1株蛹虫草的液体发酵试验及蛹虫草多糖的提取

冬虫夏草是一种名贵的强壮滋补中药,但由于其严格的寄生性和特殊的生长地理环境,天然虫草资源越来越少,冬虫夏草的开发利用只有走人工培养之路.经研究蛹虫草的培养时间与菌丝体生产量的关系,虫草多糖的提取以及虫草多糖的测定,结果显示培养6d的菌丝产量最高,发酵时间对菌丝生长量的研究有重要意义,它可以控制大规模发酵生产大周期.多糖含量的测定用硫酸-苯酚法.经实验显示2次浸提比1次浸提的得率要高,摇瓶菌丝体的粗多糖得率为25.0%,精多糖得率为10.15%,均比已报道的虫草多糖得率高,这为人工控制大规模发酵生产大周期提供科学依据.     

虫草头孢菌CS-866菌株发酵条件的研究

对虫草头孢菌CS-866菌株的菌丝体发酵条件进行了研究,其适宜的培养基消前pH为5.0~7.0,培养温度为26~28℃,接种量为3%~5%,最佳种龄为3 d,发酵周期4 d,培养基消前加0.3%毛豆油消沫,发酵过程中对通气量的要求较高.虫草头孢菌丝体所含氨基酸与天然冬虫夏草相近,红外吸收光谱也表明两者所含的各类化学成分极为相似.     

野生蛹虫草与培植蛹虫草清除·OH自由基作用的对比研究

采用分光光度法对野生蛹虫草与培植蛹虫草清除·OH自由基的作用进行对比 .结果表明培植蛹虫草子座对·OH自由基的清除能力丝毫不弱于野生蛹虫草子座 ,而培植蛹虫草发酵菌丝体对·OH自由基的清除能力要高于野生蛹虫草 .     

蛹虫草高产菌丝体和虫草菌素的深层培养工艺优化(英文)

蛹虫草Cordyceps militaris是当前用于功能食品和药物开发上较受国内外关注的真菌之一。本研究通过1次一因素法和正交实验设计优化了蛹虫草产虫草菌素和菌丝体的深层培养工艺。最适合菌丝生长的pH值和温度为6.0和20℃,而最适合虫草素积累的pH值和温度为5.0和26℃。蔗糖、蛋白胨、MgSO4、K2HPO4和NAA分别是最适合虫草素积累的碳源、氮源、无机盐和生长因子;培养基的成分对蛹虫草生物量的影响次序为:蔗糖>蛋白胨>MgSO4·7H2O>K2HPO4>NAA;培养基的成分对蛹虫草产虫草素的影响次序为:蛋白胨>K2HPO4>NAA>MgSO4·7H2O>蔗糖。最适合蛹虫草菌丝生长的培养基配比为4%蔗糖,2.5%蛋白胨,0.05%MgSO4·7H2O,0.15%K2HPO4,2.0mg/l NAA;最适合蛹虫草深层发酵产虫草素的培养基配比为4%蔗糖,1.5%蛋白胨,0.05%MgSO4·7H2O,0.05%K2HPO4,4.0mg/l NAA的培养基;在最佳蛹虫草深层发酵产虫草素的工艺条件下,CM8菌株胞外虫草菌素产量达到961.21 mg/l,胞内虫草菌素的含量达到12.87mg/g;菌丝体的产量为22.97 g/l,本研究得出的结论对深层培养提高蛹虫草虫草菌素和菌丝体的产量有借鉴意义。     

蛹虫草菌株选育及产业化生产技术:蛹虫草生产的新途径

省微生物所研发的蛹虫草菌株选育及产业化生产技术应用研究项目属于农业技术领域的研究范畴。项目广泛收集蛹虫草出发菌株,进行遗传差异分析和优质高产、抗逆及耐高温型菌株选育;筛选富硒培养基及富硒蛹虫草栽培技术研     

蛹虫草液体的深层发酵

以菌丝体质量浓度(干重)和发酵液中甘露醇浓度为指标,研究温度、初始pH值、培养时间等因素对蛹虫草液体培养的影响,得到蛹虫草摇瓶液体培养的最佳温度为25.0℃,初始pH值为6.10,培养时间为5 d;蛹虫草液体发酵最适培养基的组成为:20 g/L蔗糖+5 g/L蛋白胨+1 g/L MgSO4.7H2O。在此基础上进行小型分批式发酵罐实验,研究有利于蛹虫草生长及活性物质生成的pH控制策略。研究结果表明,pH分段控制的液体深层发酵对蛹虫草生长最为有利,菌丝体质量浓度为17.31 g/L,甘露醇质量浓度达43.47 g/L。     

分子荧光测定蛹虫草中硒的含量

采用分子荧光法测定蛹虫草富硒前后硒的含量，优化了测定条件，研究不同的消解方法对测定的影响，为蛹虫草富硒培养条件的筛选提供了准确快速的测定方法．     

黑木耳富硒发酵条件的优化

为获得富硒黑木耳菌丝体,以亚硒酸钠为硒源对黑木耳(Auricularia auricular)高产菌株G6进行富硒发酵条件优化.以菌丝体性状和菌丝体硒含量为指标考查不同硒质量浓度对其生长的影响,并确定最适硒质量浓度;通过单因素和正交实验对G6菌株液体富硒发酵条件进行优化.结果,培养基中硒质量浓度＜50 mg/L时,菌丝体的硒含量随硒质量浓度的提高而提高;硒质量浓度为50 mg/L时,菌丝体硒含量最高,为8.5 μg/g;硒质量浓度＞50mg/L时,硒含量不升反降.表明适量亚硒酸钠有利于菌丝体对硒的吸收和利用,过量添加时则抑制菌丝体生长,不利于菌丝体对硒的吸收和利用.优化后的富硒黑木耳G6菌株液体发酵培养条件为硒质量浓度50mg/L,玉米粉15 mg/L,豆饼粉20 mg/L,装液量200 mL/500 mL三角瓶,转速160 r/min,25℃发酵培养6d.发酵液中菌丝体硒质量分数达到9.2 μg/g,发酵液多糖质量浓度可达3.7 g/L.     

黑木耳的富硒发酵

本实验以亚硒酸钠（Na2 SeO3）为硒源对黑木耳进行富硒发酵,以获得富硒黑木耳发酵液,为有机硒多糖等开发利用提供依据.用3种不同碳氮源培养基26℃于200rpm进行液体发酵,在不同时间测定黑木耳菌丝体多糖含量和生物量,确定了最优培养基（每升）为葡萄糖20g,豆饼粉5g,硫酸镁0.5g,磷酸二氢钾2g.在优选培养基中通过添加不同浓度的亚硒酸钠对黑木耳进行富硒发酵.结果与不添加亚硒酸钠黑木耳发酵液相比,在硒浓度为10-50mg/L时,黑木耳菌丝体的硒含量和生物量及发酵液多糖含量均随硒浓度的增加而提高;在50mg/L时,硒含量、生物量和多糖含量达最高,分别为10.48μg/g、9.37g和L20.3g/L;当亚硒酸钠浓度高于50mg/L时,菌丝体硒含量降低,生物量、多糖含量亦下降.结果表明,黑木耳具有较好富硒能力,但培养基中亚硒酸钠的浓度会影响发酵液中多糖含量和黑木耳菌丝体的富硒效果.与不添加亚硒酸钠黑木耳相比,添加适量亚硒酸钠有利于黑木耳菌丝对硒的吸收利用,并可促进黑木耳生长和多糖含量的提高;但过量添加,则可抑制黑木耳生长并降低多糖含量和对硒的利用率.     

人工固体发酵培养冬虫夏草菌丝体的研究

人工固体发酵培养冬虫夏草菌丝体。结果表明，固体发酵培养的冬虫夏草菌丝体的虫草多糖含量高于天然冬虫夏草，氨基酸含量与天然冬虫夏草接近。     

冬虫夏草与虫草菌丝有效成分分析比较

对冬虫夏草及其无性型（ＴｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍｓｉｎｅｎｓｅＣ．Ｌ．Ｌｉ．）的虫草多糖。红外光谱、甘露糖、氨基酸、微量元素等作了分析和比较。发现二者成分比较近似,通过急性毒性实验Ａｍｅｓ实验,微核实验表明虫草菌丝安全无毒。     

冬虫夏草显微结构再观察和子囊孢子发育研究

经过对冬虫夏草模式标本,来自不同地区包括尼泊尔和不丹的冬虫夏草标本以及类似冬虫夏草的甘肃虫草,阔孢虫草,多虫草和尼泊尔虫草等标本或模式的形态学和子囊孢子发育生理学的研究,证明尼泊尔和多技虫草均为冬虫夏草的同物异名。阔孢虫草和甘肃虫草也可能是冬虫夏草的同物异名。     

蛹虫草的研究Ⅳ．蛹虫草与冬虫夏草化学成分比较

人工蛹虫草与野生冬虫夏草的子实体经测定分析，二者都含有蛋白质、糖、脂肪、多种无机元素和维生素、１８种氨基酸、虫草菌素、虫草酸、虫草多糖和ＳＯＤ等化学成分，在含量上基本相似，有些成分含量高于冬虫夏草．蛹虫草可以替代冬虫夏草食用或药用     

冬虫夏草无性型的分子鉴别

采用分子生物学手段,以ｒＤＮＡＩＴＳ区为分子指标,对冬虫夏草Ｃｏｒｄｙｃｅｐｓｓｉｎｅｎｓｉｓ的有性和无性阶段进行比较分析,从分子水平证明冬虫夏草的无性阶段是中国被子毛孢Ｈｉｒｓｕｔｅｌａｓｉｎｅｎｓｉｓ．     

北虫草及其活性成分的研究与开发

冬虫夏草为非常珍贵的天然药材,资源严重缺乏,价格已超过黄金,无法满足社会需求。因北虫草的化学成分和药理功能与冬虫夏草非常相似,其主要功能活性物质含量高于天然冬虫夏草,被作为冬虫夏草的最佳替代品,受到广泛关注和重视,本文总结了近年来北虫草及其生物活性成分的研究与开发结果。     

实验室条件下西藏冬虫夏草幼虫生理机制变化研究

为研究实验室条件下西藏冬虫夏草幼虫对温度、湿度、病害等条件的生理反应以及西藏冬虫夏草幼虫的食性情况,文章对西藏冬虫夏草幼虫的外部形态及其对温度和湿度的反应及食性等方面进行观察,并绘制出西藏冬虫夏草幼虫生长曲线。结果表明：①实验室中培养西藏冬虫夏草幼虫的最佳温度范围为12℃-14℃;②西藏冬虫夏草幼虫最喜啃食红萝卜,其次为土豆和莴笋;③西藏冬虫夏草幼虫对温度具有很高的敏感性,当温度达到20℃时,幼虫完全失去活动的能力,并且此时幼虫身体表面容易感染病菌。     

虫草中两种核苷类活性成分的毛细管电泳研究

虫草素和腺苷是虫草属药用真菌的主要核苷类活性成分，以往多用薄层扫描和高压液相法进行分离。本文建立了毛细管区带电泳分离测定虫草素和腺苷的分析方法，并测定了四种不同的虫草中虫草素和腺苷的含量及不同提取时间对虫草素和腺苷含量的影响。首次报道了九州虫草中虫草素的存在。采用0.025mol/L的硼砂（pH9.4）作为缓冲液，在电压为20kV和检测波长为258nm的条件下，4种虫草水提液是的虫草素和腺苷获得了基线分离，并具有良好的精密度和重现性。同时发现蒙山九州虫草中虫草素的含量甚高，具有良好的药用前景。     

中国虫草Cordyceps sinensis的研究：Ⅲ多样性初探

就中国虫草分类定种中的个种多样化趋势，结合产区生态和物种演化是提出新的认识，即中国虫草是青藏高原是其相邻余脉特殊区域内物种适应与分化的结果，同时其自身也呈进一步分化的趋势。这将是中国虫草生物多样性的理论依据。     

蝙蝠蛾被孢霉[新种]的形态学研究

从四川省汶川县采得的冬虫夏草Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.新鲜样品子座和菌核分离到一种产虫草素(Cordycepin)的真菌新种,定名为蝙蝠蛾被孢霉Mortierella hepiali Chen et Liu sp.nov..本文报道了这个新种的形态学特征。     

Phylogenetic relationships of host insects of Cordyceps sinensis inferred from mitochondrial Cytochrome b sequences

This study used the sequence of the mitochondrial Cytochrome b(Cytb)to estimate phylogenetic relationships among host Hepialidae insects of Cordyceps sinensis.Genome DNA of host insect was extracted from the dead larva head part of 18 cordyceps populations and 2 species of Hepialus,and the Cytb fragment of host insect was amplified with PCR technique.The nucleotide sequence alignments and their homologous sequences of 24 species host Hepialidae insects of Cordyceps sinensis were obtained from GenBank and were used to construct phylogenetic trees based on neighbor-joining method.The results showed that genus Bipectilus diverged earlier than genus Hepialus and Hepialiscus.Hepialus host insects of Cordyceps sinensis have multitudinous species with different morphological characteristics and geographical distributions.The interspecific genetic differentiations are obvious in Hepialus.Thus,the genus Hepialus might be considered as polyphyletic origin.Cytb sequences have abundant variations among the host insects of Cordyceps sinensis on spe- cific and generic level.The divergence rate of Cytb sequences among the species in Hepialus ranged from 0.23% to 9.24%,except that Hepialus pratensis and Hepialus jinshaensis have the same sequence.Cytb sequence can be used for species identification of host insects of Cordyceps sinensis,but further confirmation in more host insect species is needed.To obtain the Cytb sequence of host insect by ampli- fying DNA extracted from the head part of dead larva in cordyceps turns out to be an effective and accurate approach,which will be useful for studies on phylogeny and genetic structure of host insects of cordyceps populations,especially for analyzing relationships between C. sinensis and its host insects.