水稻悬浮体细胞胚胎发生及其特异蛋白

以水稻优良品种吉农大８号成熟种子为实验材料,建立了悬浮体细胞胚胎发生体系,并获得再生植株,对其发生过程中特异蛋白的变化,以及诱导中胚性与非胚性愈伤组织的差异等问题进行了探讨,为将来深入研究体细胞胚胎发生机理奠定了基础,实验结果表明,不同培养偌上诱导的胚性愈伤组织的发生频率是不同的,基本培养基ＮＭＢ诱导形成的愈伤组织在适当激素浓度下,可由悬浮培养产生体细胞胚,转移到固体培养基上后,得到再生植株,对这一过程进行的组织学观察证实该形态发生途径是单细胞起源的体细胞胚胎发生,利用ＳＤＳ－聚合烯酰胺凝胶电泳比较体细胞胚胎发生中不同时期可溶性蛋白组分的差异,发现相对分子质量为５９０００的蛋白组分存在于分化初期的球形胚中,相对分子质量为５６０００的蛋白组分仅在早期成熟胚中出现;在分化出幼叶的晚期成熟胚中具有相对分子质量为３２０     

小麦胚性细胞发生中淀粉代谢动态的量化研究

结合生物学研究，应用计算机图像技术，根据细胞形态计量学原理，以量化形式揭示了小麦胚性细胞发生中淀粉的代谢动态。研究结果表明，在小麦体细胞胚发生过程中淀粉的代谢呈现动态变化，在胚性细胞形成时，单个胚性细胞内淀粉的积累达到第一个峰值５．００９８％，随着胚性细胞的分裂，淀粉含量逐渐下降，球形胚期淀粉再次积累，形成第二个峰值２．３６５６％，还结合量化结果讨论了淀粉代谢动态与体细胞胚发生，发育过程的关系。     

宁夏枸杞愈伤组织器官发生和体细胞胚发生过程中过氧化物酶和酸性磷酸酶同工酶的研究

利用已建立的宁夏枸杞（Ｌｙｃｉｕｍ ｂａｒｂａｒｕｍ Ｌ．）叶愈伤组织器官发生和体细胞胚发生体系,比较研究了两条离体再生途径早期阶段愈伤组织的生长特性、过氧化物酶（ＰＯＤ）和酸性磷酸酶同工酶的活性及酶谱的变化。结果表明：（１）与继代愈伤组织的“Ｓ”形生长曲线不同,器官发生和体细胞胚发生过程的愈伤组织生长延迟期不明显,且第３ｄ后一直处于指数生长期,培养后期器官发生的愈伤组织生长速率快于体细胞胚发生;     

花卉体细胞胚胎发生研究进展

综述花卉体细胞胚胎发生途径、体细胞胚胎发生过程的生理生化变化及其影响因素、体细胞胚胎发生与胚性基因的表达和花卉体细胞无性系变异等方面的研究进展,植物体细胞胚胎发生研究在基因工程体细胞融合、细胞突变体诱导、人工种子、杂种合子胚的挽救、种质保存、苗木快速繁殖等诸多方面有着广阔的应用前景,也是遗传学、转基因工程体系、生理生化、植物发育过程的基因表达和调控、功能基因组研究等方面一个必不可少的新兴研究系统.     

红皮云杉体胚发生体系优化和超低温保存技术研究

【目的】通过对红皮云杉(Picea koraiensis)体细胞胚胎发生条件的筛选和超低温保存技术研究, 建立其完整的体胚发生体系及超低温保存条件,为红皮云杉优良种质资源的大量繁殖及保存提供基础。【方法】以红皮云杉合子胚为外植体,以两种基本培养基、6种植物生长调节剂组合为培养条件,筛选胚性愈伤组织诱导的适宜条件。并将获得的胚性愈伤组织进行超低温保存和体胚发育与成熟萌发试验,以3种脱落酸(ABA)和Gelrite浓度以及4种基本培养基为培养条件,筛选出体胚成熟和萌发的适宜培养条件。【结果】①两种基本培养基相比较,改良RJW(诱导率为30.00%)优于1/2 LV(诱导率为22.50%)基本培养基。当萘乙酸(NAA)质量浓度为3.0 mg/L、6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)质量浓度为0.5 mg/L时胚性愈伤组织诱导率最高为50.00%;② 胚性愈伤组织增殖培养3个月后进行超低温保存试验,经恢复培养10 d 左右可以清晰地观察到成活的胚性愈伤组织,3个细胞系的胚性愈伤组织均可成活;③ 体胚发育阶段,改良RJW培养基添加Gelrite 6.0 g/L和ABA 20 mg/L时,3个细胞系体胚数量均较高,但是畸形胚比例也偏高,特别是HY-1细胞系畸形胚比例高达77.14%;当Gelrite质量浓度增加到8.0 g/L时,3个细胞系畸形胚比例均降低, 其中HY-2细胞系体胚数量为396.00个/g,畸形胚比例为10.33%;④ 红皮云杉体胚成熟培养两个月进行体胚萌发,在1/2 LM上体胚萌发能力最弱,其次是LM基本培养基,改良RJW体胚萌发能力最佳。不同细胞系体胚萌发能力也不同,体胚萌发能力最高为65.00%。【结论】① 胚性愈伤组织诱导的适宜培养基为改良RJW基本培养基,适宜的激素组合为NAA 3.0 mg/L + 6-BA 0.5 mg/L;② 本试验进行超低温保存的细胞系均可成活;③ 体胚发育与成熟适宜的ABA质量浓度为20 mg/L,适宜Gelrite质量浓度为8.0 g/L;④ 体胚萌发的适宜基本培养基为改良RJW基本培养基。本研究建立了红皮云杉体胚发生体系并成功进行胚性愈伤组织的超低温保存条件,该技术体系可用于红皮云杉优良种质的快速繁殖。     

不同光照条件下龙眼体胚发生过程中过氧化物酶同工酶酶谱分析

试验以龙眼胚性愈伤组织为材料,研究不同光照条件对龙眼体细胞胚胎发生各阶段过氧化物酶(POD)同工酶的影响。结果表明:龙眼体细胞胚胎发生各阶段过氧化物酶(POD)同工酶出现了很大的变化。酶带数量总的变化趋势是胚性愈伤组织谱带条数较少,球形胚发生过程中增多,到了子叶形胚后谱带条数又减少;不同光照条件下,蓝光的谱带条数最多,说明不同光照条件对龙眼体细胞胚胎发生有不同效应,意味着蓝光条件下体细胞胚胎内物质代谢是最活跃的,蓝光对体细胞胚胎生长有促进作用。     

PSK对杂交鹅掌楸悬浮培养细胞生长的影响

以杂交鹅掌楸悬浮培养胚性细胞为材料,在培养过程中添加不同浓度的新型植物肽类生长调节物质植物磺肽素(PSK),研究PSK对悬浮细胞生理的影响,分析其在细胞培养中的作用。结果表明:PSK能够促进细胞分裂和增殖,0.8 mg/L的PSK处理后能够使杂交鹅掌楸胚性愈伤组织细胞结构致密、胚性细胞小、直径一致性增加、细胞质变浓,细胞内大量积累淀粉等,同时PSK显著提高了细胞的活力,促进了培养细胞低密度的增殖,并且能够促进蛋白质的积累,有利于杂交鹅掌楸体细胞胚胎的发生。     

植物生殖与胚胎发育过程中的细胞程序性死亡

生殖与胚胎发育过程中植物细胞程序性死亡（ＰＣＤ）的典型特点在于它的细胞类型特异性。即在特定时期，只有特定的细胞才会发生ＰＣＤ。介绍了植物生殖和胚胎发育过程中各种类型的细胞在特定时期所发生的ＰＣＤ的形态和生化特征。这些ＰＣＤ类型包括大小孢子的退化、单性花的形成、性别决定、心皮通化、花粉发育及绒毡层的解体、胚胎发育过程中胚柄及糊粉层的消失以及体细胞胚胎发生等。同时对植物生长和发育过程中ＰＣＤ的作用及其     

手性固定相合成中原料YWG-NH_2与Spher-NH_2性能的比较

利用液相色谱手性固定相进行手性分离的研究越来越多，因此手性固定相的合成也就成了该项研究中必不可少的关键问题．在手性固定相的合成中氨丙基硅胶作为手性固定相的键合基体，其性质的好坏直接影响手性固定相的手性分离能力．分别利用国产和进口分装的氨丙基硅胶作基体，合成结构完全相同的手性固定相，结果表明进口的氨丙基硅胶合成的手性固定相的性能优于用国产氨丙基硅胶合成的手性固定相，并论述了可能产生这种差别的原因．     

银杏胚乳不同发育时期生理代谢变化与其胚性感受态的相关性研究

【目的】探究银杏胚乳发育时期生理变化与其胚性感受态之间的关系,筛选出高感受态的银杏胚乳外植体,为开展银杏体细胞胚发生的研究及建立银杏体胚发生体系提供支持。【方法】以6月10日—9月15日不同时间段的银杏胚乳为材料,研究各时间段银杏胚乳的抗氧化酶活性、可溶性蛋白、黄酮、内源激素含量变化及与其愈伤组织诱导率的相关性。【结果】银杏胚乳发育及其胚性感受态可以分为3个阶段:第1阶段为6月10日—6月30日,此时胚乳虽然细胞生理代谢旺盛,含水率和超氧化物歧化酶(SOD)活性较高,吲哚乙酸(IAA)与脱落酸(ABA)比值较高,易诱导愈伤组织,但其愈伤组织为松散易褐化的非胚性愈伤组织,胚性感受态水平较低。第2阶段为6月30日—8月10日,期间的胚乳抗性酶活性、黄酮含量、IAA与ABA比值都处于较低水平,而玉米素核苷(ZR)+异戊烯基腺苷(iPA)与ABA的比值处于较高水平;第3阶段为8月17日—9月15日,其胚乳可溶性蛋白含量以及过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性较高,黄酮含量达到峰值,IAA与ABA的比值处于较高水平,且ZR+iPA与ABA的比值处于较低水平,胚性感受态水平高,胚性愈伤组织发生率最高。第2阶段愈伤组织诱导率比第1和第3阶段都低,胚性感受态也较第3阶段低。【结论】3个不同阶段胚乳发育时期胚性感受态强弱和胚性愈伤组织诱导能力的排列顺序为第3阶段>第2阶段>第1阶段,7月20日—9月15日的胚乳胚性感受态较高,是诱导胚性愈伤组织较好的时期。     

小冠花高效体细胞胚胎发生与植株再生的研究

目的建立小冠花稳定高效体细胞胚胎植株再生体系。方法采用植物离体组织培养技术,通过优化外植体,基本培养基及其激素组合,提高体细胞胚发生和植株再生频率。结果子叶外植体在附加1.0mg/L 2,4-D,1.0mg/L NAA,0.5mg/L KT和100mg/L脯氨酸的MSB培养基上35d100%形成体细胞胚,产生体细胞胚数量达625个/g,在MS KT 1.0mg/L IBA 0.1mg/L 脯氨酸300 mg/L培养基上转换成完整植株的平均数为21棵/g。再生植株移栽成活率为80%,其形态特征和生长习性未见变异。外源激素是体细胞胚胎诱导所必需的,2,4-D是其中最关键的一种。结论建立了小冠花高频稳定高效体细胞胚胎发生和植株再生体系。     

人参体细胞胚胎发生过程中的生理变化

采用考马斯亮蓝G-250染色法、蒽酮法、愈创木酚法等方法,研究了人参体细胞胚胎发生中可溶性蛋白、多糖及淀粉含量和POD及PPo活性的变化,并对体细胞胚发生的不同时期培养物内源LAA和ABA含量进行了测定.结果表明,多糖和淀粉含量在早期胚时较低,可溶性蛋白含量、POD及PPO活性和IAA含量在早期胚时最高;在成熟胚时期,ABA含量最高,且ABA与IAA的比值在成熟胚时也较高.说明多糖和淀粉参与调节胚性细胞的分化和发育过程,POD及PPO和可溶性蛋白与早期胚形成密切相关;ABA与IAA比值高有利于体细胞胚的发育成熟.     

豌豆顶芽衰老过程中的显微、超微结构和nDNA的变化

显微、超微结构研究表明 ,短日照条件下豌豆顶芽的衰老过程是从营养生长锥向花芽的转化 ,而用DNA原位末端标记 (TUNEL)、Caspase 8WesternBlot和 14 0bpDNA片断积累的试验结果证明 ,转化为花芽的整个生长锥细胞发生了编程性死亡 (PCD) ,而且其最顶端部分细胞首先发生PCD ,而顶端周围的分生组织细胞逐渐分化出花芽的各部分 ,但顶芽最后并没有发育成为完整的花 ,所有细胞就都发生PCD ,从而顶芽衰老     

维管植物导管元素分化与细胞程序性死亡

通过遗传控制的细胞死亡是植物正常生长和发育的重要过程，是近年来国内外的研究热点之一。维管植物的导管和筛管由死亡的管导分子组成，本文着重讨论了维管植物的导分子形成过程中的细胞程序性死亡（ｐｒｏｇｒａｍｍｅｄ ｃｅｌｌｄｅａｔｈＰＣＤ）的形态和化特性以及参与找在因，并介绍了植物生长发育过程中ＰＣＤ存在的时空广泛性。虽然植物发育生殖过程中的ＰＣＤ与动物细胞通过遗控制的细胞死亡是植物正常生长和发育的重要过程，是近年来国内外的研究热点之一，维管植物的导管和筛管由天文馆的导管分子组成。本文着重讨论了维管植物的导管分子形成过程中的细程序性死亡（programmed cell death PCD)的形态和生化特征以及参与的基因，并介绍了植物生长发育过程中ＰＣＤ存在的时空广泛性。虽然植物发育和生殖过程中的ＰＣＤ与动物细胞凋亡存在许多相似的形太必生化特征，但细胞通过自溶或自自我吞噬来死亡，而并不形成动物细胞凋亡中典型的凋亡小体。说明这些ＰＣＤ类型本质上凋亡型ＰＣＤ。导管分子的死亡是一种典型的植物ＰＣＤ。近年来体外系统研究表明，导管元素分析中的细胞死亡程序与动物细胞凋亡不同。     

茉莉酸甲酯对杂交鹅掌楸体胚发育的影响

【目的】探讨作为植物生长调节剂的茉莉酸甲酯(MeJA)对杂交鹅掌楸体胚发育的影响,为进一步提高杂交鹅掌楸体胚发生效率奠定基础。【方法】在已建立的杂交鹅掌楸未成熟胚体细胞发生体系的基础上,选用杂交鹅掌楸3种基因型C138、233012、253010为材料,分别添加5种浓度的茉莉酸甲酯,测定杂交鹅掌楸在添加不同浓度茉莉酸甲酯条件下的体胚发生率、成熟率、畸形胚发生率,以及再生植株率。【结果】在体胚诱导培养基中添加不同浓度的MeJA可以显著影响杂交鹅掌楸体胚发生效率,且随着MeJA浓度的增加,体胚发生率和成熟率逐渐升高,畸形胚发生率逐渐降低,而当MeJA浓度超过一定值后,体胚发生率和成熟率呈现下降趋势,畸形胚发生率也逐渐升高。杂交鹅掌楸3种基因型体胚发生率和成熟率从高到低的次序为233012、C138、253010。脱落酸(ABA)能够增强MeJA的上述效应。在体胚苗的生长阶段,浓度逐渐升高的MeJA限制了根的生长,但ABA不能改变该效应。【结论】添加1 μmol/L MeJA和2 mg/L ABA时杂交鹅掌楸体胚诱导效果最佳,此时体胚发生率和体胚成熟率相对较高,体胚畸形率最低。     

植物细胞工程进展

概要介绍了植物细胞工程的主要分支学科及其研究进展。包括原生质体培养、细胞融合与体细胞杂交、胚胎培养和试管受精、组织和细胞培养生产有用物质、单倍体育种、体细胞无性系变异、细胞突变体的筛选、植物快速繁殖技术、体细胞胚胎发生和人工种子、组织细胞培养物的超低温保存以及转基因植物等。     

影响宁夏枸杞愈伤组织体细胞胚发生的因素

对宁夏枸杞愈伤组织体细胞胚发生的影响因素进行分析,结果表明,宁夏枸杞根外植体的年龄及其生理状态能影响胚性愈伤组织的形成和体细胞胚发生;4℃低温处理两周能明显促进愈伤组织形成体细胞胚,同时也能增加愈伤组织内源多胺的含量;添加Ag+有利于愈伤组织的体细胞胚发生,适当增加Ca2+浓度也有利于愈伤组织的生长及其体细胞胚发生;Eu3+的添加能明显促进愈伤组织生长,而低浓度的Ce2+、Eu3+作用有利于愈伤组织体细胞胚发生.     

植物体细胞胚胎发生的理论研究

把体细胞胚胎发生现象看作开展生物学理论研究的良好模型，介绍了运用细胞生物学和分子生物学的原理与技术进行研究的成果，特别是体细胞胚胎发生相关基因的研究进展。     

Primary observations of the existence of Fas-like cytoplasmic death factor in plant cells

The main activity of Fas is to trigger cytoplasm death program in animal cells. In G2 pea, vacuole plays a pivotal role in inducing cell death in the cytoplasm of longday (LD) grown apical meristem cells. Expression patterns of the Fas in G2 pea cells revealed that the Fas is mainly localized in the vacuole of cells undergoing programmed cell death (PCD). The Fas expression is corresponding to the initiation of menadione-induced PCD in tobacco protoplasts.The results suggest the existence of the Fas-like mediated cytoplasmic death pathway in plant cells.``     

细胞编程性死亡及其生物学意义

细胞编程性死亡(英文编写为PCD)是多细胞生物的自然属性,它按照一定的基因编码在时空上顺次表达使死亡细胞呈现一定的表观现象及生理生化特征。PCD受来自机体内其它细胞信号等内源性因素和药物、物理等外源性因素的调节。PCD是一种主动死亡方式且表现为单细胞性,与病理因素作用下的坏死不同,但又有一定联系。PCD在动、植物体的生长发育和成体新陈代谢中有重要的调节作用,PCD异常是某些疾病发病的重要原因