杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生的扫描电镜观察

利用电子扫描显微镜(SEM)对杂交鹅掌楸体细胞胚胎发生发育途径进行观察研究。结果表明,非胚性愈伤组织和胚性愈伤组织在表面结构上存在着明显的差异。胚性愈伤组织细胞体积较小,大小均一,多以细胞团形式存在,呈球形;非胚性愈伤组织细胞体积较大,不易成团,细胞之间孔隙较多。胚性细胞迅速增殖,其中一些细胞形成体胚的原始细胞,依次经历球形胚、心形胚、鱼雷胚和子叶胚发育成完整植株,在体胚发育过程当中保持较好的同步性和独立性。杂交鹅掌楸组织培养产生的胚状体具有明显的两极性和相对的独立性,体细胞胚尤其是成熟体胚与愈伤组织结合较松,易自行脱落。     

葡萄胚状体发生的初步研究

由葡萄(Vitis Vinisera L)花药愈伤组织产生的胚状体形成单倍体幼苗后,经4—5次继代培养,发现其表皮细胞具有形成胚状体和进一步发育成幼苗的能力。胚状体的表层也具有同样的能力。将这样的一棵幼苗,整株置于液体培养中,在黑暗中震荡培养一周,然后在光照下静止培养,可获得大量完整的小植栋。实验结果证明葡萄单倍体的体细胞具有再生完整植株的全能性。在植物组织和细胞培养中,通过胚状体再进一步形成幼植物具有繁殖数量多、成苗速度快和结构完整的特点。因此,对于胚状体发生的研究,已经引起人们广泛的注意。目前,在植物的组织培养中,记载有胚状体发生的植物已涉及到广泛的分类类群,产生胚状体的离体培养物也有多种多样。但是对于胚状体形态发生的详细研究报导甚少。在1965年,Konor和Nataraja利用石龙芮的下胚轴进行切片观察时,看到了一系列胚状体发生的组织学过程。1970年Backs-Hüseman,D等在胡萝卜的单细胞悬浮培养中,见到了游离单细胞发育成胚状体的过程,1974年,Sunderland等在烟草中,也报导了小孢子胚状体的发生过程。但是,在具有经济价值的木本果树中,尚无这方面的报导。本文以葡萄单倍体幼苗为材料,进行切片观察和培养,对葡萄胚状体的发生进行了初步的探讨。     

胡萝卜体细胞胚胎发生 Ⅱ胡萝卜体细胞胚的组织学和细胞起源

通过大量的叶柄外植体培养系统切片观察及悬浮细胞和平板培养证明,胡萝卜体细胞胚一般是由单个胚性细胞分裂经2,3,4细胞的原胚阶段发育为胚状体的,进一步证明了其单细胞的起源。实验中也观察到有由愈伤组织细胞团内部的多个细胞共同形成胚状体的现象,和文献中所述的多细胞起源十分类似。     

旱芹人工种子内培养物的形态发生和生理生化的研究

本文讨论有关旱芹人工种子内部培养物由体细胞脱分化产生胚性细胞、胚状体,直到成株的过程中形态发生的问题,对胚性细胞所处的状态、胚状体筛选和畸形胚、胚性细胞(团)或子叶胚包裹人工种子及其萌发特点、播种基质等等方面进行了分析比较,并提出一些有关旱芹人工种子研制的基本结论。 实验对培养物的叶绿素含量和过氧化物同工酶谱进行了测定,并得到了水溶性蛋白和过氧化物酶的培养时间曲线,以期从生化指标探讨人工种子这一特定条件下培养物的生理生化变化。     

小麦体细胞胚胎发生的细胞组织学研究

以小麦的幼穗为外植体，接种于Ｎ６Ｂ５ＭｓＩ培养基上，３０ｄ后可形成大量愈伤组织．该愈伤组织继代１次后即产生淡黄色颗粒状的胚性愈伤组织和白色致密状的非胚性愈伤组织．将此两种愈伤组织分别转入Ｎ６Ｂ５ＭｓⅡ培养基上，２５ｄ后胚性愈伤组织分化形成大量体细胞胚．本实验从外植体接种后的０～２５ｄ及胚性愈伤组织转入Ｎ６Ｂ５ＭｓⅡ培养基后的０～２６ｄ各分期取样固定，切片观察表明：小麦的幼穗诱导体细胞胚亦为间接发生，且多为外起源．但体细胞胚的发生既有来自于单个胚性细胞的，也有可能来自于多个胚性细胞或分生细胞团，经细胞分裂和分化发育而形成体细胞胚     

玉米茎尖培养研究(Ⅱ)--体细胞胚胎发生的组织细胞学研究

以玉米茎尖分生组织为外植体，在离体培养条件下诱导体细胞胚胎(胚状体)发生。组织细胞学观察表明，玉米茎尖分生组织在离体培养条件下可直接产生胚性愈伤组织，后者在继代培养中发生胚状体。多数胚状体起源于愈伤组织的表层细胞和表层之下的几层细胞，少数产生于愈伤组织的较深层。胚状体发生于单细胞，发育过程与合子胚大致相似。多数胚状体发育正常，具有一个芽端和一个胚根端。少数胚状体形成具多个芽端而共用一个胚根端的次生连体胚。胚状体发生不同步。胚状体只有在分化培养基上才能发育成熟。     

小麦体细胞胚胎发生过程的研究

以小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍａｅｓｔｉｖｕｍ）幼胚愈伤组织为材料，研究了小麦的体细胞胚胎发生过程．切片观察表明：小麦的胚状体发生有两种方式，表面发生和内部发生．胚状体来源于愈伤组织中的单个原始胚性细胞．胚状体的发育经历了单个胚性细胞、胚性细胞团、球形胚、心形胚、成熟胚阶段．木实验支持胚状体单细胞起源的学说．     

石防风胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚的发生

石防风幼苗的根在含0.1-50mg/L 2,4-D的 MS 培养基中能诱导产生愈伤组织,最适浓度为0.5mg/L.愈伤组织来源于中柱内部的细胞。在0.5mg/L2,4-D 存在下,细胞分裂生长并发育至胚性细胞团或原胚,转移至无激素培养基后,愈伤组织表面及内部分化出发育阶段不同的体细胞胚,最后发育成为完整植株。在初生幼苗的胚轴上(有时在根或叶)常有次级胚的发生,它们能继续长成次级苗,并在苗上再次长胚,如此不断,直至多次。由此可见石防风体细胞胚发生的能力,是十分强大的。     

仙客来(Cyclamen persicum Mill)体细胞胚的发生及组织细胞学的研究

以仙客来开花植株新生叶片为外植体,成功诱导、筛选出体细胞胚发生的胚性愈伤组织,胚性愈伤组织的形态有两种：微棕红色松软愈伤和松脆愈伤.显微镜下观察松软胚性愈伤多为含有数十个胚性细胞的胚性细胞团,而松脆胚性愈伤的胚性细胞团的胚性细胞数目只有几个或十几个.细胞学观察二者均包含前胚性细胞团、二细胞、四细胞、八细胞,进一步继代培养2周可观察到多细胞原胚、球形胚、梨形胚、心形胚、鱼雷胚的出现,大多数体胚60～90 d可发育成完整的小植株.     

仙客来(Cyclamen persicum Mill)体细胞胚的发生及组织细胞学的研究

以仙客来开花植株新生叶片为外植体,成功诱导、筛选出体细胞胚发生的胚性愈伤组织,胚性愈伤组织的形态有两种:微棕红色松软愈伤和松脆愈伤.显微镜下观察松软胚性愈伤多为含有数十个胚性细胞的胚性细胞团,而松脆胚性愈伤的胚性细胞团的胚性细胞数目只有几个或十几个.细胞学观察二者均包含前胚性细胞团、二细胞、四细胞、八细胞,进一步继代培养2周可观察到多细胞原胚、球形胚、梨形胚、心形胚、鱼雷胚的出现,大多数体胚60～90 d可发育成完整的小植株.     

玉米愈伤组织的扫描电镜观察

用扫描电镜观察了玉米愈伤组织在继代周期中的变化及其胚状体发生过程。结果表明,愈伤组织的胚性与表面结构有明显关系。继代半年和一年半的胚性愈伤组织表面结构无显著差异,均可产生大量正常和畸形胚状体。正常胚状体可通过类似合子胚的分化或不规则发育过程而成熟。畸形胚形态多样,其中多数盾片异常。根据观察认为,胚状体一般是多细胞起源的。     

具高分化潜能的枸杞胚性悬浮细胞系的建立及保存

本文主要报道了具有高度植株再生潜能的枸杞优质胚性悬浮系的建立与保存方法．首次应用枸杞髓部组织诱导出Ⅱ型胚性愈伤组织，Ⅱ型胚性愈伤组织在ＭＳ液体培养基中增殖快（３天即可加倍），分散好，两周左右即可建立起优质悬浮系；悬浮细胞在液体分化培养基中能得到大量的胚状体，未经过滤建立起的悬浮系比经过过滤建立起的悬浮系能得到更多的胚状体．长时间悬浮培养后，枸杞胚性悬浮系再生能力下降，在固体培养基上培养一段时间后，转回液体培养基可使再生能力得以保持与恢复     

l－群根类的Jakubik反原子

对Ｊａｋｕｂｉｋ问题作了进一步深入研究，证明了满足Ｊａｋｕｂｉｋ问题的根类是真类     

裸燕麦不同发育时期的茎尖外植体中内源激素与体细胞胚胎发生的关系

裸燕麦的茎尖开始拉长,小穗原基开始分化和小穗形成三个不同的分化阶段的外植体在诱导体细胞胚胎发生时,随小穗原基的分化和形成过程,要求外源2.4-D浓度越来越高内源生长素(1AA)和细胞分裂素(CTK)分析结果表明三个不同分化阶段的1AA/CTK比值分别为1.36:1,l:1.02和1:2.08,而脱分化的愈伤组织和胚性愈伤组织中二者比值分别为1.81:1和5.10:1。我们推测,体细胞胚胎发生过程中内源生长素的高比值是要求大量提高外源2.4-D浓度的原因。     

Mechanisms of plant somatic embryogenesis

Based on our experimental results and the related research reports, this review addresses some important issues about plant somatic embryogenesis. Once plant somatic cells develop into embryonic cells, the organelles of the cells increase, and their function is active. In the early stage of embryogenic cells, the reaction products of AT-Pase are mainly deposited on the plasma and vacuole's membranes, then the activity of ATPase can be found in the cytoplasm, vacuole and nucleus in the late stage of embryogenic cells. ATPase-catalyzed reaction occurs actively in the thickened wall of embryogenic cells. Endogenous hormone is a critical factor affecting somatic embryogenesis. Superox-ide dismutase (SOD) activity, which is closely related to embryogenic cell differentiation, is much higher in differentiated embryogenic cells than in undifferentiated cells, indicating that embryogenic cells have stronger function of antioxida-tion. In addition, the lower level H2O2 can promote embryogenic cell differentiation. The programmed cell death (PCD) exists in the process of embryogenic cell differentiation and development, and the active oxygen species plays an important role in inducing of plant PCD.     

两种小麦的原生质体培养再生植株

报道两种基因型小麦昌乐5号和山农587胚性悬浮细胞系的建立和原生质体再生植株。小麦昌乐5号和山农587的胚性愈伤组织继代一年以后形成部分颗粒状和粉粒状结构,可用于悬浮培养。当分散好、生长快的胚性悬浮细胞系形成后,即可作为原生质体培养的材料。较长时间的悬浮培养容易使材料的胚性丧失,昌乐5号的胚性悬浮细胞系20天左右建成,其原生质体再生植株的频率为14/10~5(再生植株数/植板的原生质体数);而山农587的悬浮培养物需5个月以后才能用于原生质体培养,其原生质体再生植株的频率仅为4/10~6。     

器官分化与PAL活性及花色素苷累积的关系

通过适当的激素调控,胡萝卜、蒲公英愈伤组织可分化出芽、根和胚状体,其芽的分化与花色素苷累积存在密切关系、胡萝卜愈伤组织在器官分化过程中,PAL分别在第3、20天有一峰值,第二峰值与器官分化有一定关系。     

Germinal centre B cells: antigen specificity and changes in heavy chain class expression

Germinal centres are histologically defined aggregates of blast cells that occur in B-cell areas of lymphoid tissues after antigenic stimulation. They are believed to be associated with the development of B-cell memory and plasma cell (especially secondary, IgG and IgA) responses. Recent studies of murine lymphoid tissues have defined cell-surface markers that distinguish germinal centre B cells from other mature B cells, permitting their identification and characterization in cell suspensions. Here we have used these markers to define and study germinal centre cells in lympho nodes, and have found that they constitute a unique population of B cells which (1) arises in response to antigenic stimulation, (2) contains nearly all of the demonstrably antigen-specific B cells in the stimulated organ, (3) bears surface IgM after primary stimulation and (4) as a population, demonstrates isotype switching to a predominant population, demonstrates isotype switching to a predominant surface IgG phenotype after secondary stimulation with specific surface IgG phenotype after secondary stimulation with specific antigen. These findings demonstrate that germinal centres are a major site of proliferation and differentiation of antigen-specific B cells in vivo, and suggest that the germinal centre microenvironment may have an important role in heavy chain class switching during B-cell responses.     

蛇床胚状体发生的扫描电镜观察

本文应用扫描电子显微镜对蛇床幼茎愈伤组织进行了观察、发现非胚性愈伤组织由多种形状的细胞无序堆积而成;在胚性愈伤组织中,出现了由近球形的厚壁细胞组成的细胞团,细胞的表面具腺毛结构,腺毛由球形的头部和短的柄部组成。