异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的优化筛选

利用噬菌体肽库筛选与计算机模拟分子对接技术, 优化异柠檬酸裂解酶肽类抑制剂的筛选. 先通过噬菌体肽库筛选出与异柠檬酸裂解酶（ICL）具有高亲和力的结合肽, 再利用Discovery Studio 2.1模拟多肽与ICL蛋白晶体（1F8I）的分子对接, 最后用Fmoc固相合成法合成多肽, 并对其生物活性进行检测. 实验结果表明, 通过噬菌体肽库筛选得到了29条七肽序列, 其中12条可与ICL蛋白晶体成功对接. 体外生物活性检测结果显示, 得到的12条七肽均对ICL的活性有明显抑制作用（抑制率均超过50%）.     

环肽合成的试验研究

采用Fmoc固相合成法得到直链肽,通过空气氧化两个半胱氨酸的巯基生成二硫键,得到一类新型含二硫键的环肽.该环肽经ESI-MS鉴定,RP-HPLC纯化、分析后确定.     

不同活力花生种子萌发中ICL活性的变化及渗透调节法对酶活性的影响

实验结果证明,不同活力的花生种子在荫发中异柠檬酸裂解酶(ICL)活性的表现模式不同.随着活力的降低,ICL 活性高峰出现的时间推迟,峰值下降.应用20%聚乙二醇(PEG)在播前进行渗透调节,花生种子活力的提高与IGL 相对活性的增加密切相关.实验结果还表明,在PEG 渗透期间,花生种子已出现ICL 的RNA 合成.     

在毕赤酵母菌中表达的hGlp-1-白蛋白融合蛋白的纯化

为了延长胰高血糖素样肽-1(GLP-1)在血浆中的半衰期,实验构建了编码GLP-1和白蛋白的融合蛋白基因,并在毕赤酵母中获得高效表达.发酵液经超滤后,分别采用了阴阳离子交换法和染料亲和法进行纯化.结果表明,用染料亲合法纯化能够有效地去除发酵过程中产生的弱酸性绿色化合物.经电泳鉴定纯度可达到95%,回收率可达到60%.     

MCM-41负载对甲苯磺酸催化合成柠檬酸异辛酯

采用浸渍法将对甲苯磺酸(p-TSA)负载到碱性条件下水热法制备的介孔分子筛MCM-41(p-TSA/MCM-41)上,通过FT-IR,XRD,BET,TG,TEM和EA测试技术对其进行了表征.以柠檬酸异辛酯的合成为探针实验,研究了p-TSA/MCM-41的催化性能.结果表明,该酯化反应的最佳条件为:160℃时,p-TSA/MCM-41用量为柠檬酸质量的3%,柠檬酸与异辛醇摩尔比为1∶5,反应2.5h柠檬酸异辛酯的酯化率达96.7%.     

红芪组织培养中次生代谢产物的研究：I.红芪愈伤组织异柠 …

在红芪不同生长状态的愈伤组织中，异柠檬酸裂解酶（ＩＣＬ）活性差异很大，其中以分化愈伤组织中活性最高，与此相平行在红纸不同培养时期的愈伤组织中，不饱和脂肪酸含量降低，多糖含量升高，由此可以肯定异柠檬酸裂解酶为红芪次生代谢产生多糖过程中的一个重要酶，同时在无菌苗中异柠檬酸裂解酶活性也很高，而多糖没有检测到，说明异柠檬酸裂解也参加了植物细胞的初级代谢，我们认为初级和次级代谢过程中某些重要的甚至关键的酶是     

红芪组织培养中次生代谢产物的研究

在红芪不同生长状态的愈伤组织中,异柠檬酸裂解酶(ICL)活性差异很大,其中以分化愈伤组织中活性最高．与此相平行在红芪不同培养时期的愈伤组织中,不饱和脂肪酸含量降低,多糖含量升高．由此可以肯定异柠檬酸裂解酶为红芪次生代谢产生多糖过程中的一个重要酶．同时在无菌苗中异柠檬酸裂解酶活性也很高,而多糖没有检测到,说明异柠檬酸裂解酶也参加了植物细胞的初级代谢．我们认为初级和次级代谢过程中某些重要的甚至关键的酶是相同的,只是随着细胞的发育过程其活性发生了变化．     

红芪组织培养中次生代谢产物的研究Ⅰ.红芪愈伤组织异柠檬酸裂解酶活性的变化

在红芪不同生长状态的愈伤组织中,异柠檬酸裂解酶（ＩＣＬ）活性差异很大,其中以分化愈伤组织中活性最高．与此相平行在红芪不同培养时期的愈伤组织中,不饱和脂肪酸含量降低,多糖含量升高．由此可以肯定异柠檬酸裂解酶为红芪次生代谢产生多糖过程中的一个重要酶．同时在无菌苗中异柠檬酸裂解酶活性也很高,而多糖没有检测到,说明异柠檬酸裂解酶也参加了植物细胞的初级代谢．我们认为初级和次级代谢过程中某些重要的甚至关键的酶是相同的,只是随着细胞的发育过程其活性发生了变化．     

结焦抑制剂中间体磷酸二异辛酯的合成

 乙烯裂解生产过程中存在的一个突出问题是结焦,在裂解原料中添加抑制剂是抑制结焦的一种重要方法,磷酸二异辛酯的吗啉盐是一种新型的结焦抑制剂。本实验以磷酸和异辛醇为原料,分别以活性氧化铝、活性硫酸钠、钨磷酸为催化剂,合成磷酸二异辛酯。通过改变催化剂的种类,选择催化性能良好的杂多酸钨磷酸为催化剂。实验结果表明,反应条件对目标产物收率有很大影响,钨磷酸含量为5%,催化剂用量为原料质量的2.0%,异辛醇与磷酸的物质的量之比为2.3,反应时间为4h时,磷酸二异辛酯收率最高,达72.8%。IR谱图分析结果表明产物为目标产物磷酸二异辛酯。     

清除血浆中LDL用生物活性短肽SDE的合成研究

高脂血症是引起心脑血管疾病的主要原因之一。Ser-Asp-Glu 三肽(SDE)在对血浆中低密度脂蛋白(LDL)的识别及特异性吸附起关键性作用。本实验采用 DCC/HOBt 液相法,合成三肽(SDE)。重点研究反应温度、反应时间和原料配比对 SDE 产率的影响。结果表明本实验成功合成出SDE 三肽。     

纤维结合素多肽衍生物的化学合成及对骨髓瘤细胞株K562的体外抑制作用

应用固相多肽合成技术，人工合成了一种衍生于纤维结合素的六肽ＧＲＧＤＳＳ。用高效液相层析进行纯度鉴定，并观察六肽对骨髓瘤细胞株Ｋ５６２的体外抑制作用。实验结果表明，六肽在７２ｈ内对骨髓瘤细胞的抑制率为３１％；多肽的结构对功能有一定的影响。根据竞争抑制原理，设计和合成多功能的多肽可为临床医学治疗肿瘤开辟一个新的途径。     

Patellamide A类似物的全合成研究

本文从D-(缬)噻唑氨基酸、L-异亮氨酸、L-丝氨酸、1-苏氨酸出发合成了PatellamideA类似物环肽(1)。D-(缬)噻唑氨基酸由D-缬氨酸和L-半胱氨酸按亚胺酯法合成。丝氨酸噁唑啉(11)由三苯基膦法合成,苏氮酸噁唑啉(17)由亚胺酯法合成。11和17去保护基后经DCC/HOBT法转变为线性肽(19a),19a用五氟苯酯法环化得得1.1和其丝氨酸噁唑啉的开环产物环肽都具有抗肿瘤活性。     

寡糖Lewis A模拟肽对小鼠急性腹膜炎的抑制作用

选择寡糖Lewis A模拟肽作为特异阻断剂, 探讨通过阻断E-选择素与其配体的结合抑制炎症的可能性. 向一组小鼠腹膜内注射酵母聚糖3 h后, 再于静脉注射表达寡糖Lewis A模拟肽IELLQAR的噬菌体或合成肽IELLQAR, 以空噬菌体或BSA作对照, 观察到实验组腹腔冲洗液中的嗜中性粒细胞显著减少. 为证实该结果, 髓过氧化物酶活性被测定, 酶活性的降低同嗜中性粒细胞的减少平行, 表明注射寡糖Lewis A模拟肽可能通过阻断E-选择素与其配体结合, 防止急性炎症的发生.     

一种镍基单晶高温合金的反相热机械疲劳行为

采用扫描电镜、透射电镜等方法研究了一种镍基单晶高温合金在600~900℃的反相位热机械疲劳行为,旨在探讨单晶合金的热疲劳变形及断裂机制,丰富单晶合金热机械疲劳理论。试验结果表明：当应变幅由0.6%增大至0.9%时,热机械疲劳寿命下降,塑性应变量和应力范围增大。合金的循环应力响应曲线在低温半周表现为循环硬化行为,而在高温半周则表现为循环软化行为。合金主要的变形特征是局部区域滑移带的运动。热机械疲劳裂纹起始于试样表面应力集中处,并沿着滑移带在{111}面向合金内部扩展,拉应力对合金的断裂起到了主导作用。     

Cyclic peptides-assisted transport of metal ions across liquid-organic membrane

The formation of alkali and alkaline-earth metal picrate complexes with cyclo(Pro-Gly)_n ionophores (1, n = 3; 2, n = 4) can facilitate the migration of metal ions across a bulk liquid CH₂Cl₂ membrane. The migration behavior was studied by measuring the solution absorption at 356 nm, using a UV/Vis spectrophotometer, and the rates can be determined by comparing the initial absorption of donor solutions with the absorption of the corresponding receiver solutions as the function of time. It was found that cyclic peptide 1 shows higher transport activity for the studied alkali and alkaline-earth metal ions than compound 2, which is related to the backbone flexibility of the cyclic peptides. The findings in this work suggest that the rate of ionophore-facilitated ion transport depends not only on the ability of complex formation in aqueous phase, but also on the ability of complex dissociation in organic phase.     

自组装巯基环肽单层膜修饰金电极电化学行为的研究

应用循环伏安及交流阻抗技术研究了巯基环肽自组装单层膜修饰金电极的电化学行为，证明了巯基环肽分子能够在金表面形成一定覆盖度的吸附层，同时考察了金/巯基环肽自组装单层膜电极在不同pH值的KCl溶液中的电化学行为。为深入研究巯基环肽的膜结构及性质打下了必要的基础。     

基于蛋清抗氧化肽增效因子的优化研究

以DPPH自由基清除率为评价指标,考察了单独添加NaCl、糖类、柠檬酸以及两两或三者合用时对蛋清抗氧化肽活性的影响,并在此基础上运用响应面分析法,优化出增效剂最佳组合。结果表明,NaCl、麦芽糖及柠檬酸均能显著提高蛋清抗氧化肽的活性（P<0.05）,可作为蛋清抗氧化肽的抗氧化增效剂单剂,三者合用时增效效果最佳,最佳组合为1.4%NaCl+3.0%麦芽糖+2.4%柠檬酸,在此条件下蛋清抗氧化肽对DPPH自由基的IC50值为0.27mg/ml,增效比SR可达3.96。     

乳酸菌肽与模拟生物膜脂质体的相互作用

通过同步荧光法,循环伏安法和交流阻抗法,研究了乳酸菌肽与模拟生物膜脂质体的相互作用.实验研究发现这种肽和带正电的脂质体间存在相互作用,乳酸菌肽可以支撑双层内脂膜产生孔隙,它使得标记离子Fe（CN）6^3-/4-穿过内脂膜,在玻碳电极（GCE）上发生氧化还原反应,这种作用与时间和乳酸菌肽的浓度都有关.     

Biomimetic synthesis and optimization of cyclic peptide antibiotics

Molecules in nature are often brought to a bioactive conformation by ring formation (macrocyclization). A recurrent theme in the enzymatic synthesis of macrocyclic compounds by non-ribosomal and polyketide synthetases is the tethering of activated linear intermediates through thioester linkages to carrier proteins, in a natural analogy to solid-phase synthesis. A terminal thioesterase domain of the synthetase catalyses release from the tether and cyclization. Here we show that an isolated thioesterase can catalyse the cyclization of linear peptides immobilized on a solid-phase support modified with a biomimetic linker, offering the possibility of merging natural-product biosynthesis with combinatorial solid-phase chemistry. Starting from the cyclic decapeptide antibiotic tyrocidine A, this chemoenzymatic approach allows us to diversify the linear peptide both to probe the enzymology of the macrocyclizing enzyme, TycC thioesterase, and to create a library of cyclic peptide antibiotic products. We have used this method to reveal natural-product analogues of potential therapeutic utility; these compounds have an increased preference for bacterial over eukaryotic membranes and an improved spectrum of activity against some common bacterial pathogens.