金针菇降解木质素的能力及相关酶活研究

通过对10个金针菇菌株研究发现,在液体培养下不同菌株降解木质素的能力有较大差异,其中金针菇J89-6具有一定的降解木质素的能力,降解率达46%.本文还测定了不同菌株的漆酶、木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶三种木质素降解酶的酶活,结果显示漆酶的产量与木质素降解率呈正相关关系.     

秀珍菇废渣中木质素降解酶系的研究

【目的】重点研究秀珍菇废渣中的木质素降解酶系。【方法】对秀珍菇废渣中可能存在的3种木质素降解酶:锰过氧化物酶(Manganese peroxidase,MnP)、木质素过氧化物酶(Lignin peroxidase,LiP)及漆酶(Laccase,Lac)进行活力测定,并对漆酶的最适pH值和最适温度进行考察。【结果】在秀珍菇废渣中未检测到锰过氧化物酶活力,检测到漆酶和木质素过氧化物酶活力。漆酶的最适pH值为6.2,最适温度为30℃。【结论】较一般食用菌不同,秀珍菇废渣中同时具有木质素过氧化物酶和漆酶活力,并且木质素过氧化物酶活力还较高。     

木质素降解真菌的分离与相关酶活性测定及产酶条件优化

从缙云山森林土壤中分离获得几株真菌(J201,J302,J403,J504),以黑木耳为对照,经愈创木酚显色反应表 明:菌株J201的显色圈直径为4.67cm,显著大于黑木耳(p=0.05),表明其具有良好的木质素降解能力.木质素 降解酶系活力测定表明:菌株J201酶活性均大于黑木耳,过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶活性分别是黑木耳的 1.29,1.41和3.51倍,差异显著(p=0.05).对菌株J201产酶条件进一步优化表明,在30℃、pH7、碳氮比比值为 20时,菌株J201产酶最佳.     

木质素降解酶系染料降解机理

综述了漆酶、木质素过氧化物酶和锰过氧化物酶三种酶的染料脱色机理。     

灵芝固态发酵产漆酶及对秸秆木质素的降解

为探索木质素的生物降解新途径,采用平板显色法从三株白腐真菌中筛选出一株灵芝属漆酶高产菌,以农作物秸秆等为培养基进行固态发酵,该菌主要产漆酶和少量木质素过氧化物酶.在优化条件下,该菌发酵18d,漆酶活力最高达2056U/g干曲.该菌以玉米秸秆、油菜秸秆及稻草作为唯一营养源固态发酵30d,对玉米秸秆的木质素降解率最大,达到23.7%,油菜秸秆也达到了16.2%.     

侧耳菌产生木质纤维素酶及其降解植物生物质的研究

对在液体培养基中产生木质纤维素降解酶能力强且产酶速度较快的侧耳 sp 2 (Pleurotussp 2 )进行了最佳产酶液体培养基组分的研究 ,并对其在液体培养基、固体培养基中产生木质纤维素降解酶能力和行为进行了分析 .结果表明 ,该菌株在低氮高碳高无机盐培养基中的锰过氧化物酶、木质素过氧化物酶、漆酶和半纤维素酶等 4种酶的活性最高 .其中 ,锰过氧化物酶的活性峰值出现时间仅为 6 d,比其他 3种酶活性峰值期早 6 d. Pleurotus sp 2是目前已知的在液体培养条件下产锰过氧化物酶较高的菌株之一 .当该菌株培养在含有低氮无碳高无机盐液体培养基的麦草粉中时 ,锰过氧化物酶和漆酶的活性峰值均出现在第 10天 ,而半纤维素酶的活性在 4 0 d时达到峰值 .此外 ,该菌株使麦草生物质失重可达 17.6 % ,可望能成为生物制浆中原料预处理的候选菌株     

天然浸出液对自分离白腐真菌产木质素降解酶的影响

为提高木质素降解酶产量,使其应用于环境工程领域,在T ien&K irk培养基的基础上,添加玉米芯、柏树、桃树、玉兰和连翘等浸出液,在空气环境中,对白腐真菌F 2进行自由悬浮振荡培养。白腐真菌F 2能够大量产木质素过氧化物酶(L iP)和锰过氧化物酶(M nP)。添加天然浸出液后,L iP最高酶活为122.6 u/L,M nP最高酶活为135.4 u/L。在基础T ien&K irk培养基中培养则未检测出这两种酶的活性。在不同地区采集到的天然浸出液对两种酶的影响也不一样。结果表明,保持白腐真菌生长条件与天然生长条件相似,加入天然浸出液,可以促进产酶。     

混菌固态发酵油菜秸秆铜离子和草酸对灵芝木质素酶系分泌的影响

研究了铜离子(1、1.5、2和2.5mmol/L)和草酸(2、4和6mmol/L)对灵芝和产朊假丝酵母混菌固态发酵油菜秸秆产木质素降解酶系的影响.结果表明:与对照相比,添加2 mmol/L的铜离子,可显著提高漆酶和锰过氧化物酶的酶活力,其活力分别为1032.77和840U/L,是不加铜离子的2.53和2.40倍;而与对照相比,添加1mmol/L铜离子可显著提高木质素过氧化物酶活力,其活力为319.89U/L,是不加铜离子的2.08倍,添加1.5、2和2.5mmol/L的铜离子时对木质素过氧化物酶有抑制作用,抑制率分别为30.71%、18.95%和11.11%.与对照相比,添加2、4mmol/L草酸可显著提高漆酶活力,其活力分别为1111.44、1301.89U/L,是不加草酸的2.73、3.2倍.添加4mmol/L草酸可显著提高锰过氧化物酶活力,其活力为693.33 U/L,是不加草酸的1.98倍;而2、4和6mmol/L草酸的添加抑制了木质素过氧化物酶的活性,抑制率分别为43.03%、28.81%和33.73%.     

木质素降解复合菌的选育及其对芦苇浆卡伯值的影响

筛选木质素降解菌株并从中挑出产漆酶(Lac)和锰过氧化物酶(MnP)能力较强的4株菌株,复合培养得到4种复合菌ABC,ACD,ABD和BCD.复合培养后Lac和MnP产酶高峰较单一培养均有所提前,ABC,ACD的Lac和MnP酶活力活在60～72 h达到最大.BCD的Lac和MnP酶活力均高于其他3种,而且其MnP有两个产酶高峰.芦苇浆经4种复合菌处理后,卡伯值均有所下降,经BCD处理后卡伯值降幅最大,达到(5.3±0.12).     

过氧化物酶在酚类废水处理中的应用

介绍了过氧化物酶在酚类废水处理中的应用现状以及合酚废水的危害及主要来源,其中包括辣根过氧化物酶、木质素过氧化物酶、氯过氧化物酶及其相应的固定化酶在含酚废水及含难降解的芳香族化合物废水、造纸废水处理中的研究和应用．过氧化物酶不仅可降低有毒含酚污染物的含量,而且使用固定化酶技术必然会降低处理含酚废水的成本,提高酶的使用效果．     

白腐菌产木素过氧化物酶发酵条件的优化

在静置和振荡两种培养条件下研究营养条件对白腐菌合成木素过氧化物酶(1igninperoxidase,LiP)的影响。静置培养时,LiP在碳氮比(C/N)低的培养基中显示较高的酶活力,碳源以葡萄糖(0.02%)和糊精(0.18%)同时存在及分段加入要比单一葡萄糖作为碳源时获得更高的酶活;振荡培养时,在碳氮比高的培养基中LiP酶活最高,而类似于静置培养的氮源组合及分段模式却明显地抑制了LiP的合成。优化后,静置培养在第6天可获得7560U/L的酶活;振荡培养在第8天获得6500U/L的酶活。发酵液中LiP酶活力与菌体分泌的其同功酶的数量成一定的对应关系。     

白腐菌产漆酶的发酵条件研究

漆酶(E.C.1.10.3.2)是一类含铜的氧化还原酶,其可以催化对苯二酚(也叫氢醌)氧化生成对苯醌,也常被称为对苯二酚氧化酶。漆酶一般存在于真菌和植物中,由于具有较高的稳定性和较好的底物专一性,在印染和环境有机毒性化合物的降解、专用生物传感器的构建、以及造纸领域有机废弃物的生物加工利用等方面具有实际工业应用。考察了白腐菌的培养和产漆酶条件,对白腐菌产漆酶的培养条件和培养基进行了优选。结果显示,以小麦皮为碳源,硫酸铵和尿素为氮源,白腐菌生长产酶的适宜培养温度为28℃,pH值为3.5~6.0,培养基的C/N比以20合适。当培养基中添加一定的木质素沉淀物和葡萄糖时对白腐菌液体发酵产漆酶具有明显的促进作用,菌体发酵液中加入10 g/L的葡萄糖、6 g/L木质素时发酵产漆酶的活力达到最大值。     

糙皮侧耳菌木质素降解酶的比较研究

筛选出１６株ＲＢ显色能力较强的菌株,测试了１６株菌的三种胞外木质素降解酶活性,结果显示,侧耳菌侧５,侧耳ＡＸ３,侧耳８１０１所产生漆酶活性最高;侧耳ＡＸ３,侧耳８１０１,金凤２－５所产木质素过氧化物酶活性最高;侧耳８１０１,侧耳ＡＸ３,侧耳Ｐ４６锰过氧化物酶活性最高。综合结果表明,木质素降解酶活性最高的菌株是侧耳８１０１和ＡＸ３。     

环保用生物酶的研究进展

生物酶是近年来的研究热点之一,氧化还原酶是在环保方面应用广泛的一类生物酶。本文概括总结了近年来研究最广泛的生物酶的研究进展,重点叙述了辣根过氧化物酶以及漆酶的应用概况。     

Cloning and sequencing of a cDNA for a ligninase from Phanerochaete chrysosporium

Lignin is a complex polymer of phenylpropanoid subunits. It is an essential component of woody tissue, to which it imparts structural rigidity. Lignin is remarkably resistant to degradation by most microbes; nevertheless, a few species of white-rot fungi are able to catalyse its oxidation to CO2. Its biodegradation is of great ecological significance because, next to cellulose, lignin is the most abundant renewable polymer on Earth. The first step in lignin degradation is depolymerization, catalysed by the lignin peroxidase isozymes (ligninases). These isozymes are secreted, along with hydrogen peroxide (H2O2) by the fungus Phanerochaete chrysosporium Burds, under conditions of nutrient (nitrogen) limitation. Ligninases are not only important in lignin biodegradation, but are also potentially valuable in chemical waste disposal because of their ability to degrade environmental pollutants. We have undertaken the cloning of the ligninase genes to understand further their regulation and enzymology. We report here the isolation and characterization of a ligninase complementary DNA clone with a full-length insert. The cDNA sequence shows that the sequence of the mature ligninase is preceded by a 28-residue leader, and the mature protein is predicted to have a relative molecular mass of 37,000 (Mr 37K). Consistent with the classification of ligninase as a peroxidase certain residues thought to be essential for peroxidase activity can be identified and near these residues the ligninase shows homology with other known peroxidases. Our cDNA clone has also allowed us to show that expression of ligninase is regulated at the messenger RNA level.     

漆酶的分子生物学研究及其应用

白腐菌所分泌的木质素降解酶主要有3种：木质素过氧化物酶、锰依赖过氧化物酶和漆酶．漆酶是近年来研究较多的一种含铜的多酚氧化酶，在白腐菌中普遍存在，也存在于少数低等真菌和植物中．漆酶多为酸性蛋白，含4个铜离子，形成3个活性区域；表面一些氨基酸被不同程度地糖基化．漆酶可催化的底物迭250种，铜离子结合区域在其催化氧化过程中起决定性作用．运用PCR技术cDNA文库技术，越来越多的漆酶基因被克隆，目前已克隆到的漆酶基因有大约20个．许多来源地基因都是以家族地形式存在于染色体上的．已研究的漆酶基因中都含有10个左右的内含子，这些内含子在活性域位置上有比较高的保守性．一些特珠序列存在与否决定了该酶的表达形式-诱导型或组合型．目前已有部分漆酶基因的异源表达获得成功．本文还介绍了漆酶在环境保护、造纸工业、食品工业等方面的应用．对近年来漆酶的研究进展进行了综述．     

改良的大豆种皮过氧化物酶纯化方法及酶的底物氧化特性研究

由大豆壳中分离出一种过氧化物酶-大豆种皮过氧化物酶(soybeanhullperoxidase,SHP,EC1.11.1.7),经硫酸铵分级沉淀,DEAE-SephdexA-50离子交换层析,Bio-GelP-60凝胶过滤,DEAE-SephadexA-25二次离子交换和SephdexG-100凝胶过滤纯化了该酶.分子量为3.8×104u,薄层等电聚焦电泳测得SHP等电点为3.9.SHP的底物范围较宽,以H2O2为电子受体,可以氧化多种木素单体模型物,包括愈创木酚、2,3-二甲氧基酚、2,6-二甲氧基酚、3,4-二甲氧基酚、3,5-二甲氧基酚、1,2,4-三甲氧基苯、阿魏酸、咖啡酸、异丁子香酚和丁香醛联氮,提示该酶在木素的生物降解中有潜在的应用价值.