碱性环境对苜蓿愈伤组织几种酶活性的影响

碱性条件对苜蓿愈伤组织苯丙氨酸解氨麦（ＰＡＬ），过氧化氢酶（ＣＡＴ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力影响的研究结果表明，随着ｐＨ值的升高，ＰＡＬ和ＳＯＤ活性均下降，ｐＨ值小于９．０，ＣＡＴ活性随ｐＨ值升高而升高，ｐＨ值大于９．０，则随ｐＨ值的升高而下降。     

海洋来源褐藻胶裂解酶分离纯化及酶学性质研究

以假交替单胞菌(Pseudoalteromonas sp.zb7-4)发酵制备褐藻胶裂解酶粗酶液,采用弱阴离子DEAE交换层析分离褐藻胶裂解酶,分析纯化褐藻胶裂解酶Alg L的酶学特性.结果表明:Alg L的表观分子质量约为32 ku,比活力为(208.26±5.87)U·mg-1;其最适反应pH为7.0,在pH为6.0~10.0范围内稳定性较好,保温1 h仍能保持80%以上的相对酶活力;最适反应温度50℃,在40℃保温30 min,其残余酶活力高于80%;Cu2+、Cr3+、Co2+、Ba2+、Sr2+、Hg2+对该酶具有不同程度的抑制作用,Hg2+抑制作用最为明显;该酶具有较好的盐耐受性,在3 mol·L-1Na Cl反应体系中保温2 h,仍残余66%酶活力.动力学参数Km、Vmax、Kcat测定表明,该酶对聚古罗糖醛酸钠(PG)亲和力较高,为偏好聚甘露糖醛酸钠(PM)裂解作用的双功能酶.     

Bioscouring Knitted Cotton Fabric with an Experimental Pectate Lyase

An experimental pectate lyase enzyme was used toscour knitted cotton fabric and the emphasis was on pectinremoval. Using an enzyme dosage of 0.2 g/L at temperature55℃ and pH 6.35 for 30 rain, good scouring properties wereobtained. When appropriate concentrations of 1 - HydroxyEthylidene- 1, 1 - Diphosphonic Acid(HEDP) and CaCl2were added, the percentage pectin removal improvedsignificantly.     

N-acetylmuramic acid 6-phosphate lyases (MurNAc etherases): role in cell wall metabolism, distribution, structure, and mechanism

MurNAc etherases cleave the uniqued-lactyl ether bond of the bacterial cell wall sugar N-acetylmuramic acid (MurNAc). Members of this newly discovered family of enzymes are widely distributed among bacteria and are required to utilize peptidoglycan fragments obtained either from the environment or from the endogenous cell wall (i.e., recycling). MurNAc etherases are strictly dependent on the substrate MurNAc possessing a free reducing end and a phosphoryl group at C6. They carry a single conserved sugar phosphate isomerase/sugar phosphate- binding (SIS) domain to which MurNAc 6-phosphate is bound. Two subunits form an enzymatically active homodimer that structurally resembles the isomerase module of the double-SIS domain protein GlmS, the glucosamine 6-phosphate synthase. Structural comparison provides insights into the two-step lyase-type reaction mechanism of MurNAc etherases: β-elimination of the D-lactic acid substituent proceeds through a 2,3-unsaturated sugar intermediate to which water is subsequently added. Received 31 August 2007; received after revision 12 October 2007; accepted 1 November 2007     

不同方法提取鳗鲡病原茵DNA模板的差异分析

利用吸光值、琼脂糖电泳及PCR差异扩增等指标,对酚一氯仿法、水煮法、碱裂解法3种方法制备的鳗鲡病原菌DNA模板进行了差异分析．结果表明：1）不同方法提取的病原菌模板DNA的浓度、纯度及分子质量大小存在差异,但以这3种方法提取的病原菌DNA为模板,均能成功扩增到细菌16SrD．NA和外膜蛋白的保守序列．其中,酚一氯仿提取的模板DNA浓度较低、纯度较高;水煮法和碱裂解法提取的模板DNA浓度较高、纯度较低．2）电泳显示,3种方法获得的模板DNA扩增出的16SrDNA保守序列条带均一,没有显著差异,但在外膜蛋白保守序列的扩增中却因菌种和模板提取方法的不同而存在差异．     

基因筛选克隆表达原花青素降解酶及其酶解条件优化的初步研究

针对化学法制备低聚原花青素存在环保压力和副产物多等问题，研究了通过生物酶法降解高聚原花青素来制备低聚原花青素的方法。首先通过基因筛选方法筛选出SananA和EcnanA基因用于酶法降解高聚原花青素，将SananA和EcnanA基因连接在不同质粒载体表达蛋白的结果表明，SananA基因连接在pETDuet-1载体上时的蛋白表达效果较优。进而，利用纯化的SananA蛋白优化高聚原花青素降解条件，结果显示较优的酶解条件为温度50℃、pH=10、反应时间8 h，在此条件下原花青素单体积累量为35.67 mg/g，二聚体积累量为14.49 mg/g。     

异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂结构的修饰

利用Fmoc固相多肽合成法, 按已知异柠檬酸裂解酶抑制剂的直链肽氨基酸序列合成首尾相连的环肽抑制剂. 经色谱纯化和质谱鉴定, 其相对分子质量的实测值与理论值相符. 抑制率实验结果表明, 合成的环肽对异柠檬酸裂解酶有明显抑制作用, 抑制率大于50%. 采用高效液相色谱法分别检测直链肽和环肽在血浆中的半衰期, 实验
结果表明, 环肽在血浆中的半衰期为11 min, 比直链肽的半衰期延长175%.     

番木瓜果胶裂解酶基因片段的克隆及序列分析

以4个不同成熟阶段的番木瓜果肉cDNA为模板，经RT-PCR扩增仅在第四成熟度的番木瓜果肉中得到596bp的PL基因片段，所得核苷酸序列通过Blast分析，该序列与草莓、拟南芥、芒果、葡萄等果胶裂解酶基因的相似性都较高，均在79％-82％之间．     

钾对小麦叶片感染叶锈病的减轻作用及对几种酶活性的影响

用含有不同浓度（０、２．５５、３０．６０ｍｍｏｌ／Ｌ）钾离子的Ｈｏａｇｌａｄｎ培养液培养的小麦接种叶锈病病原菌，接菌９ｄ后统计接菌叶片上的孢子堆数目，结果表明钾能明显减轻小麦锈病的发生；小麦感染锈病后，叶中多酚氧化酶、过氧化物酶、苯丙氨酸解氨酶和超氧化物歧化酶的活性明显升高，用含较高浓度钾离子（３０．６０ｍｍｏｌ／Ｌ）的培养液培养的小麦叶片酶活性的增加值显然高于用含较低浓度钾离子（２．５５ｍｍｏｌ     

果胶裂解酶液态发酵条件的研究

通过单因素及正交实验对黑曲霉(Aspergillus niger)产生果胶裂解酶的发酵条件进行优化,研究了该酶的性质。实验表明,该酶的最适产酶培养基组成为(g·L-1):麸皮60,玉米秸杆40,尿素20,K2HPO4·3H2O 2．0,KCl 7．0,CaCO310．0。最适培养条件为:初始pH 6．0,30℃,接种量8％,培养2 d,此时酶活力为8．47 U／mL。该酶的最适温度50℃,最适pH 6．0。