利用重叠延伸PCR技术扩增长片段DNA

重叠延伸PCR技术是一种通过寡聚核苷酸链之间重叠的部分互相搭桥、互为模板,通过多次PCR扩增,从而获得目的DNA基因片段的方法.该技术可以高效、快捷、经济地扩增长片段DNA,在基因功能研究方面显示出良好的应用前景.综述了重叠延伸PCR技术的原理、特点以及利用该技术构建长片段DNA的方法和注意事项,并对该技术的应用前景进行了展望.     

DNA体外扩增技术——聚合酶链式反应(PCR)

PcR(PolymeraseChainReaction)译为聚合酶链式反应,是近年来发展起来的一种DNA体外扩增技术．具有快速,简便和特异性强的优点,在分子生物学研究方面的应用具有广阔的前景．本文简要介绍了PCR技术的原理,影响因素及其应用．     

滚环DNA扩增的原理、应用和展望

滚环DNA扩增(Rolling circle DNA amplification,RCA)是一种等温信号扩增方法,其线性扩增倍数为10^5,指数化扩增能力大于10^9,产生的扩增产物连接在固相支持物(如玻片、微孔板等)表面的DNA引物或抗体上(适宜作生物芯片研究)。RCA是一种适合在芯片上(on-chip)进行信号扩增的新技术,它既能提供研究分析的敏感性和特异性,又能保持立体分析的多元性。RCA亦是一种痕量的分子检测方法,可用于极其微量的生物大分子和生物标志的检测与研究。,     

不对称PCR扩增检测土壤中的肠道病原菌

主要研究内容为通过对最佳反应总体系、反应时间和反应温度等条件进行探索,建立用不对称PCR扩增技术检测土壤中典型肠道病原菌的实验条件。实验主要目的是通过不对称PCR扩增技术获得大量的单链DNA,为用基因芯片方法检测土壤中的典型肠道病原菌做准备。应用不对称PCR扩增检测技术对样品进行荧光标记后,与寡核苷酸基因芯片进行杂交,可以提高杂交效率。     

环介导等温基因扩增技术在林木病害检测中的应用展望

森林病害主要是由病毒、细菌、真菌和寄生性生物引起的,其中真菌所致病害种类最多,约占森林病害的80%以上。环介导等温基因扩增(LAMP)技术是一种快速高效的DNA扩增方法,具有简单、快捷、特异性强、准确性高等特点,笔者论述了LAMP技术的原理及其在病毒、细菌、真菌和寄生性生物等方面的应用及研究。该技术广泛应用于食品、临床、环境、农业、工业和畜牧业等领域。环介导等温扩增技术为快速分子检测提供了一条新的途径,在林木病害检测领域将会有广阔的应用前景。     

赖解旋酶恒温基因扩增技术的原理、应用和展望

赖解旋酶恒温基因扩增方法(HDA法)是新近发明的一种简便、快速、高效的体外恒温基因扩增技术.该法依靠DNA解旋酶解开双链DNA、单链DNA结合蛋白(SSB)维持单链状态、DNA聚合酶催化靶片段的扩增.研究表明,HDA能扩增微生物基因组DNA、病原菌DNA、质粒DNA和cDNA等,从灵敏性、准确性和可操作性几方面看,该方法具有广阔的实用前景.     

激光捕获显微切割结合低体积扩增技术研究

目的:研究激光捕获显微切割技术联合应用低体积扩增技术,建立一套微量混合样本DNA的检验方法。方法:使用PALM系统切割捕获目标细胞,弹射到低体积扩增玻片的反应位点上,消化细胞,提取DNA,使用Identifiler?试剂盒在1.5μL体系中进行PCR扩增。结果:分别捕获10个口腔上皮细胞、20个精子细胞,成功获得16个完整的STR基因座分型谱带。结论:激光捕获显微切割技术联合应用低体积扩增技术适用于法医学中微量混合样本DNA检验。     

昆虫学研究中同工酶电泳及PCR-RAPD技术的应用

阐述了同工酶电泳技术和随机扩增的多态DNA(RAPD)技术在昆虫学研究中应用的原理、方法和意义,以及我国昆虫学研究中应用该类技术所取得的成果,展望了该技术在我国昆虫学研究特别是诸如半翅目等类群研究中的应用前景.     

野葛特异性PCR检测方法的建立与应用研究

一个物种特有的DNA序列可以开发成能够识别该物种及其加工产品的标记.为寻找野葛(Pueraria lobata)特有的DNA序列,建立野葛特异性PCR检测方法,通过对Gen Bank中野葛基因信息的检索分析,筛选出了同源序列少特异性强的野葛查耳酮合成酶基因作为研究对象.对该基因的特定区域设计引物,建立了野葛特异性定性PCR检测方法.利用该方法对野葛14个不同居群的DNA进行PCR扩增,均能扩增出226 bp的片段.而用相同引物分别对20种其他植物的DNA进行扩增均未出现特异性扩增产物. PCR灵敏度实验结果表明该方法的检测灵敏度达到0.02 ng基因组DNA,对市场上的葛根产品进行检测结果表明该方法可以有效鉴定葛根产品中是否含有野葛成分.该野葛特异性PCR检测方法特异性强、灵敏度高,可用于野葛成分的检测与鉴定.     

一种PCR仪温度校准装置的溯源方法研究

引言 自2020年暴发全球性新冠肺炎疫情以来,针对新型冠状病毒的核酸检测方法和设备——聚合酶链反应分析仪(也称基因扩增仪,以下简称PCR仪)的研究受到了极大的重视,发展迅速.聚合酶链式反应技术(简称PCR技术)出现于20世纪80年代,经过长期的应用、优化和发展,已成为分子生物学领域的一项关键技术.其主要是对链式反应温度...     

基于校园植物害虫的园艺昆虫学实践教学体系构建

园艺昆虫学是园艺专业本科生的专业必修课,这门课的知识掌握对学生从事对口工作非常重要.传统的教学方式及其带来的问题(如新进教师缺乏教学经验、实践知识背景不足、教师重科研轻教学、新生代大学生农事不够熟悉等)导致园艺昆虫学的教学质量不高,学生的实践能力偏弱.针对园艺昆虫学实践教学环节的薄弱之处,利用校园植物害虫,初步建立园艺昆虫学校内实践教学体系(如昆虫分类、昆虫外部形态和内部结构、生活史、害虫预测预报、害虫防治等),为提升园艺学专业人才培养质量奠定了学科基础.     

大头金蝇的生物学及其在法医昆虫学上的应用

大头金蝇Chrysomya megacephala(Fabricuis)是一种重要法医昆虫、媒介昆虫、传粉昆虫和资源昆虫。综述了大头金蝇的生物学、生态学特点,包括大头金蝇在国内外总体分布情况,各虫态形态特征、发育历期和环境因子对其生长发育的影响。重点综述了大头金蝇在法医昆虫学中推断死后间隔时间(Postmortem Interval, PMI)的应用,包括种类鉴定,生长发育中日龄指标的选定。另外,简要回顾了其作为媒介昆虫、传粉昆虫和资源昆虫方面的研究进展。最后对今后的研究提出了建议。     

农业昆虫学课程建设与实验教学改革

农业昆虫学是植物保护专业的主要课程之一。文章结合农业昆虫学精品课程建设,从优化实验课程体系、改进实验教学方法、完善实验考核制度等方面对农业昆虫学实验课程的改革进行了探讨。目的是培养学生的自主创新能力,全面提高学生的综合素质。     

农业昆虫学实验教学改革的探索

农业昆虫学是植物保护专业的一门主干课程,理论与实践结合非常紧密。因此,加强实验教学环节,培养学生动手能力和分析问题、解决问题的能力,是本门课程教学目标。本文在总结农业昆虫学实验教学改革的具体措施和体会的基础上,对如何培养学生的实践能力与综合素质进行剖析。     

普通昆虫学课程建设与实验教学改革

普通昆虫学是植物保护专业的骨干课程.结合普通昆虫学精品课程建设,对实验教学改革进行了探讨,通过改进实验教学方法,加强实习基地和实验标本建设,完善实验考核制度等措施,不但提高了实验教学质量,而且还培养了学生的实际动手能力和学习普通昆虫学的兴趣,取得了较好的实验教学效果.     

中国森林昆虫研究动态

对1985-1991年有关森林昆虫的文献进行统计归类和分析研究，从而揭示我国森林昆虫研究的现状和趋势。     

普通昆虫学多元化实践教学体系的探索与实施

针对普通昆虫学实践教学的现状和问题,对该实践课程的教学体系进行了改革,重点改进教学方式和教学模式,改进成绩考核机制,并使实践教学与科学研究相促进,从而构建普通昆虫学多元化实践教学体系.     

植物保护专业课程教学实习的探索

分析了植物保护专业开设的＂普通昆虫学＂和＂普通植物病理学＂传统教学实习模式的内容和存在的问题,提出了＂病虫害一体联合教学实习模式＂,从内容、时间、方法、考核等方面入手,对如何提高学生动手能力和教学实习效果进行了探索。     

昆虫兴盛不衰的原因再探讨

根据现代昆虫学研究成就 ,就昆虫兴盛和久盛不衰的原因进行了再探讨 .遗传基础的稳定性、可变性 ,环境条件的变化 ,微小的体形 ,运动方式、能力、食性、繁殖 ,变态 ,休眠及生存空间等特点成为其久盛不哀的主要原因     

昆虫行为进化中的熵初探

昆虫的行为进化是昆虫学和进化论研究的重要内容。昆虫行为进化与熵有着密切的关系,昆虫行为进化是遗传物质变异基础上,长期自然选择作用下负熵的不断增加过程。自然选择是对昆虫各种行为的综合的、复杂的选择。