日本鳗鲡嗜水气单胞菌的分离鉴定与免疫相关基因变化的研究

2018年1—2月,饲养于集美大学疫苗中心的日本鳗鲡(Anguilla japonica)出现了一定数量的死亡,从病鱼脾脏中分离到一株优势菌株,结合Biolog系统微生物鉴定和分离菌16S rRNA基因的测序结果,显示该分离菌为嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)。采集自然感染嗜水气单胞菌前后的日本鳗鲡肝、脾、肾和粘液为cDNA模板,采用荧光定量PCR(real-time PCR)法检测组织中Toll样受体3(tlr3)、肿瘤坏死因子(tnf-α)、C型溶菌酶(lysC)和环氧合酶(cox2)等免疫相关基因的表达变化。结果表明:日本鳗鲡自然感染嗜水气单胞菌后,tlr3、tnf-α、cox2均未发现显著性的变化,但lysC的含量在日本鳗鲡脾脏和肾脏中均出现显著性上调,即,自然感染嗜水气单胞菌的日本鳗鲡的抗感染免疫功能与C型溶菌酶密切相关。     

鳗鲡病原菌二联外膜蛋白基因工程表达载体的构建

根据鳗鲡病原性嗜水气单胞菌Ⅱ型孔蛋白(porinⅡ)和迟钝爱德华氏菌外膜蛋白S(ompS2)的基因全长序列,分别选取这两个全长序列中表达其蛋白质膜外部分且理论免疫原性较好的两个基因片段,通过融合PCR技术连接这两个外膜蛋白基因片段.根据表达载体(pGEX-2T-His)的限制性酶切位点在连接序列片段的两端引入限制性酶切位点BamHⅠ和EcoRⅠ,成功构建了双外膜蛋白基因片段重组表达载体(pGEX-2T-His-porinⅡ-ompS2).表达载体理论表达产物的蛋白质结构预测表明表达产物无信号肽和跨膜区,不存在三级结构;亲水性和免疫原性预测分析表明该表达蛋白理论上为可溶性蛋白并具有丰富的抗原决定簇,本研究为该表达载体的蛋白表达、纯化以及表达产物的免疫原性研究奠定了基础.     

乘法型D/A转换器交流有功功率的测量方法

为了正确反映电力系统的状况,提出了一种高准确度的工频交流有功功率的测量方法.该方法由乘法型D/A转换器构成四象限乘法器,通过理论推导得到了有功功率的理论表达式,分析了测量方法误差及影响测量准确度的因素.对测量误差估计公式的MATLAB仿真表明:有功功率的测量方法误差仅为±0.00370%,远小于国际标准的0.01%.根据该方法,可构造50Hz 工频高准确度的交流有功功率标准表.     

大有前途的螃蟹养殖业

天然水生动物——螃蟹,肉质细嫩鲜美、营养丰富,早是为人们所熟悉的水产珍品。近年来,人们单纯依靠捕捉天然螃蟹已远远不能满足人民的需要。要让人们吃上螃蟹,根本的出路在于搞人工养殖河蟹。人工养殖螃蟹是目前水产品中经济收入效益最高的一种,它是农村一项新兴的致富门路。     

超级燃料—乳化油

近几年,在国际能源市场上悄然冒出一种新型燃料——乳化油,并被人们称为“超级燃料”。乳化油是沥青加水和化学添加剂后形成的液体燃料。80年代初委内瑞拉石油研究所就着手沥青乳化技术的研究,近几年终于获得成功,已作为发明专利在国际上登记注册。     

正弦条件下电功率的测量方法

从无功功率定义出发,经严格的数学公式推导,提出了一种在正弦条件下能同时实现有功功率和无功功率测量的方法,给出了实现其测量方法的电路原理框图,对测量误差及其影响量进行了动态分析,给出非线性误差的计算公式.该方法使有功、无功测量电路合一,降低了应用电路成本,提高了测量电路的可靠性.     

高职高专学生实验能力评价体系构建初探

科学地建立高职高专实验能力评价体系是高职高专实验教学改革的重点,以实验能力结构和评价标准构建的体系初探表明,该体系操作性好,有利于教学质量的提高,有利于高职高专学生综合能力的提高。     

不同方法提取鳗鲡病原茵DNA模板的差异分析

利用吸光值、琼脂糖电泳及PCR差异扩增等指标,对酚一氯仿法、水煮法、碱裂解法3种方法制备的鳗鲡病原菌DNA模板进行了差异分析．结果表明：1）不同方法提取的病原菌模板DNA的浓度、纯度及分子质量大小存在差异,但以这3种方法提取的病原菌DNA为模板,均能成功扩增到细菌16SrD．NA和外膜蛋白的保守序列．其中,酚一氯仿提取的模板DNA浓度较低、纯度较高;水煮法和碱裂解法提取的模板DNA浓度较高、纯度较低．2）电泳显示,3种方法获得的模板DNA扩增出的16SrDNA保守序列条带均一,没有显著差异,但在外膜蛋白保守序列的扩增中却因菌种和模板提取方法的不同而存在差异．     

鳗鲡肠道中嗜水气单胞菌的拮抗菌筛选

从鳗鲡肠道中分离到643株细菌,用点种法筛选出65株病原性嗜水气单胞菌的拮抗菌,研究拮抗效果最好的14株拮抗菌的抗菌谱和生长曲线及其与病原性嗜水气单胞菌的共凝集作用.研究结果显示:NAC琼脂培养基筛选的2株拮抗菌(Na 3-38和Nb 3-15)对7株指示菌均有较强的拮抗作用,Aa 3-22和Mb 3-7对7株指示菌中的5株有拮抗效果;除Na 3-38和Nb 3-15以外,其余12株的生长系数均大于嗜水气单胞菌;11株拮抗菌(Na 3-38、Nb 3-15、Ab 2-55、Ab 2-77、Ab 1-3、Aa 3-22、Aa 3-67、Mb 1-4、Mb 2-10、Mb 3-7和Mb 3-27)和嗜水气单胞菌的共凝集率大于10%.这表明:Aa 3-22和Mb 3-7在抗菌谱和生长曲线及其与病原性嗜水气单胞菌的共凝集作用等方面都适合作为益生菌.     

提高中学女生排球运动员弹跳力的相关思考

弹跳力是排球运动员的基本素质之一,弹跳力水平的高低会影响到扣球、拦网、跳发球、跳传球等技术的发挥,甚至决定着比赛的胜负。在一定程度上,弹跳力在优秀运动员的成长道路上起着决定性的作用。本文从中学女生的生理特点着手,分析影响中学女生弹跳力的因素,并对中学女生排球运动员如何提高弹跳力以及训练中应注意的问题,给予科学合理的建议,为中学女生排球运动员的专项素质训练提供参考。