牙鲆IDH-1基因型与溶菌酶活性的相关性研究

采用同工酶水平切片淀粉凝胶电泳及4种组织器官(肝脏、头肾、脾脏、中肾)及黏液溶茵酶琼脂板扩散活性测定法,分析了人工养殖牙鲆IDH-1(IDH基因座位1)基因型与溶菌酶活性的关系.研究表明,牙鲆体表黏液的溶菌酶活性与IDH-1基因型存在很强的相关性,杂合个体的溶菌酶活性显著高于纯合个体,差异极显著(P<0.05).     

利用PCR—RFLP分析eNOS基因exon 7 BanⅡ酶？…

目的：探讨内皮型一氧化氮合酶基因多态性与妊高征的相关性。方法：应用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ技术检测了１２例正常女性的内皮型一氧化氮合酶基因第７外显子。结果：发现１２例正常女性中有４例的基因型是ｅＮＯＳ／ＧＧ,有８例的基因型是ｅＮＯＳ／ＧＴ,未检测到ｅＮＯＳ／ＴＴ型的个体。等位基因Ａ１（ｅＮＯＳ／Ｇ）的频率为６６．７％,等位基因Ａ２（ｅＮＯＳ／Ｔ）的频率为３３．３％。结论：广东女性人群存在内皮型一氧化氮合酶     

PD-1人源化小鼠构建繁殖与基因型鉴定

目的 探讨PD-1人源化小鼠的繁育与基因型鉴定，为进一步研究相关小分子抑制剂的体内药效评价提供动物模型。方法 通过构建PD-1人源化小鼠，获得F1代鼠4只，雌雄交配进行培育繁殖。对每窝仔鼠的数量，存活率等进行记录观察，随后对仔鼠剪尾提取基因组DNA,用PCR法扩增目的基因，然后进行核酸电泳，鉴定基因型。选用F2代纯合型与纯合型雌雄交配，野生型与野生型雌雄交配。结果 鉴定的F2代小鼠有野生型、纯合型和杂合型3种基因型。纯合型与纯合型交配获得F3代仔鼠基因型全部为纯合型。野生型与野生型交配获得F3代仔鼠基因型全部为野生型。结论 成功筛选出PD-1人源化小鼠纯合子基因型，并有效地进行扩群保种，为今后应用该小鼠模型提供实验保障。     

甘肃回汉族人群D1S80位点扩增片段长度多态性研究

报道了对甘肃省108名汉族和72名回族无关个体D1S80位点扩增片段长度多态性的等位基因频率调查分析,已在汉族中发现21个等位基因,71种基因型,基因频率为0．005－0．111,杂合度为82％,个体识别率为0．95,在回族人群中发现22个等位基因,51种基因型,基因频率为0．007－0．153,杂合度为86％,杂合度为86％,个体识别率为0．92,基因频率符合Hardy-Weinberg法则,结果提示甘肃省回族和汉族之间在其等位基因数目及频率分布上均存在显著性差异,进一步的分析还表明甘肃省汉族人属于北方群体,支持了有关中国大陆存在南北两大群体的观点。     

双羔滩羊血红蛋白多态性的研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术分析滩羊双羔系和单羔系血红蛋白（Ｈｂ）多态性的差异．结果表明，Ｈｂ位点鉴别出的两个等位基因ＨｂＡ和ＨｂＢ控制着三种表现型（基因型），其中实验组２８只产双羔家系滩羊的基因型频率比对照组的６２只产单羔家系滩羊的基因型频率ＨｂＡＡ低１．２７％，ＨｂＡＢ低９．５６％，ＨｂＢＢ高１０．８３％，而基因频率实验组比对照组的ＨｂＡ低６％，ＨｂＢ高６％，因而两组的基因型频率和基因频率均有差异．     

遗传规律解题技巧

一、解题方法指导 1．隐性纯合突破法： ①常染色体遗传 显性基因式：A___（包括AA、Aa）隐性基因型：aa 如子代中有隐性个体,由于隐性个体是纯合体（aa）,基因来自父母双方,即亲代基因型中必然都有一个a基因,由此根据亲代的表现型作进一步判断。如A___&#215;A__→aa,则亲本都为杂合体Aa。     

成都麻羊血液生化遗传标记的研究

采用ＰＡＧＥ电泳法对成都麻羊的Ｈｂ、Ａｌｂ、Ｔｆ、Ｐｏ、Ａｍ、Ａｋｐ和Ｅｓ七个基因座的等位基因及ＬＤＨ的谱带与活力进行了检测．研究结果显示,成都麻羊的Ｈｂ基因座表现为单态,Ａｌｂ、Ｔｆ、Ｐｏ、Ａｍ、Ａｋｐ和Ｅｓ六个基因座表现出遗传多态性,得出了它们的基因型频率及基因频率;ＬＤＨ电泳显示５条谱带,其活力顺序为ＬＤＨ１＞ＬＤＨ３＞ＬＤＨ２＞ＬＤＨ５＞ＬＤＨ４．对Ａｌｂ、Ｔｆ、Ｐｏ、Ａｍ和Ｅｓ五个基因座上的基因型分布作适合性检验,发现这五个基因座上的基因型频率分布是平衡的．利用Ｈｂ、Ａｌｂ、Ｔｆ、Ｐｏ、Ａｋｐ、Ａｍ和Ｅｓ七个基因座上等位基因频率资料进行遗传变异分析,发现成都麻羊群体内基因纯合度高,杂合度低,遗传变异小．同时还利用Ｈｂ、Ｔｆ二个基因座上等位基因资料,对成都麻羊与国内其它１１个山羊品种（类型、品系）的亲缘关系进行了聚类分析,得出了聚类树系图．     

超高产杂交粳稻的遗传特征的初步分析

2012年江苏省杂交晚粳区试11份材料的平均亩产为683.24kg,仅甬优杂交组合E240(Z06)在6个试点的平均亩产达到796.1kg的超高产水平,较对照甬优8号增产15.13%.为探索该杂交组合的超高产遗传结构,利用在籼粳有多态性的分布于12条染色体的36对InDel标记检测,发现该组合的籼型基因频率为0.47,属于中间型,其他组合的籼型基因频率都低于0.4,属于粳型或偏粳型.分子标记检测杂交组合Z06在第5和第12染色体的基因型为纯合籼型和杂合型,与其他组合明显不同.广亲和基因的功能标记检测仅发现Z03、Z05和Z06这3个杂交粳稻携带广亲和基因S5n,其中Z05为纯合基因型,Z03和Z06为杂合基因型.该研究表明杂交粳稻超高产组合应该接近一半籼型一半粳型,第5和12染色体片段为籼型基因型,并携带广亲和基因.     

两种杂交群（BALB／c♂×不同♀系）与BALB／c小鼠繁殖性能及单抗腹水产量的比较

对两种杂交群（ＢＡＬＢ／ｃ♂×ＫＭ，ＢＡＬＢ／ｃ♂×ＬＡＣＡ♀）的繁殖能力及制备单抗腹水的产量同ＢＡＬＢ／ｃ近交系进行比较。实验表明，两杂交群的各项繁殖指标均优于ＢＡＬＢ／ｃ，总离乳鼠数分别为ＢＡＬＢ／ｃ的１．９８、２．０７倍，接种人肺炎支原体Ｆ８瘤细胞，ｋＣＦ１（ＢＡＬＢ／ｃ×ＫＭＦ１小鼠）的腹水产量为ＢＡＬＢ／ｃ的２．５倍，效价相同；制备六种单抗腹水ＬＣＦ１（ＢＡＬＢ／ｃ×ＬＡＣＡＦ１）的产量均优于ＢＡＬＢ／ｃ，分别为ＢＡＬＢ／ｃ的１．１７～２．８８倍，除Ｅ１０抗体滴度低外，其它各抗体效价相同或接近于ＢＡＬＢ／Ｃ。     

宁夏回族和汉族人群2个STR位点的遗传多态性分析

选择位于11号和17号染色体上的STR多态位点D11S1986和D17S1293，采用PCR扩增，变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及银染显色方法，对宁夏无血缘关系的133名回族健康个体和98名汉族健康个体进行了遗传多态性分析．宁夏回族人群在2个STR位点上分别检出等位基因16和10个，基因型分别为57和32种，杂合度分别为0．8868和0．8506，多态信息量分别为0．8768和0．8323；在宁夏汉族人群中各检出等位基因11个，基因型分别为30和29种，杂合度分别为0．9818和0．8557，多态信息量分别为0．9815和0．8389，基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡．结果表明，2个STR位点在宁夏回族和汉族人群中具有较高的多态性，是较好的遗传标记，且在这2个位点上宁夏回族和汉族人群存在一定的差异性．     

草莓不同基因型的再生能力比较

为选择再生能力较好的草莓品种并建立基因转化受体系统，本试验对草莓４个栽培品种Ｈ６、哈尼、明晶、长虹１号进行了基因型筛选．结果表明，在这４个品种中，明晶的再生能力最强，长虹１号次之，Ｈ５与哈尼的再生系统则不易建立．明晶、长虹１号的最佳培养基分别为ＭＳ中补加ＢＡ１．５ｍｇ／Ｌ，ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ和ＭＳ中补加ＢＡ１．５ｍｇ／Ｌ、ＩＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ．     

关于615B_6/PBI-beige纯合型裸鼠催产克雷伯氏菌慢性肠炎的研究

在SPF条件饲育的繁育群中,我们发现偶尔有少数6158_6/PBI-beige纯合型裸鼠慢性腹泻。经微生物分离、培养,自4只病鼠粪便中分离出4株占优势的催产克雷伯氏菌。根据Robert koch's原则,用此菌株分别人工感染6158_6/PBI-beige纯合型和杂合型裸鼠、BALB/c-nu纯合型和杂合型等不同免疫缺陷背景的裸鼠,结果仅6158_6/PBI-beige纯合型裸鼠发病,获得疾病模型。并再次自模型鼠粪便中分离到与原始致病菌株特性相同的催产克雷伯氏菌。因此确认催产克雷伯氏菌(Klebsiella oxyfoca)为6158_6/PBI-beige纯合型裸鼠慢性肠炎的条件致病菌。     

果子狸多态性微卫星位点的筛选及特性分析

以采自四川平武县老河沟自然保护区的一份果子狸(Paguma larvata)组织样品为实验材料, 通过FIASCO法构建微卫星文库, 对250个单克隆进行测序分析, 获得147条含微卫星序列的片段, 微卫星单元重复次数大于10的序列共有42条。据此设计引物 42对, 进一步使用21份果子狸样品检测这些引物的扩增能力和扩增序列多态性, 最终得到5个多态性微卫星位点。同时, 对已发表的13个果子狸微卫星位点进行检测, 发现其中5个位点具有多态性。对这10个位点的特性进行分析, 结果显示它们具有较高的多态性(等位基因数为2~11, 观测杂合度为0.286~0.737, 期望杂合度为0.358~0.906); PID和PID-sib值表明, 在约10⁹个没有亲缘关系的个体或10⁴个有亲缘关系的个体中, 可能发现一对基因型相同的个体, 由于果子狸野外局域种群规模远低于这个量级, 这10个微卫星位点可用于果子狸的个体识别。     

辽南地区汉族人群Penta E和Penta D基因座的多态性分析

对辽南地区汉族群体的两个短串联重复(Short tandem repeats STR)基因座等位基因频率进行研究，得到辽南地区汉族群体Penta E和Penta D基因座的群体遗传学数据．EDTA抗凝血采自172名无血缘关系的汉族个体，采用Celex-100法抽提DNA，荧光标记PCR扩增，310型全自动测序仪电泳检测．得到了Penta E和Penta D基因座的等位基因频率，Penta E和Penta D基因座等位基因的杂合度分别为0．8846和0．8078；个人识别率分别为0．9782和0．9326．两个STR基因座具有较高的杂合度和个人识别能力，等位基因分布符合Hardy-Weinberg平衡，是理想的遗传标记，可用于法医学个体识别和亲权鉴定。     

白鹭脱落羽毛的微卫星个体识别研究

利用鹭科鸟类已有微卫星引物进行跨种扩增筛选,获得12对可用于白鹭(Egretta garzetta)的微卫星引物,结合非损伤采集的脱落羽毛样品,在物种分子鉴定和性别分子鉴定的基础上,建立适用于羽毛样品个体识别分析的微卫星基因分型技术体系.在中国沿海的3个白鹭繁殖种群的181样品中,19个羽毛样品由于DNA质量较差未能有效鉴定物种.119个羽毛样品成功地鉴定为白鹭个体,物种鉴定结果可重复率达93.8%.性别鉴定结果可重复率94.1%,119个白鹭羽毛样品当中的28.57%为雄性.基因分型得到各个位点的等位基因数7~22个,观察杂合度和期望杂合度分别为0.623~0.875和0.779~0.918,没有位点偏离哈迪-温伯格平衡,基因分型错误率为1.2%.个体识别分析发现其中的2个样品为相同基因型,为重复采集自同一个体脱落的不同羽毛.本研究结果将为深入研究白鹭种群遗传结构、扩散模式等保护遗传学问题奠定了基础,并且能够为其他鹭科鸟类的脱落羽毛的物种鉴定、性别鉴定、个体识别提供参考.     

CYP2C9 基因多态性对苯妥因体内代谢的影响

研究了CYP2C9基因多态性对苯妥因代谢活性的影响.采用PCR扩增及直接测序的方法检测65名健康受试者CYP2C9基因型.并利用高效液相色谱考察了野生型CYP2C9*1/*1携带者和杂合突变型CYP2C9*1/*3携带者对苯妥英代谢的影响.结果检测到5名健康志愿者携带CYP2C9*3突变型等位基因(1075位碱基A-C),为CYP2C9*1/*3杂合突变型,未检测到CYP2C9*4(1076位碱基T-C)和CYP2C9*5(1080位碱基C-G)突变型等位基因.在受检人群中,未检测纯合突变型等位基因携带者.实验结果表明,CYP2C9基因型与p-HPPH/苯妥因代谢率之间具有显著的相关性.野生基因型携带者的平均代谢率为携带CYP2C9*1/*/*3杂合型等位基因志愿者的2倍以上,且两种基因型携带者间的代谢率具有统计学上的显著性差异.对本次健康受试者的CYP2C9基因型与苯妥因代谢的相关性研究表明,CYP2C9*3突变型等位基因引起酶活性降低,对苯妥因的代谢减慢,与CYP2C9野生型相比具有显著性差异.由于中国人群中CYP2C9*3(1075A-C)的发生频率较高,约为85～10%.因此,当CYP2C9在药物代谢中起主要作用时应检测其CYP2C9*3突变型.     

利用PCR-RFLP分析eNOS基因exon7BanⅡ酶切位点的遗传多态性

目的:探讨内皮型一氧化氮合酶基因多态性与妊高征的相关性.方法:应用PCRRFLP技术检测了12例正常女性的内皮型一氧化氮合酶基因第7外显子.结果:发现12例正常女性中有4例的基因型是eNOS/GG,有8例的基因型是eNOS/GT,未检测到eNOS/TT型的个体.等位基因A1(eNOS/G)的频率为66.7%,等位基因A2(eNOS/T)的频率为33.3%.结论:广东女性人群存在内皮型一氧化氮合酶第7外显子BanⅡ酶切位点遗传多态性.     

斜纹夜蛾NPV多角体基因的克隆和部分测序

本文对ＳＩＮＰＶ基因组作了酶解分析，测得其基因组大小为１４５ｋｂ，并用双酶法确定了ＳＩＮＰＶ基因组的ＨｉｎｄⅢ和ＰｓｔⅠ物理图谱。以含ＡｃＮＰＶ多角体基因的质粒ｐＡＣ－Ⅰ的ＳａｌＩ－Ｃ片段为探针，对ＳＩＮＰＶＤＮＡ酶切片段ｓｏｕｔｈｅｒｎ转印杂交结果，初步判断多角体基因定位于ＰｓｔＩ－Ｂ／Ｃ／Ｄ片段、ＢｇｌⅡ－Ｃ／Ｄ片段、ＢａｍＨＩ－Ｂ／Ｃ片段和ＥｃｏＲＩ－Ａ／Ｂ片段上，且ＳＩＮＰＶ与ＡｃＮＰＶ多角体蛋白基因有６４％的同源性，而以大肠仟菌质粒ｐＵＣ１９为载体对ＳＩＮＰＶ的多角体基因试克隆，得到带有ＢｇｌⅡ－ＰｓｔⅠ双酶切片段的２个克隆子。对这两个杂交阳性克隆子之一的核苷酸序列测定，表明插入片段与ＢｍＮＰＶ多角体基因上游序列亦有一定同源性。     

新疆7个绵羊品种MHC区段微卫星遗传多样性的分析

为分析新疆北疆地区主要绵羊品种的遗传多样性和系统发生关系,利用SSR Hunter软件寻找5个微卫星标记,采用PCR扩增,1%琼脂糖凝胶电泳,对新疆7个品种绵羊群体遗传多样性进行了检测分析,统计了各群体的等位基因组成、平均有效等位基因数和平均基因纯合率,利用等位基因频率计算出各群体的平均遗传杂合度、多态信息含量和群体间的遗传距离。结果显示新疆7个绵羊群体共发现28个等位基因,实验证明在5个微卫星位点的平均多态信息含量为0.5569~0.7335,平均杂合度为0.6208~0.7437,有效等位基因数为2.7118~4.4203,均属于高度多态性位点。聚类分析和主成分分析结果与其起源、育成历史及地理分布基本一致。这5个位点作为与生产性能相关的遗传标记较为理想。     

HLA DQ位点多样性模拟分析及其PCR—RFLP分型

选择２７个识别序列为４ｎｔ的限制性内切酶,通过计算机对最新获得的１９个ＤＱＡ１和３５个ＤＱＢ１等位基因第２外显子中的一段序列进行模拟酶切分析,根据酶切格局数目及各格局所代表的等位基因数的均衡性,确定酶的优先次序,在此基础上进行ＰＣＲ－ＲＦＬＰ模拟分析,确定最佳的酶组合。结果表明,分别采用４个和６个酶的组合,可有效鉴定ＤＱＡ１和ＤＱＢ１等位基因。同时通过比较分析ＤＱＢ１各等位基因核苷酶位点的变异系数