蝙蝠蛾拟青霉质量标准及免疫活性研究

目的:建立蝙蝠蛾拟青霉菌100 L发酵菌丝体质量标准,并验证其安全性和免疫调节活性.方法:采用高效液相色谱等方法,在测定菌丝体产量和腺苷含量的基础上,测定其水分、一般杂质、酸不溶性杂质和重金属含量.此外,进行了小鼠免疫增强实验.结果:菌丝体产量不少于20.80 g/L,菌丝体中腺苷含量不少于0.27%,水分含量不超过6.71%,总灰分含量不超过1.26%,酸不溶性灰分含量不超过0.15%,重金属含量少于国家标准计入质量标准正文.小鼠免疫增强实验显示,发酵菌丝体显著提高小鼠迟发型超敏反应,并对IL-10、IL-12、IL-12R、IFN-α等炎症相关因子水平具有上调作用.结论:初步建立了蝙蝠蛾拟青霉菌100 L发酵菌丝体质量标准,并证实其在小白鼠体内的安全性和免疫调节活性.     

基质pH值对青霉发生的影响

基质ｐＨ 值对肯霉（ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ）的发生有明显的影响，结果表明：在ｐＨ６．２～７．５的条件下，对青霉菌丝的生长及孢子的形成最为有利；但当ｐＨ超过９．５或低于４时，青霉菌丝的生长受到抑制．     

舒巴坦前体溴代青霉烷酸的工艺研究

以β-内酰胺酶抑制剂舒巴坦的传统合成工艺为基础，以6-APA为原料，在氢溴酸和亚硝酸钠作用下，合成舒巴坦的前体溴代青霉烷酸，确定了最佳合成工艺．通过一系列实验，可以得出6-APA、氢溴酸、溴素、亚硝酸钠的最佳配比为1：13：4：1（物质的量比），反应温度在0℃以下，反应时间达4h以上时，产品收率可达92％，并用红外光谱对产品结构进行初步表征。     

2β-氯甲基青霉烷酸二苯甲酯合成方法的改进

6,6-二氢青霉烷酸二苯甲酯1β-氧化物同2-巯基苯并噻唑反应后,与硫酰氯作用得2β-氯甲基青霉烷酸二苯甲酯.     

α-1,6-葡聚糖酶基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

根据朱黄青霉(Penicillium minioluteumHI-4)α-1,6-葡聚糖酶的基因序列,人工合成α-1,6-葡聚糖酶基因并将其插入毕赤酵母(Pichia pastoris)表达载体pPICZαA,PCR和双酶切验证结果均表明成功构建了重组质粒pPICZαA-Dex.重组质粒经SacⅠ线性化后整合到毕赤酵母X33基因组中进行表达.摇瓶发酵表明,重组毕赤酵母经甲醇诱导120 h产酶活力达到最高值29.2 U/mL,SDS-PAGE结果显示在67 ku附近有明显的条带,与α-1,6-葡聚糖酶理论分子质量相符合.     

一株高产果胶酶青霉菌株的筛选鉴定

从淤泥中筛选、分离纯化,得到了一株高产果胶酶的青霉菌株,编号为L5.根据培养特征、形态特征和内转录间隔区(ITS)序列分析,将L5菌株鉴定为草酸青霉菌(Penicillium oxalicum).该菌株在28℃,pH 6.0,摇床转速160 r/min条件下培养70 h,其果胶酶活性可达39 940 U.mL-1.min-1.     

简青霉对酚类和苯胺类污染物的降解研究

在培养4 d的简青霉培养体系中,分别加入不同浓度的酚类和苯胺类物质,观察这些有毒物质对简青霉生长的影响,并研究简青霉对这几种有毒物质的降解效果.结果表明:低浓度的酚类和苯胺类物质能促进简青霉的生长,高浓度的这些物质则对简青霉的生长有一定的抑制作用.同时简青霉能够很好地催化氧化苯酚,2,4-二氯苯酚和苯胺.当苯酚质量浓度...     

绳状青霉及其代谢产物浸铀研究

本文开展绳状青霉直接浸铀研究,探索培养温度、培养时间、接种量对铀浸出率的影响;同时开展绳状青霉代谢产物浸铀研究,探索不同pH值的绳状青霉代谢产物的铀浸出率。结果表明,当培养温度为35 ℃、培养时间为3 d、接种浓度为0.1%时,绳状青霉直接浸铀的铀浸出率为70.13%;当绳状青霉代谢产物的pH值为2.6时,铀的浸出率达到峰值,为82.58%。     

偏甘油酯脂肪酶PrLip的重组表达及酶学性质表征

偏甘油酯脂肪酶因其独特的底物偏好性具有广阔的应用前景。研究从食品安全菌娄地青霉的基因组中发现了一个假定的偏甘油酯脂肪酶prlip基因,通过全基因合成技术获得该酶基因序列,并构建了PrLip组成型表达的毕赤酵母基因工程菌。工程菌在30℃发酵培养60h,发酵活力达到22.26U/mL。利用阴离子交换层析法纯化,获得纯度大于90%的脂肪酶PrLip。酶学性质研究发现该酶的最适反应温度为45℃,最适反应pH值为7.0,40℃的半衰期为6h,水解及酯化反应证实PrLip是一种偏甘油酯脂肪酶。脂肪酶PrLip具有良好的温度耐受性及对大多数表面活性剂的耐受性,使其具有广阔的工业应用前景。     

金属离子对青霉葡萄糖氧化酶的效应研究

研究了几种金属离子对青霉(Penicillium amagasakiense)葡萄糖氧化酶(简称GOD,EC.1.1.3.4)活力的影响.金属离子对酶活力的影响表明:Na+、K+、Ca2+、Pb2+、Mn2+等对酶活力基本没有影响;Al3+、Zn2+对酶有一定的激活作用;Ag+、Hg2+、Mg2+、Cd2+、Cu2+、Co2+等对该酶活力有不同程度的抑制作用.其中Ag+、Cu2+、Hg2+对酶的抑制作用较强,随着抑制剂浓度增大,酶活力呈指数下降,导致酶活力下降50%的抑制浓度为0.08、10.0 和31.25 μmol/L.进一步研究了Ag+的抑制动力学,结果显示:Ag+对酶的抑制作用为竞争性可逆抑制,抑制常数(KI)为0.065 μmol/L.该研究对青霉葡萄糖氧化酶的应用具有一定的参考价值.