青藏高原地区小麦附生乳酸菌多样性的初步研究

收集青藏高原不同地点的13份样品,通过乳酸菌的生理生化特征结合16S rRNA基因序列分析和rec A基因分析的方法,对分离到的乳酸菌进行基因分型和菌种鉴定.结果表明,小麦样品中分离的乳酸菌被归为6个属,分别为Lactobacillus、Lactococcus、Streptococcus、Leuconostoc、Pediococcus和Enterococcus;9个种或亚种,即Lb.plantarum(0.017%)、L.garvieae(29.74%)、S.pseudopneumoniae(0.08%)、Ln.mesenteroides subsp.mesenteroides(14.08%)、Ln.lactis(0.008%)、Ln.holzapfelii(52.48%)、P.pentosaceus(3.49%)、E.gallinarum(0.003%)和E.mundtii(0.069%).无论是茎叶还是根系土壤中,都存在数量极多的大肠杆菌和好氧性细菌,大部分小麦样品中都存在数量可观的酵母菌和芽孢杆菌,少数样品中有少量梭菌属存在,而对乳酸菌的分离鉴定则表明青藏地区小麦样品附着乳酸菌类群多样,且大部分附生于小麦茎叶组织,从根系土壤中分离到的乳酸菌数量和类型相对较少.分离的乳酸菌中球型乳酸菌占绝大多数,最多的为Ln.holzapfelii.     

产酸菌的分离纯化

着重研究粮食酒发酵中4类产酸菌的分离 ,其中己酸菌与丁酸菌同属梭状芽孢杆菌 ,为厌氧菌 ,醋酸菌为好氧菌 ,乳酸菌则微好氧 ,因此各自有不同的分离鉴定方法 ,其中己酸菌与丁酸菌分离方法相似 ,丁酸菌与乳酸菌的性能鉴定方法相似 ,其他则各有特色     

乳酸发酵饮料的研究

该文主要进行了乳酸菌的分离筛选发酵实验，乳酸菌饮料小试生产，选择了最佳发酵条件，有一定的应用价值。     

红茶菌的制备及其主要菌种的初步分离

以糖、茶、水为原料，经醋酸菌、酵母菌和乳酸菌等多种微生物共同发酵制成了红茶菌营养保健饮品；利用制备选择培养基进行直接分离的方法，对其中的醋酸菌、酵母菌和乳酸菌等主要菌种进行了初步分离。     

一株乳酸菌培养条件优化及菌种鉴定

针对取自某工厂的一株未知乳酸菌种进行菌株的培养条件优化及菌种鉴定.以乳酸菌在不同固体培养基中的菌落数、菌落大小及溶钙圈大小为检测指标确定乳酸菌分离培养基为最优乳酸菌固体培养基.在此基础上,对其固体和半固体形式中的生长情况进行比较,发现半固体培养较固体培养更适于乳酸菌生长.通过对乳酸菌生长曲线、pH-t曲线的绘制,了解了此种乳酸菌的生长特性.通过菌落形态观察以及生化鉴定实验.如:吲哚试验、接触酶试验、运动性检测、糖发酵试验等鉴定出此种乳酸菌为德氏乳杆菌保加利亚亚种.     

保加利亚乳杆菌和嗜热链球菌在羊奶中的发酵特性研究

对从商业乳酸菌发酵剂分离纯化的8株乳酸菌在羊奶中的发酵特性进行了研究,结果表明:L.b-300和L.b-800菌株的产酸能力较强,S.t-499菌株的产黏能力较强,L.b-300和S.t-800菌株的产香能力较强,8株乳酸菌的后酸化能力均较弱.L.b-300和S.t-499菌株是适合发酵羊奶酸奶的乳酸菌.     

产γ-氨基丁酸乳酸菌的筛选

从多种酸菜水中分离筛选出乳酸菌,利用乳酸菌将谷氨酸转化为GABA的脱羧作用,通过混合酸碱指示剂颜色变化,直观判断谷氨酸脱羧酶（GAD）活性,进而筛选出产GABA乳酸菌菌株BL2,并对其进行初步鉴定;同时,采用纸层析法进行定性分析,确定菌株BL2可将谷氨酸钠转化生成GABA.     

酸奶中嗜热链球菌的分离及鉴定

对黑龙江省牡丹江市"三道"牌酸奶的乳酸菌进行了分离,分离培养基BCG牛乳培养基.分离得纯菌,革兰氏阳性,链球状排列,能发酵葡萄糖产乳酸,确定其为嗜热乳酸链球菌.     

正交法厌氧优化分离乳酸菌及凝固型酸奶的研制

初步建立一种较简单而有效从市售酸奶中分离乳酸菌来发酵酸奶的分离方法，采用MRS乳酸菌选择性培养基培养．经革兰染色、葡萄糖产酸、接触酶和石蕊牛奶试验分离鉴定出乳酸菌．以正交法优化厌氧培养采用L9（3^3）正交试验，得出最佳葡萄糖、蔗糖和维生素B2组合的改良MRS配方（葡萄糖8％，蔗糖1．5％，维生素B20．005％），并用来活化、扩大培养菌种，发酵凝固型酸奶．     

牦牛源产细菌素的乳酸菌的筛选鉴定

为筛选优良的产细菌素乳酸菌,用含0.5%碳酸钙的MRS固体培养基从19份牦牛粪便样本中分离出91株乳酸菌,进一步采用牛津杯法筛选产细菌素的乳酸菌,并结合16S rRNA序列扩增测序鉴定该批乳酸菌.结果表明:在排除有机酸、过氧化氢等抑菌因素后,从91株乳酸菌中筛选到9株对大肠杆菌ATCC25922和金葡球菌ATCC25923有明显抑制作用的乳酸菌菌株,该9株菌株对蛋白酶敏感,初步认定为产细菌素乳酸菌;经16S rRNA序列扩增测序鉴定该9株菌分别为海氏肠球菌,屎肠球菌,蒙氏肠球菌株和植物乳杆菌,其对常见抗生素不耐药,可作为益生菌的候选菌株.     

酸适应乳酸菌的筛选及其酸适应条件的研究

对24株包括双歧杆菌、植物乳杆菌、乳酸乳球菌和保加利亚乳杆菌在内的4类乳酸菌酸耐受力进行评价,结果发现除4株保加利亚乳杆菌有较强的酸耐受力外,其余20株均为酸敏感菌株。将这20株酸敏感菌株酸适应（pH 4.5,1h）后,有13株菌的酸耐受力得到提高。其中,乳酸乳球菌KLDS4.0312酸适应能力最强,酸适应后其酸耐受力可提高7542倍。确定了乳酸乳球菌KLDS4.0312最佳酸适应条件为pH 4.5,30min,且稳定期的菌体酸适应后,酸耐受力仅能提高27倍,酸适应能力明显低于对数期菌体。     

葡萄全汁乳酸发酵菌株筛选及其风味分析

为葡萄全汁乳酸发酵饮料研制提供优良菌株资源.以"桂葡1号"葡萄果汁为原料,以耐酸性及风味评价为指标,筛选葡萄果汁乳酸发酵的优良菌株,研究优选菌的单菌及复配发酵对果汁风味物质的影响.植物乳杆菌R23及副干酪乳杆菌R37能耐受pH值3.0高酸,其发酵香与葡萄果香协调;两菌复配生长是共生型,其发酵风味比单菌更饱满丰富;乳酸发酵增加了葡萄果汁酸、酮、酯类物质的相对含量,增加了酚类和有机酸的成分数量.植物乳杆菌R23及副干酪乳杆菌R37是葡萄果汁乳酸发酵优良菌株,其复配发酵能赋予葡萄果汁更丰富的发酵风味.     

红茶菌中微生物的分离与初步鉴定

本实验对某红茶菌中的微生物菌种进行了分离,共得到70个菌株,其中酵母菌15株,醋酸菌30株,乳酸菌25株,经过初步鉴定得到6个菌种。分别为酿酒酵母Saccharomyces cere-visiae、粟酒裂殖酵母Schizosaccharomyces pombe、醋化醋杆菌木质亚种Acetobacter xylinum、液化醋杆菌A.liquefaciens、甲醇醋杆菌Acidomonas mnethanolica、乳杆菌Lactobacillus sp。     

三种食物中乳酸菌的亲缘关系及抗氧化活性研究

从鲜牛奶、西红柿和酸菜3种不同来源中分离得到52株乳酸菌,通过进一步实验发现,32株菌具有抗氧化活性.其中乳酸菌的超氧自由基清除力为3.19％～25.24％,羟自由基清除范围为11.00％～83.58％,脂质过氧化物的抑制能力在0.39％～53.70％.利用随机扩增DNA多态性指纹技术对32株菌进行聚类分析,结果表明相同来源的乳酸菌其亲缘关系相近,相似系数在40％以上.本研究表明该3种食物可以提供较好的乳酸菌资源,并具有较好的抗氧化性,有望开发为天然抗氧化剂.     

白酒窖泥中乳酸菌分离鉴定及其发酵产挥发性风味物质比较

从白酒窖泥中分离得到11株乳酸菌,经16S rDNA基因序列同源性分析,鉴定为1株短乳杆菌、1株鼠李糖乳杆菌、2株干酪乳杆菌和7株铅黄肠球菌。 分析了11株菌MRS培养基发酵产乳酸性能,结果表明:乳酸产量与菌群生长呈正相关,鼠李糖乳杆菌L₉、干酪乳杆菌L₁₀与L₁₁发酵液乳酸含量较高,分别为15.74、15.58、14.74g/L。4株代表菌相同条件下发酵高粱培养液产挥发性风味组分,共有物质13种,包含了白酒中重要香气成分:乙酸、己酸、乙酸苯乙酯和苯乙醇,且乙酸、己酸相对含量较高。各菌产可挥发性组分差异明显,相对含量较高的化合物种类为:短乳杆菌L₅产烷烃类化合物(27.91%),铅黄肠球菌L₈产醇类化合物(43.14%),鼠李糖乳杆菌L₉产酯类(7.35%)、酮类(3.61%)和吡嗪类(3.3%)化合物,干酪乳杆菌L₁₁产酸类(27.98%)和芳香类(5.96%)化合物。仅有短乳杆菌L₅产四甲基吡嗪,短乳杆菌L₅和铅黄肠球菌L₈可明显产乙醇,鼠李糖乳杆菌L₉和干酪乳杆菌L₁₁产3-羟基-2-丁酮。这些物质对白酒风味和口感有重要影响。研究显示,窖泥中各种乳酸菌特征不一,对白酒酿造有不同影响。本研究旨在为进一步挖掘白酒酿造功能微生物、拓展乳酸菌的应用提供理论依据。     

宫廷奶酪中优良乳酸菌菌株的分离与鉴定

利用梯度稀释法和划线纯化法对4种宫廷奶酪中的乳酸菌进行初筛,再通过产酸实验和过氧化氢酶实验进行复筛,得到4株乳酸菌。通过形态学特征观察和16S rDNA序列分子鉴定,确定2株为屎肠球菌(MRSA1、MRSB1),2株为乳明串珠菌(MRSA2、MRSD3)。抑菌实验表明乳明串珠菌MRSA2对大肠杆菌、志贺氏菌、沙门氏菌具有良好的抑菌特性；4株菌均有抗氧化活性,菌悬液的DPPH自由基清除能力和羟自由基清除能力均高于无细胞提取物,其中菌株MRSA2菌悬液DPPH自由基和羟自由基清除能力分别高达60.67%和31.86%。研究筛选出的具有良好抑菌特性和抗氧化活性的乳明串珠菌MRSA2在功能性食品研发中具有潜在的应用价值。     

酸乳中乳酸菌的分离及其发酵性能测试

酸乳中的乳酸菌有乳酸杆菌和乳酸球菌两种，本文选用较为简单的培养基，通过调节ｐＨ值对其进行分离。从平皿中挑选溶钙圈较大的杆菌和球菌菌落各２个作为供试菌株，进行发酵性能测试，结果表明：这些菌株均能产酸，活性较高，按比例再组合成酸乳发酵剂，使产酸时间缩短，酸度高。在实际生产中应用此法，可以不断优选高产乳酸菌株。     

泡菜中乳酸菌的分离及其苯乳酸产量研究

从泡菜中分离纯化得到2株乳酸菌LMD和LRA2,均能产乳酸、革兰氏染色阳性、接触酶阴性。经系统发育分析,结合菌落形态、细胞形态、生化反应试验,确定菌株LMD和LRA2为肠膜明串珠菌。菌株LMD和LRA2的苯乳酸产量和苯丙氨酸的添加量与培养时间呈正相关。在含0.16 %苯丙氨酸的MRS液体培养基中,培养72 h,菌株LMD的苯乳酸产量为0.144 7 mg·mL^-1,菌株LRA2的苯乳酸产量为0.158 5 mg·mL^-1。