原油中的作用和效果,证实N5和N6是关键菌株,N1－N4菌株起辅助作用,它们的协同作用使混合菌群得以高效降解目标原油。     

苯酚降解菌特性的初步研究

对太原杨家堡污水处理厂的污泥进行富集，驯化筛选到一株能高效降解苯酚的紫色非硫光合细菌沼泽红假单胞菌（Rhodopseudomonas palustris）L3，该菌株可耐受500mg／L左右的苯酚浓度，通过实验得出了该菌降解苯酚的最适条件为pH7．0、温度30℃，适量投加C02可以加快该菌对苯酚的降解。     

固定化细菌降解苯酚的研究

通过驯化、筛选和富集,从温州某印染厂的生化曝气池下水道的活性污泥中分离得到一株高效降解苯酚的细菌,初步确定为假单胞菌属（Pseudomonas sp．）。该菌株能以苯酚为唯一碳源。最高耐酚浓度为1000mg／L。并采用海藻酸钙对该菌进行固定化。同时研究了不同条件如培养温度、pH、转速、供氧等对固定化细胞降解苯酚的影响。实验结果表明：最佳温度35℃、pH5．0、转速120r／min,在有氧条件下,24h内对100mg／L苯酚降解率可达99％以上。     

两株苯酚降解菌的降解特性及对比分析

采用驯化的方法从活性污泥中筛选分离得到两株高效苯酚降解菌XTT-1,XTT-3,均能在含苯酚的培养基中生长,初步鉴定均为假单胞菌属(Pseudomonassp.).研究了两株菌降解苯酚的最适条件;XTT-3菌经48 h培养可完全降解500 mg.L-1苯酚,而XTT-1菌需要64 h;两株菌的苯酚耐受能力均不超过1000 mg.L-1苯酚;NaCl含量2.0%以上对两株菌的苯酚降解率有不同程度的抑制作用.     

骆驼消化道中吡啶降解菌的分离筛选

以吡啶为唯一碳源、氮源,采用吡啶质量浓度每代递增(0.1,0.2,0.3,0.4,0.5g/L)的5代富集培养方法,从3头骆驼消化道分离筛选吡啶降解菌株,并通过气相色谱-质谱联用仪检测高效降解菌株对吡啶的降解能力.实验结果显示:实验共获得3个属22株吡啶降解菌,其中瘤胃7株,归属为芽孢杆菌属(Bacillus sp.)和产碱菌属(Alcaligenes sp.);肠道15株,归属为假单胞菌属(Pseudomonas sp.)、芽孢杆菌属和产碱菌属.筛选获得的菌株都可以较好地降解吡啶,其中1株产碱菌(KF641851)经96h,1株芽孢杆菌(KF641839)经108h能够将吡啶(0.4g/L)完全降解.研究显示骆驼消化道在有氧条件下可培养降解吡啶微生物种类不丰富,肠道菌种类和数量较瘤胃多,其优势降解菌归属为产碱菌属.研究提示骆驼消化道可能蕴藏着可降解吡啶的微生物,本研究可为研究动物消化道微生物降解有毒有害物质以及动物源微生物在生物治理中的应用提供依据.     

高效木质素降解菌的筛选及降解性能研究

【目的】筛选纯化及鉴定木质素降解菌,对其降解性能进行初步研究。【方法】从某制浆造纸厂的造纸废水污泥中,筛选获得2株具有木质素降解能力的细菌LD-1和LD-2。通过形态观察和16SrRNA序列分析对菌株进行鉴定;采用苯胺蓝平板脱色法及以TC为指标分别定性定量测定2株细菌的木质素降解能力。【结果】LD-1和LD-2分别被鉴定为Sphingobacterium属和Bacillus属的菌株,命名为Sphingobacterium sp.LD-1和Bacillus sp.LD-2。通过苯胺蓝平板脱色实验,发现LD-1和LD-2均具有良好的木质素降解能力。经测定,两株菌种发酵7d对木质素的降解率分别达到52.23%和50.36%。【结论】成功筛选到2株能高效降解木质素的菌株LD-1和LD-2。     

固定化菌株DF51对小麦幼苗的苯酚污染修复

为探讨固定化菌株DF51对苯酚污染土壤中小麦幼苗生长的影响,采用随机区组试验设计,在大田条件下研究施用不同质量浓度的苯酚（0、50、100、150、200μg/g）和固定化菌株DF51（0、10、20、30、40 kg a.i./hm2）对小麦的影响.结果表明：苯酚显著降低小麦的光合特性和抗逆性;固定化菌株DF51对苯酚土壤污染具有修复性能,且能提高苯酚胁迫下小麦的光合特性和抗逆性;P1D1和P2D2处理可恢复苯酚胁迫下小麦的生理特性.可见,固定化菌株DF51能显著提高小麦在苯酚胁迫下的耐性,这与其提高抗氧化酶活性有关.     

二苯并噻吩单加氧酶基因(dszC)的克隆及其在大肠杆菌中的表达

利用PCR法从红球菌DS-3中克隆了dszC基因,序列测定结果与报道的Rhod ococcus ery throp olisIGTS8中d szC基因有99%的同源性.构建了含dszC基因的表达载体paC 5并在E.coli中实现高效表达,重组蛋白(D szC)在降温条件下重组菌表达量可达20%.可溶性D szC经N i2 亲和层析纯化达到电泳纯(95%以上).用纯化的D szC制备一抗血清进行免疫印记检测,证明工程菌表达产物中存在目的蛋白.纯化的D szC酶活可达0.36 U.D szC能作用于DBT及其甲基取代物,但不能利用无硫的DBT类似物及无机硫源.     

空心莲子草微生物群落分析与防治

通过组织分离空心莲子草叶片和茎秆,得到8种不同形态的菌株,鉴定菌株A、B、C分别为链格孢菌,镰刀菌和葡萄孢菌,D为未知真菌（没有产孢）,E、F、O、H均为细菌。将上述分离获得的菌株分别接种PDA平板上培养3d后,用无菌水冲下,以喷雾器喷洒到健康的空心莲子草植株叶片上,记录发病情况,结果表明,菌株B和H对空心莲子草的生长有抑制作用,其中B的作用并不明显,发病率仅为4％,而H则对空心莲子草的生长有着较强的抑制作用,其发病率达到了59．6％。     

石油降解菌株的筛选、初步鉴定及其特性

从含油污水中分离得到5株能高效降解石油的微生物菌株(P1、P2、P3、P4、P5). 根据形态学观察和生理生化实验对菌株进行鉴定,P1为节杆菌属(Arthrobacter sp.),P2为邻单胞菌属(Plesiomonas sp.),P3为假单胞菌属(pseudomonas sp.),P4为芽孢杆菌属(Bacillus sp.),P5为黄单胞菌属(Xanthomonas sp.). 对这5株菌的特性进行了研究,结果表明, P1、P2、P3、P4、P5在水样pH分别为9、7、8、8、8时,出现最大降解率,在10 g/L原油培养基中培养7 d分别能降解50.20%、55.59%、61.90%、55.66%和55.95%的原油. 接种量、盐度、通氧量、温度、油质量浓度、营养盐对石油的降解率有较大的影响. 通过对残油组分的GC-MS分析,确定各菌对C7～C17的直链烃有较好的降解效果.     

石油降解菌的筛选及其产表面活性剂的研究

从克拉玛依油田土壤分离纯化出3株石油降解菌,经鉴定DM-1和DM-3为芽孢杆菌属细菌,DM-2为假单孢菌属细菌,菌株DM-1,DM-2和DM-3降解率分别达到59.02%,62.02%和73.51%.排油实验、表面张力和油水乳化稳定性测定表明3株菌产生的表面活性剂能降低液体表面张力,具有较强的乳化原油的能力.实验证明菌株DM-1,DM-2和DM-3产脂肽、脂蛋白类表面活性物质,表面活性剂的产生为生长相关型,在对数生长期产表面活性剂,48小时浓度达到最大,分别为1.78g/L,2.15g/L和2.75g/L.     

腈水合酶产生菌 Rhodococcus sp.HUST-1发酵条件的优化

Rhodococcus sp.HUST-1在Co2+的诱导下产腈水合酶,催化丙烯腈水合生成丙烯酰胺.对菌株HUST-1的产酶条件进行优化.研究表明,发酵过程中培养基中的碳氮源、诱导剂浓度以及培养条件影响腈水合酶的高效表达.在葡萄糖20 g/L、酵母粉10 g/L、Co2+0.08 mmol/L、酪氨酸0.2 g/L、pH7.0、培养温度28℃时,HUST-1所产腈水合酶总酶活达1 012.7 U,比优化前提高了47.1%.     

虎杖内生真菌抗菌活性研究及菌株初步鉴定

利用滤纸片扩散法及形态学常规分类法对30株虎杖内生真菌发酵液进行抑菌活性试验和初步鉴定。结果表明,15株内生真菌对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)具有抑菌活性,12株内生真菌对枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)具有抑菌活性,7株内生真菌对大肠埃希氏菌(Escherichia coli)具有抑菌活性,分别占菌株总数的50%,40%和23%。根据菌落形态及菌丝结构对其鉴定,具有抑菌活性的菌株分属于曲霉属(Aspergillus)、青霉属(Penicillium)、枝孢霉属(Cladosporium)、镰刀菌属(Fusarium)及无孢菌类(Agonomycetales)真菌。     

黄河水体多环芳烃降解菌的筛选及其降解性能研究

通过选择性培养,从黄河水体中分离纯化出3株能够以(Chr)和苯并[a]芘(B[a]P)为唯一碳源和能源进行生长的细菌HKS-1,HKS-2和HKS-3,采用16S rDNA序列分析,初步断定HKS-1为杆菌属或无芽孢杆菌属的一个种,HKS-2和HKS-3为芽孢杆菌菌株.微生物降解实验表明,Chr和B[a]P在前25d的降解符合零级动力学规律,3株细菌的混合菌群对Chr和B[a]P有良好的降解效果,泥沙的加入能够促进微生物数量的增长,从而促进Chr和B[a]P的降解.当Chr和B[a]P的初始质量浓度0ρ分别为15.85和12.10μg.L-1时,培养35 d后不含泥沙体系中Chr和B[a]P的降解率分别为45.79%和37.36%;含泥沙体系中Chr和B[a]P的降解率分别为58.76%和51.69%.进一步采用膜实验对比研究了多环芳烃在水相和颗粒相的降解速率.结果表明,当用零级动力学对Chr和B[a]P的质量浓度(ρ)变化(最初4 d)进行拟合时,Chr和B[a]P在颗粒相的降解速率分别约为其在水相降解速率的3和4倍.     

相思根瘤菌的抗逆性初步研究

对21株相思根瘤菌和2株大豆根瘤菌菌株进行NaCl、(NH4)2SO4、pH值、高温和低温的耐受性实验，其中耐(NH4)2SO4的实验分别进行了相思根瘤菌在含(NH4)2SO4的平板上的耐受性和在浓度为100mol／L、300mol／L、500mol／L、600mol／L的(NH4)2SO4中的结瘤试验。参试菌株均经过回接实验培养和镜检，培养基均为YMA。结果表明，相思根瘤菌均能耐受的盐浓度为0．5％～2．0％，能在37℃和pH值为6～9的条件下生长。在抗生素抗性方面，相思根瘤菌普遍抗氨卞青霉素，而对卡那霉素和链霉素敏感。相思根瘤菌的耐盐、耐高温和耐氨能力强于慢生大豆根瘤菌。