白腐真菌J610-D分泌漆酶处理几种有毒环境污染物的研究

就白腐真菌漆酶对环境中几种常见的有毒污染物的降解效果进行了研究.结果表明:白腐真菌漆酶能够很好地催化氧化芳胺类及其衍牛物,当控制苯胺浓度<800 mg/L、邻苯二胺浓度<150 mg/L时,白腐真菌漆酶对苯胺、邻苯二胺的降解率均可达90%、100%;白腐真菌漆酶对硝基苯类化合物的降解效果不明显,当控制其浓度<150mg/L,对硝基苯化合物的降解率可达80%.     

白腐菌产漆酶的发酵条件研究

漆酶(E.C.1.10.3.2)是一类含铜的氧化还原酶,其可以催化对苯二酚(也叫氢醌)氧化生成对苯醌,也常被称为对苯二酚氧化酶。漆酶一般存在于真菌和植物中,由于具有较高的稳定性和较好的底物专一性,在印染和环境有机毒性化合物的降解、专用生物传感器的构建、以及造纸领域有机废弃物的生物加工利用等方面具有实际工业应用。考察了白腐菌的培养和产漆酶条件,对白腐菌产漆酶的培养条件和培养基进行了优选。结果显示,以小麦皮为碳源,硫酸铵和尿素为氮源,白腐菌生长产酶的适宜培养温度为28℃,pH值为3.5~6.0,培养基的C/N比以20合适。当培养基中添加一定的木质素沉淀物和葡萄糖时对白腐菌液体发酵产漆酶具有明显的促进作用,菌体发酵液中加入10 g/L的葡萄糖、6 g/L木质素时发酵产漆酶的活力达到最大值。     

白腐真菌对百里酚的降解机理

白腐真菌在环境治理方面有很大的应用潜力.以百里酚作为研究对象,利用白腐真菌在DOX培养基中对其进行微生物降解,通过测定降解体系中木质素过氧化物酶(LiP)、锰过氧化物酶(MnP)、漆酶(Lac)和多酚氧化酶(PPO)的活性,并利用红外光谱仪、气相色谱-质谱分析仪分析了降解产物.结果发现,百里酚在Lac和LiP催化下发生了脱酚基、脱甲基、开环、氧化等作用,得到对应降解产物,从而推测出白腐真菌对百里酚的降解历程.     

漆酶的分子生物学研究及其应用

白腐菌所分泌的木质素降解酶主要有3种：木质素过氧化物酶、锰依赖过氧化物酶和漆酶．漆酶是近年来研究较多的一种含铜的多酚氧化酶，在白腐菌中普遍存在，也存在于少数低等真菌和植物中．漆酶多为酸性蛋白，含4个铜离子，形成3个活性区域；表面一些氨基酸被不同程度地糖基化．漆酶可催化的底物迭250种，铜离子结合区域在其催化氧化过程中起决定性作用．运用PCR技术cDNA文库技术，越来越多的漆酶基因被克隆，目前已克隆到的漆酶基因有大约20个．许多来源地基因都是以家族地形式存在于染色体上的．已研究的漆酶基因中都含有10个左右的内含子，这些内含子在活性域位置上有比较高的保守性．一些特珠序列存在与否决定了该酶的表达形式-诱导型或组合型．目前已有部分漆酶基因的异源表达获得成功．本文还介绍了漆酶在环境保护、造纸工业、食品工业等方面的应用．对近年来漆酶的研究进展进行了综述．     

白腐真菌处理难降解有机物的培养条件及应用研究

白腐真菌能够通过产生胞外氧化酶——木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶等酶,直接参与各种难降解有机污染物和毒性物质的降解,它的这种独特的降解能力和降解机制,多年来一直受到世界各国科学界以及工业界的高度重视。本文综述了不同培养条件包括不同基础培养基、添加不同外源（如微量元素等）、不同载体、不同菌体混合以及非灭菌条件等对白腐真菌生长状况与产酶情况的影响,同时就目前白腐真菌在工业废水（皂素废水、漂白废水、DDNP废水）、生物肥料和生物制浆等领域的应用基础研究进展作一综述,并对其进一步地研究作了展望。     

白腐菌对焦化废水中吲哚的降解及其机理

选用白腐菌BP降解吲哚,研究了白腐菌在不同培养基中对两种浓度吲哚的降解过程和机理,以及吲哚的降解与白腐菌漆酶酶活、生物量、培养基pH值的关系.结果显示不同培养基中白腐菌可去除99%以上的吲哚;吲哚去除率与白腐菌漆酶活率具有较好的相关性,白腐菌漆酶活率达到最高时,可去除97%以上的吲哚;高浓度吲哚会抑制白腐菌的生长,同时也激发了白腐菌漆酶的产生,秸秆滤出液能促进白腐菌的生长和漆酶活力的增长;白腐菌BP最适pH值为6~7,pH值在5~8之间对吲哚都具有较强的降解能力;在HPLC谱图3~6 min之间出现的新物质可能有氧化吲哚和靛红.     

白腐菌降解偶氮金属络合染料的研究

针对白腐菌的特性和独特的降解机理,用Corilus versicolor和Panus conchatus两种典型白腐菌降解金属络合染料,结果表明,白腐菌对这类染料有明显的脱色作用,经驯化的白腐菌对染料废液处理72h脱色率可达90％以上,测定了在特定条件下两种白腐菌产锰过氧化物酶（Mnp)和漆酶（Laccase)的活性,讨论了染料的脱色与酶活及菌丝产量高低的相关性,认为白腐菌对该类染料的脱色作用包括物理吸附和酶促降解两个方面。     

漆酶检测方法的对比研究

用三种不同的漆酶检测方法对11种白腐真菌进行产漆酶的现象检测，结果表明有两种方法在定性检测漆酶的结果上是一致的，其中以α－萘酚对漆酶的检测方法最为灵敏。     

白腐菌F8的分离及降解木质素能力研究

从松林土壤中分离得到一株白腐菌F8,经Bavendamn氏显色反应证实其能产生漆酶.在液体培养条件下,该菌株能产生木质素过氧化物酶、锰过氧化物酶和漆酶.其降解木质素的最佳条件为100 r/min、33℃、pH5.5、接种量5%,在此条件下,木质素降解率达71.98%.     

13种白腐真菌产漆酶能力的初步比较研究

通过PDA-Bavendamm平板显色反应和变色圈试验方法,对13种白腐真菌产漆酶的能力进行了比较研究,实验结果表明,M5、M6、M7和M12菌株不产生漆酶;M1、M10、M8、M44个菌株产漆酶能力较强.     

白腐菌处理染料废水的研究进展

白腐菌是一种特殊的真菌,通过分泌特殊酶系能够降解多种人工合成的染料。对染料废水的处理方法及特点、白腐菌生物学特征及降解机理、白腐菌处理染料废水的优势进行概述,并介绍了白腐菌降解染料的研究现状,展望了白腐菌在染料废水处理方面的应用前景。     

灵芝固态发酵产漆酶及对秸秆木质素的降解

为探索木质素的生物降解新途径,采用平板显色法从三株白腐真菌中筛选出一株灵芝属漆酶高产菌,以农作物秸秆等为培养基进行固态发酵,该菌主要产漆酶和少量木质素过氧化物酶.在优化条件下,该菌发酵18d,漆酶活力最高达2056U/g干曲.该菌以玉米秸秆、油菜秸秆及稻草作为唯一营养源固态发酵30d,对玉米秸秆的木质素降解率最大,达到23.7%,油菜秸秆也达到了16.2%.     

白腐菌产漆酶培养条件的研究

针对白腐菌独特的降解能力和漆酶在环境治理与工业方面的应用，对杂色云芝菌产漆酶的培养条件进行优化，得出较好的培养基的组成：麦芽糖质量浓度为1．8g/L，酒石酸铵质量浓度为0．84g／L，大量元素体积分数为100mL/L，微量元素体积分数为25mL/L，VB1质量为100μg，吐温80质量浓度为0．05％，最佳诱导剂是二甲苯胺，表面活性剂是吐温80，漆酶催化活性最适的pH为3．6。     

白腐真菌锰过氧化物酶的动力学研究

进行了白腐真菌锰过氧化物酶处理苯胺溶液的动力学研究,导出了酶降解动力学模型。通过测定不同苯胺质量浓度溶液吸光度值,确定苯胺溶液标准曲线,建立苯胺质量浓度与吸光度值的关系方程式。统计分析表明:米氏方程当作模拟模型,应用Lineweaver-Burk法进行数学回归分析,对锰过氧化物酶进行反应动力学研究是可行的。通过数学处理,确定了锰过氧化物酶重要的动力学特征参数:Vm=0.3527mg/L·min,Km=2.7696mg/L。为白腐菌的工业应用提供了重要依据。     

天然浸出液对自分离白腐真菌产木质素降解酶的影响

为提高木质素降解酶产量,使其应用于环境工程领域,在T ien&K irk培养基的基础上,添加玉米芯、柏树、桃树、玉兰和连翘等浸出液,在空气环境中,对白腐真菌F 2进行自由悬浮振荡培养。白腐真菌F 2能够大量产木质素过氧化物酶(L iP)和锰过氧化物酶(M nP)。添加天然浸出液后,L iP最高酶活为122.6 u/L,M nP最高酶活为135.4 u/L。在基础T ien&K irk培养基中培养则未检测出这两种酶的活性。在不同地区采集到的天然浸出液对两种酶的影响也不一样。结果表明,保持白腐真菌生长条件与天然生长条件相似,加入天然浸出液,可以促进产酶。     

国内期刊亮点

正发现白腐真菌Trametes sp.SQ01漆酶新功能山西大学生物技术研究所杨秀清和文潇玮利用紫外可见光谱分析法,研究了漆酶对8种不同取代基的HOPDAs的转化情况,并对漆酶的稳态动力学参数进行了测定。结果表明漆酶可以在没有任何中介物的条件下催化HOPDAs,并生成无色的物质,     

真菌漆酶的酶活测定及其在织物染料生物脱色中的应用

较为详细地介绍了漆酶常用的定性和定量分析方法，并阐述了漆酶在织物染料脱色中的应用。漆酶是一种含铜的多酚氧化酶，按其主要来源分为漆树漆酶和真菌漆酶两大类。研究表明，漆酶可作用的底物范围广，它可应用于生漆的干燥的干燥成膜和毛发染色，纸浆生产中木质素的降解，废水处理，生物传感器，酶法免疫分析，有机合成，土壤的修复等方面。     

产漆酶真菌的筛选、培养及对苯酚的降解

提出了一种新的从土壤中筛选产漆酶真菌的方法．将51个土壤样品分别分散于无菌水中,接种至含有底物A的固体培养基上,培养3d后,当菌落周围的培养基变成褐色时表明该菌株可能产生漆酶．将筛选出的若干菌株与市购的几种真菌分别接种于LB液体培养基中培养7d后,测定培养液中漆酶的活性,表明从土壤样品中筛选得到的真菌L1产酶活性最高．研究了各种培养条件对真菌L1产漆酶能力的影响,并且对该漆酶的性质及其对苯酚的降解进行了研究．结果表明,从产漆酶真菌中筛选出的自选菌(L1),在苯酚作为诱导剂、30℃下PYGM培养基中培养7d,产酶活性最高．该漆酶的最适pH为8．0,最适温度为33℃,Cl^-对其活性抑制较大．该漆酶对浓度为(50-250mg／L)的苯酚有较好的催化降解效果,在24h内最大降解率可达60％以上．     

不同秸秆基质中白腐真菌漆酶分泌动力学研究

研究了侧耳属白腐真菌Pleurots sp．在木屑、玉米秆和稻草秆三种固体秸秆基质上分泌漆酶活性、漆酶动力学参数米氏常数Km和漆酶同工酶的动态变化．结果表明：该菌株在不同秸秆基质上分泌漆酶规律不一致;漆酶Km值随时间变化很大,相差高达一个数量级;通过PAGE活性电泳研究漆酶性质,表明体系中存在多种漆酶同工酶,不同时间不同秸秆基质上漆酶同工酶数量和性质存在很大差异,木屑固体秸秆基质上漆酶同工酶I的表达比另外两种固体秸秆基质更明显,同时还发现漆酶同工酶谱带和酶活性大小存在一定的关系,基本上漆酶活性越高,同工酶谱带I颜色就越深越长,而同工酶Ⅱ和Ⅲ只起辅助作用．     

碳源氮源对白腐真菌漆酶合成的影响

从本实验室保藏的菌种中筛选到一株高漆酶合成的白腐真菌,通过单因子和正交试验对该菌株进行了碳源和氮源的利用研究.结果表明,其漆酶合成的最适碳源为葡萄糖,最适氮源为酵母浸出汁.碳氮源的最佳组成为:葡萄糖10g/L,酵母浸出汁7g/L.