微量热法研究酪氨酸酶催化氧化反应

在恒温条件下从嗜麦芽假单胞菌中获得酪氨酸酶,利用微量热法测定了酪氨酸酶催化氧化酪氨酸反应的动力学性质,并得出该反应符合Michaelis-Menten动力学的结论.该方法不需要将酶提纯,可以原位测定酶的活性.     

硫代硫酸钠对酪氨酸酶的抑制作用

酪氨酸酶是生物形成黑色素的关键酶,该酶抑制剂在果蔬防褐和色素沉着性疾病方面具有重要的应用前景.对酪氨酸酶抑制剂筛选时,发现硫代硫酸钠对酪氨酸酶有明显抑制作用.用酶动力学方法研究硫代硫酸钠对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活力的抑制效应,结果表明:硫代硫酸钠对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶均有抑制作用;对单酚酶表现为降低酶稳定态活性,延长酶促反应迟滞时间;对二酚酶活力的抑制表现为浓度依赖关系,其抑制酪氨酸酶活力下降50%的抑制浓度(IC50)为8.80mmol/L.动力学分析表明:硫代硫酸钠对酪氨酸酶的抑制作用为可逆非竞争性抑制,抑制常数为5.674mmol/L.     

L-半胱氨酸对酪氨酸酶的抑制酪氨酸酶催化动力学

L-半胱氨酸对酪氨酸酶活性有抑制作用,随着L-半胱氨酸浓度的增加而酶活不断受到抑制,并且延滞时间也相应延长。相对稳态酶活力则随着L-半胱氨酸浓度的增大而下降。同时,对酪氨酸酶催化反应的影响及作用动力学机理进行了研究,分析延滞时间产生的根本原因,提出了酪氨酸酶的单酚酶将醌转化为多巴黑色素的非酶反应偶联的反应机理,研究其对酪氨酸酶催化反应的影响及作用动力学机理,为酪氨酸酶抑制剂的设计提供分子模板。     

谷胱甘肽、甘露醇对酪氨酸酶的抑制和对O_2~自由基的清除作用

研究酪氨酸酶促反应的抑制对探讨皮肤色素沉着的消失具有临床意义。我们采用光度法和Stemartand Bewley报道的氮兰四唑光还原反应分别对谷胱甘肽、甘露醇对该酶的抑制类型以及对O_2~自由基清除作用进行了研究。试验结果表明:谷胱甘肽、甘露醇对酪氨酸酶的抑制动力学上均属不可逆抑制类型。两种药物对O_2~自由基均有明显地清除作用。这对探讨酪氨酸酶的抑制机理提供了信息。     

酪氨酸酶催化氧化羟基吡啶类化合物的反应研究

研究酪氨酸酶催化 2 3_二羟基吡啶氧化反应条件 ,结果表明该催化反应的最适pH值为 8 5 ,最适温度是 4 5℃ ,Km 值为 0 32 2mmol L ,并发现当酶量较低时 ,该催化反应存在一个延迟期。研究还表明酪氨酸酶不能催化 2_羟基吡啶和 4_羟基吡啶的氧化反应。根据实验结果 ,探讨了酪氨酸酶催化 2 3_二羟基吡啶氧化反应的机制。     

用Asmus法测K_m值

在酶的动力学研究中,K_m能看作为表观电离常数,它在生物化学中是用米氏方程测定,只要酶和底物结合生成一个有色中间络合物,则K_m能用Asmus法测定,本文在酪氨酸酶催化多巴的反应中,用Asmus法计算K_m值,其结果与米氏方程式相一致。     

用Asmus法测K_m值

在酶的动力学研究中,K_m能看作为表观电离常数,它在生物化学中是用米氏方程测定,只要酶和底物结合生成一个有色中间络合物,则K_m能用Asmus法测定,本文在酪氨酸酶催化多巴的反应中,用Asmus法计算K_m值,其结果与米氏方程式相一致.     

电聚吡咯固定化酪氨酸酶电极的制备及性能

用恒电位法在电化学聚合吡咯的同时，将酪氨酸酶固定在导电聚吡咯膜内，制成一种灵敏、稳定的酪氨酸酶电极。讨论了溶液ｐ Ｈ 值和聚合电位对酶固定化的影响，对酶分子嵌入前后吡咯膜的 Ｓ Ｅ Ｍ 图和 Ｃ Ｖ 曲线进行了分析和比较。该电极响应对甲苯酚的线性范围为５ ．０ ×１０ － ８ ～１ ．０ ×１０ － ６ ｍｏｌ· Ｌ－ １ ，最适ｐ Ｈ 值为６ ．６ ，酶反应表观上遵循 Ｍｉｃｈａｅｌｉｓ＿ Ｍｅｎｔｅｎ 动力学，表观米氏常数为２ ．２ ×１０ － ５ ｍｏｌ· Ｌ－ １ 。     

苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶活力的抑制作用

酪氨酸酶(EC 1.14. 18.1)是生物黑色索形成的关键酶.该酶抑制剂在果蔬防褐变保鲜中具有重要的应用前景.在筛选酪氨酸酶活力抑制剂过程中,发现苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶活力有明显的抑制作用,对蘑菇防止褐变具有较好的保鲜效果.报道了苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶单酚酶活力和二酚酶活力的影响和抑制作用.结果表明,苯丙酸对蘑菇酪氨酸酶的单酚酶的效应不仅降低了酶促反应的稳定态活性,也延长了酶促反应的迟滞时间,并具有浓度依赖关系.当苯丙酸浓度达10.0 mmol/L时,稳定态活力下降2/3,迟滞时间从100 s延长到140 s;苯丙酸对二酚酶活力的抑制也显爪浓度效应,抑制效果更为显著,引起酶活力下降50％的抑制剂浓度(IC50)为2.05 mmol/L,苯丙酸对二酚酶活力的抑制显示可逆的效应,抑制类型为混合型,抑制常数(KI和KIS)分别为1.570和3.070 mmol/L.     

甘醇酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

在蘑菇酪氨酸酶抑制剂的筛选实验中,发现甘醇酸对蘑菇酪氨酸酶有明显的抑制作用,可以导致酪氨酸酶的单酚酶活力和二酚酶活力下降,实验结果表明,甘醇酸抑制蘑菇酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为29.74和1.80 mmol/L.对单酚酶活力的迟滞时间也有明显的延迟效应,30 mmol/L的甘醇酸可以使迟滞时间延长了250%.甘醇酸对二酚酶的抑制作用是可逆过程,抑制类型为混合型.通过动力学分析,测得甘醇酸对游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)的抑制常数分别为0.72和5.05 mmol/L,通过研究甘醇酸对酪氨酸酶的抑制作用机理,为进一步研究设计新型酪氨酸酶抑制剂奠定基础.     

葛根总黄酮振荡行为的微量量热法研究

采用微量量热法对中药活性成分葛根总黄酮振荡体系进行了研究，测定了葛根总黄酮在不同浓度、不同温度下的振荡体系的热功率-时间曲线，得到了它的诱导期、振荡周期，根据动力学理论计算了它的反应级数和表观活化能，并建立了诱导期、振荡周期与浓度和表观活化能之间的非线性关系式．     

Cr~(3 )水解聚合作用的热动力学研究

对较高浓度下 3价铬离子水解聚合作用的热谱曲线进行热动力学分析 ,用特征热谱参量 ,求出了这一连串反应的速率常数和活化平衡常数及活化自由能 .     

ZnL2C12的晶体结构和生成反应焓变

在无水乙醇中，制备了ZnCl2与3，5-二甲基吡唑（L）反应的配合物，确定其组成为ZnL2C12．单晶结构分析表明，配给物中，Zn^2＋分别与2分子L中的2个N配位，同时与2个Cl配位，总配位数为4．晶体属于单斜晶系，空间点群为C2／c，α=15．040nm（16），6-8．286nm（10），c=23．890nm（3），β=95．592（2）°，Z=8．微量热法测得298．15K下ZnCl2与3，5-二甲基吡唑在无水乙醇中的溶解焓及配合物液相生成反应焓变分别为（7．397±0．011），（-33．102±0．010），（6．756±0．005）kJ／mol，并求得固相生成反应的焓变．可为对该类配合物的深入研究提供参考．     

漆酶与各种类型底物反应性能的微量热法研究

在厌氧条件下，用ＬＫＢ－２１０７Ｂａｔｃｈ微量热系统研究了在２９８．１５Ｋ０．１ｍｏｌ／Ｌ磷酸盐缓冲溶液（ｐＨ７．４）中漆树漆酶与５种底物的反应，测定了各反应的反应焓变△Ｈｍ米氏常数Ｋｍ，酶底复合过程的吉布斯自由能△Ｇ０复合物中电子转移速率常数ｋ２，以及漆病对各种底物的催化活性ＥＡ．讨论了相同的实验条件下，各种酶底复合物的稳定性，底物官能团及其位置对酶反应中的电子转移速率和非酶反应中自由基聚合形式     

体外培养肿瘤细胞生长的微量量热法研究

应用 2 2 77热活性检测仪测定了MKN 4 5细胞和SMMC 772 1细胞的热功率 时间曲线 ,通过观测化疗药物卡铂对曲线的影响 ,进一步研究了该药物对癌细胞增殖的抑制作用 .本实验所用的微量热测定的方法对于癌细胞生物学的研究有重要意义     

线粒体热化学研究Ⅴ.鳙鱼肝脏线粒体代谢热动力学

用微量热法研究了不同温度下鳙鱼肝脏线粒体代谢的产热曲线,建立了热动力学方程,得到了线粒体在活性增长期的增长速率常数ｋ,平均比增长速率ｋ／ｍ等．实验结果表明,同一动物的同一器官线粒体,其不同温度下的产热曲线的形状相同,反映了线粒体的固有特征;不同温度下线粒体代谢各阶段的时间不同,其单位线粒体产热量亦不同     

Studies on the reaction between Laccase ando-methoxyphenol by microcalorimetry

The reaction between Laccase ando-methoxyphenol have been studied by LKB-2107 batch microcalorimetry system. Thermodynamic parameters Δ _r H _m , ΔG _o , ΔG _T ^≠ and kinetic parameters (K _m ,k ₂) have been determined. The process of the reaction has been analyzed from changes in energy by using the transition state theory. Two methods for enhancing catalytic power of Laccase are proposed. The results shown that formation of an enzyme-substrate complex is “anticatalytic”. The enter and sole source of catalytic power is the stabilization of transition state; reactant-state interactions are by nature inhibitory and only waste catalytic power. Supported by the National Natural Science Foundation of China Wang Tianzhi: born in 1968. Ph D     

Molecular self-assembly behavior of mono[6-O-6-(4-carboxyl-phenyl)]-β-CD in solution and solid state

A novel modified cyclodextrin, mono[6-O-6-(4-carboxyl-phenyl)]-]-β-CD (1), has been synthesized by the reaction of mono[6-(p-toluenesulfonyl)]-β-CD with 4-hydroxybenzoate, and its molecular self-assembly behavior in both solution and solid state was studied by means of crystallography, NMR spectroscopy and microcalorimetry. The results indicate that the bezoic acid groups are successively penetrated intermolecularly into the adjacent β-CD cavities to form helical columnar supramolecules in the solid state. As compared with crystal, the similar self-assembly behavior of 1 in aqueous solution has also been confirmed by the ^1H ROESY spectroscopy. Thermodynamically, the formation of polymeric supramolecules by modified CD in aqueous solution is mainly driven by entropy changes.     

Kinetic investigation of <Emphasis Type="Italic">in situ</Emphasis> growth of CdMoO<Subscript>4</Subscript> nano-octahedra

CdMoO₄ nano-octahedra were grown in situ at room temperature by reverse-microemulsion. Energy evolution from this growth process was monitored using microcalorimetry. The microcalorimetric heat flow (MCHF) curve showed a characteristic endothermic peak for the initial reaction, and double discontinuous exothermic peaks for the subsequent crystal growth. Combined with complementary characterization techniques, the evolution of morphology and size of the CdMoO₄ nano-octahedra were correlated with the MCHF peaks. Calculations based on the microcalorimetric results at 298.15 K provided rate constants of 7.56×10⁻⁵ s⁻¹ for the reaction and nucleation process and 1.59×10⁻⁴ s⁻¹ for the crystallization process.     

立方体纳米Cu2O规定热力学函数的粒度效应研究

纳米材料的规定热力学函数是纳米材料本征性质,而粒径是其规定热力学函数值的重要影响因素之一.因此研究纳米材料的规定热力学函数的粒度效应对于指导预测纳米材料的规定热力学函数具有重要的科学意义.采用液相法合成了4种粒度在40～120 nm的立方体纳米Cu2O作为模型材料.利用原位微热量技术获取了Cu2O与HNO3反应过程的热力学参数,结合热化学循环热动力学原理及过渡态理论,计算得到不同粒径的纳米Cu2O的规定热力学函数,并讨论了粒度对标准摩尔生成焓、标准摩尔熵和标准摩尔生成吉布斯能的影响.结果表明：随着粒径的减小,标准摩尔生成吉布斯自由能、标准摩尔生成焓和标准摩尔熵均增大.