鸭传染性浆膜炎灭活疫苗保存期试验

选用白油佐剂、蜂胶佐剂和鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)灭活菌液制成RA油乳剂灭活疫苗和蜂胶灭活疫苗,分别保存3个月、5个月、6个月、7个月、8个月、9个月,免疫雏鸭,探讨不同佐剂和保存期对免疫效果的影响。结果表明:2种佐剂疫苗均有保护力,但油乳剂灭活疫苗免疫效果比蜂胶灭活疫苗好,其保护率可达100%。疫苗保存期试验证明,油乳剂灭活疫苗在4°C冰箱可保存9个月以上。     

"鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗的研究与产业化"项目简介

公司"鸡新城疫、禽流感(H9亚型)二联灭活疫苗的研究与产业化"项目研究以新城疫病毒和禽流感H9亚型病毒为材料,感染鸡胚液经甲醛灭活后保留其免疫原性,以一定比例与油佐剂混合乳化,研制成一种能够"一针防两病"的新型疫苗.其间针对疫苗生产过程中的各个环节进行研究,解决了联苗技术,成功将鸡新城疫病毒与禽流感H9亚型病毒联合,而且达到并超过了单苗的防治效果,属国内领先技术;研究出新配方,解决了油乳剂灭活苗致注射部位变绿的行业难题,同时大大降低了疫苗粘度,使注射更轻松.采用浓缩技术,抗原含量是普通苗的2-3倍,使免疫后14天即可产生保护力;免疫保护率比普通苗更高,解决了普通疫苗免疫效果不确实的问题;采用进口佐剂和先进的乳化工艺,使得抗体保护持续时间比普通苗更长.     

鸡油乳剂苗乳化工艺的探讨

以H9亚型的禽流感毒株和新城疫病毒（ND）为种毒，接种9—11日龄鸡胚，制备疫苗用抗原，O．1％的甲醛灭活后．以司班-80和吐温-80作为乳化剂，10号白油为佐剂，制成油乳剂苗。油乳剂苗的免疫效力高低直接与它的性质有关，品质优良的油乳剂苗是物理性能稳定，颗粒均匀，黏度低，抗原不析出，不分层，呈乳白色。剂型为油包水（W／O）的油乳剂苗较粘稠，在机体内不易分散，佐剂活性好，在免疫鸡机体内产生持续刺激淋巴组织的效果，在乳化W/O剂型的油乳剂苗的过程中，乳化效果与乳化方法、佐剂的加工有一定的关系。当油佐剂的温度为45—50℃时的乳化效果好．所制备的油乳剂苗免疫5—8日龄的白羽肉鸡，抗体效价可达1：32以上，免疫效果好。     

变形假单胞菌灭活疫苗研究

选取甲醛、苯酚、和氯仿三种化学灭活剂在不同的条件下对变形假单胞菌进行灭活处理,确定了0.2%甲醛溶液28℃处理12 h;0.5%苯酚溶液28℃处理24 h;3.5%氯仿溶液28℃处理12 h的灭活条件。分别用三种灭活剂制备的疫苗免疫斜带石斑,测定斜带石斑的血清抗体效价和感染后的免疫保护率。结果显示:接种甲醛灭活疫苗组的血清抗体效价最高,接种苯酚灭活疫苗组的抗体效价次之,接种氯仿灭活疫苗组的抗体效价最低;三种灭活疫苗的免疫保护率分别为甲醛灭活疫苗46.67%,苯酚灭活疫苗30%,氯仿灭活疫苗20%。选择甲醛灭活疫苗与弗氏佐剂、白油佐剂、氢氧化铝、206佐剂、蜂胶等5种佐剂分别配伍后注射免疫斜带石斑,结果显示:添加佐剂组斜带石斑血清抗体效价全都大幅高于未添加佐剂组,其中白油的效果最好;添加佐剂组免疫保护率也全都大幅高于未添加佐剂组,也是白油佐剂的效果最好,免疫保护率高达91.67%,其余各组分别为氢氧化铝83.33%、206佐剂80.56%、弗氏佐剂72.22%、蜂胶66.67%。研究表明研制出了具有良好免疫保护效果的变形假单胞菌灭活疫苗,为进一步的中试试验奠定了基础。     

鸽禽Ⅰ型副粘病毒油佐剂灭活苗免疫效果观察

用鸽Ａ／ＰＭＶⅠ油佐剂灭活苗和ＮＤＶＬａｓｏｔａ 油佐剂灭活苗分别免疫肉种鸽,２０ ｄ 抗体水平达到峰值,在３ ．００ｌｏｇ２ 以上维持３０ ｄ 以上。４０ ｄ 后用鸽Ａ／ＰＭＶⅠ和ＮＤＶＦ４８Ｅ９ 分别进行攻击,对于ＮＤＶＦ４８Ｅ９ 的攻击,保护率均为１００ ％ ,对于鸽Ａ／ＰＭＶⅠ的攻击,鸽Ａ／ＰＭＶⅠ油佐剂灭活苗保护率为１００ ％ ,ＮＤＶＬａｓｏｔａ 油佐剂灭活苗保护率为６６．７ ％ 。田间试验,抽检４８ 份血样,抗体平均为４ ．３０ｌｏｇ２     

禽流感(AI)H9和新城疫二联灭活油佐剂疫苗的研制

从本地分离的禽流感（AI）-H9毒株和ND—lasota株，分别在9—11日龄的鸡胚增殖，灭活后用高压匀浆机乳化制成禽流感-H9,新城疫二联灭活油佐（乳）荆疫苗，经效力检验和攻毒试验结果表明，5日龄白羽肉鸡免疫后15天．抗体效价可达1：32以上，并能够保护免疫鸡免受AI的自然感染，ND的抗体效价也达到较高的水平。     

粤北地区鸡致病性大肠杆菌蜂胶佐剂疫苗的免疫试验

从粤北地区分离到的鸡致病性大肠杆菌中选择6株优势致病性大肠杆菌菌株做为制苗菌种，制备制苗菌液，按相同比例混合灭活，加蜂胶乙醇浸液为佐剂制备多价菌苗．安全试验结果证实，该灭活菌苗对20日龄肉仔鸡安全，试验鸡元不良反应；在5～10℃保存12个月，疫苗物理性状稳定．免疫效力试验结果：疫苗保护率为100％；接种20日龄雏鸡O．5ml／只，血凝试验检测结果为接种多价蜂胶灭活疫苗的试验鸡在免疫后第二周可检测出抗体，抗体滴度均数为3．10log2；免疫后第四周达到最高峰，抗体滴度均数为3．60log2；免疫后第五周抗体滴度开始下降，抗体滴度均数为2．10log2，但抗体滴度仍高于对照组（1．25log2）．在大肠杆菌感染鸡场进行的多批区域试验结果表明，该多价灭活疫苗安全，具有良好的保护作用．     

鸡传染性鼻炎三价灭活疫苗油乳佐剂的筛选及免疫效果评价

为了对比筛选出鸡传染性鼻炎(IC)三价灭活疫苗的最适油乳佐剂,使用三种不同的油乳佐剂制备了3批鸡传染性鼻炎(A型+B型+C型)三价灭活疫苗,并对疫苗的物理性状、安全性及免疫效力进行检测.结果 显示,三种佐剂制备的疫苗均为稳定的油包水乳剂,而佐剂3组的黏度(29.3 Pa.s)显著低于其余两种佐剂组(184.2 Pa.s...     

免疫佐剂及其作用机制

免疫佐剂在疫苗免疫中起着巨大的作用，传统疫苗和新型疫苗在研究和实践中暴露的问题推动了免疫佐剂的研究，使生物科学家开始对佐剂的研究越来越关注，新型佐剂和新型疫苗正成为当今科技攻关的重点项目。本文总述了矿物质佐剂、油佐剂等传统佐剂和分子佐剂等新型佐剂的优缺点及其作用机制的研究进展，以期增加对免疫佐剂及其作用机制的认识．     

不同动物血清补体对大肠杆菌的杀灭效果

探索不同动物血清补体对大肠杆菌的杀灭效果可以为开发利用补体作为新型疫苗佐剂提供理论依据。将培养活化的O78大肠杆菌用甲醛灭活,以蜂胶为佐剂制备大肠杆菌颗粒性疫苗,用其免疫11日龄海蓝褐蛋用公雏,制备大肠杆菌抗血清;将大肠杆菌抗血清灭活补体,与已知数量的大肠杆菌反应,形成抗原抗体复合物,然后加入不同动物的新鲜血清,细菌计数,观察不同动物血清补体对大肠杆菌的清除能力;微量板法测定不同动物血清补体总活性。结果表明,抗体与细菌抗原结合后,对细菌的杀灭作用较小,动物体内的补体,是细菌性疫苗发挥免疫效果的关键物质;哺乳动物血清中的补体对细菌的清除能力高于鸡,在哺乳动物中,豚鼠的血清补体对大肠杆菌的清除能力最高。     

干扰素在猪黏膜免疫应答中的研究进展

 黏膜免疫系统是动物产生免疫应答的物质基础，参与机体免疫应答并发挥着重要的功能。猪群接种免疫疫苗后，疫苗经黏膜免疫系统可产生黏膜抗体并激活全身性免疫应答，干扰素参与早期黏膜免疫，具有抗病毒及免疫调节等多种生物学功能。从不同种类的猪干扰素和免疫系统的相关性角度出发，阐述猪干扰素对黏膜免疫的调节作用。重点综述了干扰素与黏膜免疫系统、猪干扰素对免疫系统的调节作用及干扰素作为黏膜免疫佐剂的研究现状，旨在为猪干扰素作为黏膜免疫佐剂的研制提供参考。     

不同免疫佐剂对大肠杆菌疫苗免疫效果的影响

将大肠杆菌经培养后制成疫苗,分别加入矿物油佐剂、氢氧化铝佐剂和不加任何免疫佐剂,按一定免疫程序分别注射实验兔,取兔血清进行凝集试验测其抗体效价。结果表明：加矿物油佐剂苗的抗体效价最高（1：256）,不加佐剂苗的抗体效价次之（1：128）,加入氢氧化铝佐剂苗的抗体效价最低（1：64）。     

甘油-3-磷酸对甲肝疫苗诱导的体液免疫影响*

目的 研究甘油-3-磷酸对甲肝疫苗诱导的小鼠体液免疫应答的影响。方法 选取49只雌性ICR小鼠,分7组,每组7只,这7组小鼠分别为阴性对照、单纯抗原组、铝佐剂组和4组甘油-3-磷酸组,分别在免疫之后的第4、8、12、16、20周用酶联免疫法(ELISA)测定小鼠血清中的特异性的anti-HAV IgG水平。结果 在小鼠免疫之后的第4、8、12、16、20周单纯抗原组、铝佐剂组和4组不同剂量甘油-3-磷酸组均能检测到特异性抗HAV抗体,并且趋势为先升高后降低,且在免疫后的第8周最高;第4周和第8周的甘油-3-磷酸实验组的结果均高于单纯抗原组,且差异均具有统计学意义(P<0.05),并且第4周甘油-3-磷酸组抗体水平均超过铝佐剂组,并具有统计学意义(P<0.05),其中甘油-3-磷酸2 mg为最佳剂量组,其抗体水平在免疫后的第4、8、12、16、20周均高于单纯抗原组,且在第8周抗体水平达到峰值,抗HAV IgG水平为lg(3.064±0.07851),铝佐剂的也是在第8周抗体水平达到峰值,抗HAV IgG水平为lg(3.150 ±0.1382)。结论 甘油-3-磷酸有免疫佐剂的作用,能够有效、迅速地增强HAV诱导的体液免疫应答,是一种潜在、安全有效的新型疫苗佐剂。     

Crucial role for the Nalp3 inflammasome in the immunostimulatory properties of aluminium adjuvants

Aluminium adjuvants, typically referred to as 'alum', are the most commonly used adjuvants in human and animal vaccines worldwide, yet the mechanism underlying the stimulation of the immune system by alum remains unknown. Toll-like receptors are critical in sensing infections and are therefore common targets of various adjuvants used in immunological studies. Although alum is known to induce the production of proinflammatory cytokines in vitro, it has been repeatedly demonstrated that alum does not require intact Toll-like receptor signalling to activate the immune system. Here we show that aluminium adjuvants activate an intracellular innate immune response system called the Nalp3 (also known as cryopyrin, CIAS1 or NLRP3) inflammasome. Production of the pro-inflammatory cytokines interleukin-1beta and interleukin-18 by macrophages in response to alum in vitro required intact inflammasome signalling. Furthermore, in vivo, mice deficient in Nalp3, ASC (apoptosis-associated speck-like protein containing a caspase recruitment domain) or caspase-1 failed to mount a significant antibody response to an antigen administered with aluminium adjuvants, whereas the response to complete Freund's adjuvant remained intact. We identify the Nalp3 inflammasome as a crucial element in the adjuvant effect of aluminium adjuvants; in addition, we show that the innate inflammasome pathway can direct a humoral adaptive immune response. This is likely to affect how we design effective, but safe, adjuvants in the future.     

鸭疫里默氏杆菌三价灭活疫苗的免疫保护期研究

选择免疫原性好的血清1,2,4型鸭疫里默氏杆菌（RA）分离株制备三价灭活油乳剂苗,疫苗抗原含量为5×109CFU/ml,分别用0.5,1.0和1.5ml/只剂量接种7日龄樱桃谷肉鸭以检验器其安全性;用0.25ml/只的剂量接种樱桃谷肉雏鸭,分别于免疫后第1、2、3,4、5和9周攻毒,以检验其免疫效果.安全性检验结果显示,肉雏鸭接种后未见局部和全身异常反应;攻毒保护试验结果显示,免疫后2～9周雏鸭对3个血清型的RA的攻毒保护率达70％ ～ 100％.证明该三价灭活疫苗具有良好的安全性免疫保护力,免疫保护期不少于9周.     

鸡新城疫水－油－水型活性复乳的研制和免疫研究

水－油－水（Ｗ／Ｏ／Ｗ）型活性复乳是将油包水初乳（Ｗ／Ｏ）进一步分散在水相中经过二次乳化，使用时并配以新城疫弱毒疫苗联合制成。采用透析法测定复乳的形成率分别为９５．０％，８９．３％，８８．０％和８４．４％，雏鸡免疫后４ｄＨＩ抗体即明显升高，井持续２个月以上；对育成鸡的加强免疫持续期达１４个月，滴鼻或肌注攻毒全保护，证实新城疫Ｗ／Ｏ／Ｗ活性复乳已达到实用要求。     

鸡新城疫水-油-水型活性复乳的研制和免疫研究

水－油－水（Ｗ／Ｏ／Ｗ）型活性复乳是将油包水初乳（Ｗ／Ｏ）进一步分散在水相中经过二次乳化，使用时并佤以新城疫弱疫苗联合制成，有杉透析法测定复乳的形成率分别为９５．０％，８９．３％，８８．０％和８４．４％，雏鸡免疫后４天ＨＩ抗体即明显升高，并持续２个月以上，对育成鸡的加强免疫持续期达１４个月，滴鼻或肌注攻毒全保护，实新城疫Ｗ／Ｏ／Ｗ活性复乳已达到实用要求。     

鸭禽流感母源抗体的消长规律及其免疫效果

为研究鸭禽流感免疫程序,对不同日龄的雏鸭进行禽流感母源抗体的检测,并对雏鸭接种禽流感H5、H9二价油乳剂苗后的HI抗体水平进行了检测。结果表明,雏鸭的母源抗体水平在1日龄达最高值,然后逐渐下降;H5抗体20日龄后降低到4.5log2以下,H9抗体25日龄后降低到4.8log2以下。根据试验采用的免疫方案,对雏鸭在8日龄时进行首免,并多次免疫后可提高H5、H9抗体水平,有效预防禽流感的发生。     

鸡禽流感母源抗体的消长规律及其免疫效果研究

为探讨科学的鸡禽流感免疫程序,对1～28日龄的土杂肉鸡和罗曼蛋鸡进行禽流感母源抗体检测,以及对雏鸡接种禽流感油乳剂疫苗后的HI抗体水平变化进行了监测。结果表明,两种雏鸡的母源抗体水平在1日龄时均达最高值,然后逐渐下降;肉鸡11日龄后H5、H9抗体滴度分别降低到4.2log2和4.3log2以下;蛋鸡28日龄后H5、H9...