白腐菌产漆酶的发酵条件研究

漆酶(E.C.1.10.3.2)是一类含铜的氧化还原酶,其可以催化对苯二酚(也叫氢醌)氧化生成对苯醌,也常被称为对苯二酚氧化酶。漆酶一般存在于真菌和植物中,由于具有较高的稳定性和较好的底物专一性,在印染和环境有机毒性化合物的降解、专用生物传感器的构建、以及造纸领域有机废弃物的生物加工利用等方面具有实际工业应用。考察了白腐菌的培养和产漆酶条件,对白腐菌产漆酶的培养条件和培养基进行了优选。结果显示,以小麦皮为碳源,硫酸铵和尿素为氮源,白腐菌生长产酶的适宜培养温度为28℃,pH值为3.5~6.0,培养基的C/N比以20合适。当培养基中添加一定的木质素沉淀物和葡萄糖时对白腐菌液体发酵产漆酶具有明显的促进作用,菌体发酵液中加入10 g/L的葡萄糖、6 g/L木质素时发酵产漆酶的活力达到最大值。     

白腐真菌及其漆酶的应用研究

白腐真菌及其漆酶在工业和生活方面的应用研究受到广泛重视,因其强大的木质素降解酶系显现出广阔的应用潜力,可用于结杆降解、生物漂白以及污染物的治理等方面,漆酶是白腐真菌普遍产生的一种含铜多酚氧化酶,本文重点介绍了白腐真菌及其漆酶在工业和生活中的具体应用。     

白腐菌F8的分离及降解木质素能力研究

从松林土壤中分离得到一株白腐菌F8,经Bavendamn氏显色反应证实其能产生漆酶.在液体培养条件下,该菌株能产生木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶.其降解木质素的最佳条件为100 r/min、33℃、pH5.5、接种量5%,在此条件下,木质素降解率达71.98%.     

白腐菌降解偶氮金属络合染料的研究

针对白腐菌的特性和独特的降解机理,用Corilus versicolor和Panus conchatus两种典型白腐菌降解金属络合染料,结果表明,白腐菌对这类染料有明显的脱色作用,经驯化的白腐菌对染料废液处理72h脱色率可达90％以上,测定了在特定条件下两种白腐菌产锰过氧化物酶（Mnp)和漆酶（Laccase)的活性,讨论了染料的脱色与酶活及菌丝产量高低的相关性,认为白腐菌对该类染料的脱色作用包括物理吸附和酶促降解两个方面。     

混菌固态发酵油菜秸秆铜离子和草酸对灵芝木质素酶系分泌的影响

研究了铜离子(1、1.5、2和2.5mmol/L)和草酸(2、4和6mmol/L)对灵芝和产朊假丝酵母混菌固态发酵油菜秸秆产木质素降解酶系的影响.结果表明:与对照相比,添加2 mmol/L的铜离子,可显著提高漆酶和锰过氧化物酶的酶活力,其活力分别为1032.77和840U/L,是不加铜离子的2.53和2.40倍;而与对照相比,添加1mmol/L铜离子可显著提高木质素过氧化物酶活力,其活力为319.89U/L,是不加铜离子的2.08倍,添加1.5、2和2.5mmol/L的铜离子时对木质素过氧化物酶有抑制作用,抑制率分别为30.71%、18.95%和11.11%.与对照相比,添加2、4mmol/L草酸可显著提高漆酶活力,其活力分别为1111.44、1301.89U/L,是不加草酸的2.73、3.2倍.添加4mmol/L草酸可显著提高锰过氧化物酶活力,其活力为693.33 U/L,是不加草酸的1.98倍;而2、4和6mmol/L草酸的添加抑制了木质素过氧化物酶的活性,抑制率分别为43.03%、28.81%和33.73%.     

白腐真菌对百里酚的降解机理

白腐真菌在环境治理方面有很大的应用潜力.以百里酚作为研究对象,利用白腐真菌在DOX培养基中对其进行微生物降解,通过测定降解体系中木质素过氧化物酶(LiP)、锰过氧化物酶(MnP)、漆酶(Lac)和多酚氧化酶(PPO)的活性,并利用红外光谱仪、气相色谱-质谱分析仪分析了降解产物.结果发现,百里酚在Lac和LiP催化下发生了脱酚基、脱甲基、开环、氧化等作用,得到对应降解产物,从而推测出白腐真菌对百里酚的降解历程.     

灵芝固态发酵产漆酶及对秸秆木质素的降解

为探索木质素的生物降解新途径,采用平板显色法从三株白腐真菌中筛选出一株灵芝属漆酶高产菌,以农作物秸秆等为培养基进行固态发酵,该菌主要产漆酶和少量木质素过氧化物酶.在优化条件下,该菌发酵18d,漆酶活力最高达2056U/g干曲.该菌以玉米秸秆、油菜秸秆及稻草作为唯一营养源固态发酵30d,对玉米秸秆的木质素降解率最大,达到23.7%,油菜秸秆也达到了16.2%.     

黄孢平革霉木质素过氧化物酶基因的克隆与分析

用大肠杆菌克隆载体ｐＵＣ１９构建白腐丝状担子真菌黄孢平革霉ＭＥ４４６基因组文库，用分离自ＢＫＭ－Ｆ１７６７菌株的木质素过氧化物酶ｃＤＮＡ片段ＣＬＧ４和ＣＬＧ５为探针，从构建的基因组文库中分离到一个含木质素过氧化物酶基因的重组子ｐＧＬＧ－Ｍ１，对该重组子插入片段所作的限制酶谱结果表明，它与来自ＢＫＭ－Ｆ１７６７的ＧＬＧ２片段的限制酶谱十分相似。     

白腐菌对秸秆中木质素生物降解的研究

研究了白腐菌及其产生的木质素降解酶系对秸秆的木质素生物降解方法，探讨了黄孢原毛平革菌和杂色云芝单一菌株生物降解及双菌株联合降解木质纤维素的规律，白腐菌双菌联合固态培养可使木质素降解率达到47．64％，脱木素选择性为4．74．采用模拟大规模白腐菌堆积培养（厚度30cm）的方法降解秸秆木质素，培养30d，木素降解率为32．54％，表明此方法是一种可行的大规模生物顸处理方法．     

黄孢平革霉（Phanerochaete chrysosporium）木质素过氧化物酶基因的克隆与分析

用大肠杆菌克隆载体ｐＵＣ１０构建白腐丝状担子真菌黄孢平革霉（Ｐｈａｎｅｒｏｃｈａｅｔｅｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ）ＭＥ４４６基因组文库，用分离自ＢＫＭ－Ｆ１７６７菌株的木质素过氧化物酶ｃＤＮＡ片段ＣＬＧ４和ＣＬＧ５为探针，从构建的基因组文库中分离到一个含木质素过氧化物酶基因的重组子ｐＧＬＧ－Ｍ１。对该重组子插入片段所作的限制酶谱分析结果表明，它与来自ＢＫＭ－Ｆ１７６７的ＧＬＧ２片段的限制酶谱十分相似。     

白腐菌降解造纸黑液中木质素的研究

研究了白腐菌对造纸黑液中木质素的降解及影响因素.发现白腐菌的降解作用发生在次级代谢阶段,影响白腐菌降解木质素的因素有木质素浓度、pH值、搅拌速度、碳源和氮源、Fe2+浓度等.     

白腐菌辅助制浆的研究进展

制浆造纸业是中国的支柱产业之一,但同时也是污染大户.生物技术辅助制浆由于其污染小、成本低而日益引进重视,白腐菌是应用最广泛的菌种.从中国制浆造纸业相关的生物制浆技术、白腐菌降解木质素机理、筛选、改良和应用等方面展开了较全面的论述.     

甘蔗渣采用白腐菌生物降解的研究

研究了甘蔗渣采用两种白腐菌的生物降解，分析了不同培养条件对木素降解的影响。研究内容包括从自然界筛选分离出一株具有木素降解能力的白腐菌ＨＧＸ０３，并与引进的白腐菌Ｐ．ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ进行了处理甘蔗渣的研究和比较。在相同条件下培养１４ｄ和２８ｄ，Ｐ．ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ作用于甘蔗渣的总木素降解率分别为１９５％和２６３％，ＨＧＸ０３则分别为１５２％和２２７％。ＨＧＸ０３处理后的甘蔗渣白度比Ｐ．ｃｈｒｙｓｏｓｐｏｒｉｕｍ约高２％（ＩＳＯ）。供给氧气可以提高白腐菌的木素降解能力，促进作用主要表现在生物处理的中期。附加营养物可以明显地减少处理原料的重量损失，增加木素的降解。与单纯采用菌丝体相比，全培养物接种可以利用白腐菌生长过程中产生的胞外酶，起到增加木素降解速率的效果。     

白腐菌降解氯代酚类化合物的特性研究

研究了Mn^2＋对白腐菌（Phanerochanete chrysosporium）产生的过氧化物酶（MnP和LiP）活力的影响及胞内外酶在氯代酚化合物降解过程中的作用。结果表明：Mn^2＋对MnP和LiP的活力有显著影响；白腐菌对相对分子质量低的有机化合物的降解主要在细胞内依靠胞内酶的作用进行，而胞外酶加快了降解速率；两种胞外酶MnP和LiP在降解过程中所起的作用不同，MnP起主要作用，LiP起次要作用。白腐茵对酚类化合物的基质亲和性较活性污泥低，适宜于高浓有机废水的预处理；白腐茵对毒性的忍受能力与活性污泥微生物相似，但处理方式和条件的改变可以提高其毒性忍受能力。     

造纸废液的白腐菌处理及特性研究

就具有较强木质素降解能力的白腐菌对造纸黑液的处理能力及特性进行初步研究。采用液体发酵对不同状况下的造纸废液进行处理，以白腐菌处理造纸废液过程中的生长状况，浊度，COD，可溶性糖等指标进行观察与测定，结果显示出不同种属的白腐菌对各种状态的造纸液处理程度不同，其中效果较好的2^#菌株在光解，非光解造纸废液上的COD去除率达到80％以上，处理后的水质清亮无色，说明木质纤维素分解菌－白腐菌具有处理造纸黑液的潜在能力。     

不同秸秆基质中白腐真菌漆酶分泌动力学研究

研究了侧耳属白腐真菌Pleurots sp．在木屑、玉米秆和稻草秆三种固体秸秆基质上分泌漆酶活性、漆酶动力学参数米氏常数Km和漆酶同工酶的动态变化．结果表明：该菌株在不同秸秆基质上分泌漆酶规律不一致;漆酶Km值随时间变化很大,相差高达一个数量级;通过PAGE活性电泳研究漆酶性质,表明体系中存在多种漆酶同工酶,不同时间不同秸秆基质上漆酶同工酶数量和性质存在很大差异,木屑固体秸秆基质上漆酶同工酶I的表达比另外两种固体秸秆基质更明显,同时还发现漆酶同工酶谱带和酶活性大小存在一定的关系,基本上漆酶活性越高,同工酶谱带I颜色就越深越长,而同工酶Ⅱ和Ⅲ只起辅助作用．     

白桦木材抗腐和易腐植株主要化学成分的比较

采用5种木材腐朽菌分别对300株天然林白桦木样进行木材腐朽处理,选择质量损失率最大和最小的10株白桦组成易腐和抗腐群体,检测其木材中的木质素、纤维素等主要化学成分.结果表明:水分、纤维素、木质素含量低的白桦木材抗白囊耙齿菌腐朽;木质素含量低、苯醇抽出物含量高的白桦木材抗黄伞腐朽;木质素、总酚、总黄酮含量高的白桦木材抗木蹄层孔菌;木质素和总酚含量高的白桦木材抗桦剥管菌腐朽.未发现彩绒革盖菌降解木材成分的偏好性.白桦木材中的1%NaOH抽出物和水分与纤维素含量成显著负相关,易腐群体白桦木材中的水分和纤维素含量、苯醇抽出物和总酚含量,木质素、总酚和总黄酮含量均成显著正相关.该研究为进一步探讨木材腐朽菌腐朽木材的过程和机理,易腐、抗腐白桦木材的理化特性等提供有用的信息.     

白腐菌对造纸原料树脂成分的降解

使用白腐菌处理马尾松木片,在短期内对木素和DCM抽提物的降解情况进行了研究.结果表明,培养9天后,木片中总木素含量降低3%,DCM抽提物的去除率达到20%.外源无机盐用量对白腐菌降解木素能力影响不大,但对DCM抽提物影响较大,相同培养时间在试验条件下去除率最大相差2%左右.培养期间内在木片上未见有色菌丝的出现.