孔雀五彩芋的离体再生与繁殖

以成熟叶片为外植体,建立五彩芋离体再生技术,观察再生植株移栽后的生长表现.结果表明,在含2 mg/L BA和2 mg/L NAA的MS培养基上培养60 d,60%的外植体可以形成愈伤组织;在含2或3 mg/L BA和0. 2 mg/L NAA培养基上,愈伤组织可以100%地分化不定芽,不定芽继代在2 mg/L BA和0. 2 mg/L NAA培养基上,50 d可以增殖6倍以上;在含1或2 mg/L IBA培养基上,所有的芽均可在一个月内生根、形成完整的再生植株.再生植株移栽后成活率高,生长正常,移栽3个月后所形成的所有叶片出现彩斑,彩斑的类型与母株性状一致.     

大豆胚芽尖再生体系的建立

以'西豆3号'等3个大豆品种为材料,以胚芽尖为外植体,研究种子萌发时间、植物生长调节剂对不定芽分化的影响以及生长调节剂对不定芽生根的影响,建立高效再生体系.结果表明种子在1/2MS培养基上萌发24 h后,将胚芽尖接种在BM+5 mg/L BA培养基上培养24 h,然后转入BM+0.4 mg/L BA+0.4 mg/L IBA培养基诱导不定芽,出芽率达64.91%～68.89%;将长3～5 cm的不定芽在BM+0.5 mg/L BA+1.5 mg/L IBA培养基中培养7 d后,转入BM基本培养基中生根,生根率达22.22%～26.32%.     

马齿苋组织培养及植株再生系统的建立

初步建立了马齿苋组织培养及植株再生系统.利用马齿苋的种子进行萌发,分别取子叶、胚轴进行愈伤组织诱导,其最适培养基为MS附加BA0.5～2.0mg/L、2,4 D0.5mg/L,愈伤组织诱导率可达100%.将产生的愈伤组织块转入分化培养基中,诱导不定芽,其最适分化培养基为MS附加BA4mg/L、NAA0.4mg/L,分化率达到95%以上.试管苗在MS附加IBA3mg/L的培养基上,经过15～20d培养,90%生根成苗.     

赤桉叶片的离体培养与植株再生

以无菌苗叶片为外植体进行了赤桉不定芽的诱导及植株再生。结果表明,在MS 0.8 mg/L BA 0.3 mg/L KT 0.05 mg/L NAA的培养基上,丛生芽诱导率为35.4%;附加0.8 mg/L BA 0.05 mg/L TDZ 0.1 mg/L NAA的MS培养基能促进赤桉不定芽的诱导,其诱导率达42.9%;暗培养10 d能促进不定芽的分化。当芽长至2~3 cm时,切下生长健壮的芽并接入生根培养基,生根率达100%,移栽成活率超过80%。     

北美悬铃木的组织培养

从北美一球悬铃木截冠植株上采当年生萌蘖枝条作为起始外植体进行组培试验,当用其茎段作为外植体诱导腋芽时,MS NAA(0.1 mg/L) 6 BA(1.0 mg/L) 蔗糖(30 g/L)为适合的培养基,而在系统研究基本培养基、植物激素等因素对北美一球悬铃木不定芽增殖的影响后发现:以DCR为基本培养基,添加NAA(0.1 mg/L) 6 BA(1.0 mg/L) KT(0.3 mg/L) 蔗糖(30 g/L)可促进北美一球悬铃木不定芽的增殖,产生的不定芽生长情况良好、增殖系数高,是比较适合芽增殖的培养基。生根培养时,笔者在实验中设计了两条生根技术路线:一步法生根,将芽直接接种在含添加物R(150 mg/L)的DCR培养基上;二步生根法,先将芽接种在含添加物R(60 mg/L)的DCR培养基上15 d左右,再转接至DCR基本培养基上。结果表明两条生根培养途径下的生根率均达100%。     

利用薄层细胞培养技术建立所罗门姜黄高效植株再生体系

以所罗门姜黄试管苗为外植体,从其茎基部依次横向切成0.5~0.8 mm的薄层,研究不同激素组合、不同薄层部位和不同培养条件对不定芽诱导的影响.结果表明,从试管苗茎基部所切取的薄层以第1条生根部位所切薄层出芽能力最强;在MS+3 mg/L 6-BA+0.2 mg/L NAA的芽诱导培养基中,光照培养45 d后,一棵试管苗所切薄层中最高可获得15个不定芽.不定芽在1/2 MS+1 g/L活性炭的成苗培养基中长成完整植株.再生植株经过驯化,移栽室外存活率达95%以上.     

耐盐果树滨梅微繁殖体系的建立

首先通过组织培养的方法,建立了耐盐果树滨梅(Prunus maritima)的微繁殖体系.研究发现,对于滨梅的种子萌发,以改良MS(硝酸铵减半)培养基加入0.02%活性炭、6-BA 10 mg/L最为合适,此时种子萌发率可以达到100%,正常苗率达到90%.对于不定芽的诱导,结果表明,当选用子叶作为外植体时,以MS培养基加入TDZ 1.0 mg/L、BA 0.5 mg/L效果最好,不定芽萌发率能达到80%,每个子叶上的发芽数能达到(4.6±0.35)个.当外植体选用一年生的叶片和嫩茎时,在添加了表面活性剂的吐温组,叶片的不定芽诱导率达到53%,嫩茎高达56%,显著高于没有使用表面活性剂的对照组,且嫩茎的萌发率要高于叶片,而叶片诱导不定芽的合适宽度为3~5 mm.对于通过愈伤组织诱导不定芽,实验发现最合适的激素配比是:MS培养加入2,4-D 0.25 mg/L BA 0.5 mg/L NAA 0.25 mg/L ZT 0.5 mg/L,分化率达94%,平均每个愈伤组织可以产生从芽8.4个.实验亦发现GA对不定芽的萌发有抑制效果,而对于再生芽的萌发,GA有显著的促进作用.对于愈伤的诱导,实验发现子叶诱导愈伤组织的能力要高于嫩茎和叶片,在MS培养基 2,4-D 1.0 mg/L BA 0.5 mg/L中,子叶诱导愈伤的频率达83%,其次是嫩茎,达76%,叶片诱导愈伤效果最差,只有23%.对于从愈伤快速再生分化苗,发现在MS培养基 ZT 2.0 mg/L和BA 2.0 mg/L时,对不定芽有最大再生效果,长度可达3.1 cm/20 d.生根实验发现,单独使用NAA,对分化苗生根率、生根数和根长度都有最大效果,分别达93%,3.1/棵,(4.3±0.53)cm.实验还发现,炼苗的适宜温度在23℃,试管苗的茎长和根长都大于3 cm时使用蛭石作为基质,成活率能够达到56%.     

福建山樱花的组织培养及植株再生

以春季萌发的福建山樱花嫩枝为外植体诱导丛生芽。在 1 /4MS +BA1 .0mg/L +IBA0 .0 1mg/L的培养基上 ,其丛生芽诱导率达 87.5 % ;在继代培养中选择MS +BA1 .0mg/L +IBA0 .1mg/L +GA30 .3mg/L或KT1 .0mg/L +NAA0 .1mg/L +GA30 .3mg/L培养基 ,不定芽增殖较快。赤霉素对其不定芽的伸长有明显效果 ,当芽伸长至 3～ 4cm时 ,切下置于生根培养基 1 /2MS +NAA1 .0mg/L +IBA1 .0mg/L +BA0 .75mg/L中 ,生根率达 90 %以上 ,移栽成活率达 95 %。     

北美一球悬铃木高效遗传转化体系的建立

用北美一球悬铃木的叶片作为外植体建立转化体系。结果表明,用快繁所得无菌苗的第1~2叶片在MS 0.5mg/LIBA 1.5mg/LBA 0.5mg/LKT培养基上培养45d均可分化出不定芽,且分化频率达80%以上;再附加200mg/LCef时分化频率达100%。北美一球悬铃木叶盘对Km抗性本底的测试表明,在分化培养基中加20mg/L的Km时就能完全抑制细胞的生长,叶盘缓慢死亡,不定芽的分化完全停止。     

红掌叶片愈伤组织的诱导与植株再生

报道了红掌叶片愈伤组织诱导和植株再生的研究结果 ,试验表明 :诱导愈伤组织频率最高的培养基是MS BA 0 .5mg/L 2 ,4 D 0 .8mg/L ;较适于愈伤组织分化不定芽的基本培养基是N6 ,激素配比以BA 2 .5mg/L 2 ,4 D 0 .1mg/L和ZT 2 .5mg/L 2 ,4 D 0 .1mg/L为好 ;红掌试管苗生根较易 ;使用质量浓度为 0 .5mg/L的NAA ,2 ,4 D和IBA都能很好地诱导不定芽生根 ;富含有机质的疏松表土是理想的移栽基质 ,移栽成活率为 92 .3% .     

麻疯树根高效再生体系的建立及不定芽起源研究

为了克服现有麻疯树快繁技术的不足,分别以麻疯树胚根和子叶外植体诱导的不定根为外植体诱导不定芽.麻疯树子叶不定根诱导的最佳培养方式为:MS+5 mg/L IBA上培养4天,然后转至MS0培养基上生根.诱导生根率和生根数分别达到93.33%和6.54个/外植体.子叶不定根诱导不定芽的最佳培养基是MS+3.0 mg/L 6-BA+3 mg/L IAA,诱导率达到83.33%.麻疯树胚根的最佳不定芽诱导培养基为MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA,分化率达67.80%,平均出芽数为3.25个/外植体.对麻疯树胚根再生的各阶段进行了石蜡切片观察,明确了不定芽起源于根的薄壁细胞层.与现有技术相比,本方法具有周期短、再生效率高的特点.     

红叶李组织培养快繁技术

通过培养红叶李的不同外植体，建立适宜的组织培养条件和快繁技术，为红叶李的组培繁殖提供技术参考。采用MS为基本培养基，添加不同浓度的激素，以茎尖、腋芽、茎段和叶片作为外植体进行培养。结果表明：茎尖和腋芽既能诱导芽的生长又能诱导愈伤组织，且诱导效果较好，而茎段仅能诱导产生愈伤组织，叶片的诱导效果不明显。BA1．0mg／L 2，4-D0．5～2．0mg／L组合的诱导效果最佳，单芽在BA1．0mg／L IBA0．5～2．0mg／L培养基中继代培养都能诱导产生丛芽，诱导率达70％。     

番茄离体培养的形态发生

对番茄下胚轴、子叶、叶柄不同类型外植体离体培养中有关细胞启动、分裂、分化以及器官发生作了细胞组织学观察,结果表明：番茄不同类型外植体在不同样的培养条件下,愈伤组织生长表现明显差异：下胚轴、子叶诱导产生愈伤组织时,细胞启动早,生长快,分裂方式基本为无丝分裂;下胚轴诱导愈伤组织形成时,细胞不规划的无丝分裂少于子叶,故下胚轴离体培养得到正常芽的比例高于子叶;番茄离体培养中不定芽通常发生在愈伤组织的周边区,也可起源于维管组织结节周围,形成层状细胞。不定根则由茎中柱鞘处发生。     

台湾相思的组织培养

以种子萌发无菌苗研究台湾相思的组织培养,结果发现子叶、下胚轴是诱导愈伤组织的理想外植体,最适培养基为MS BA2 2,4-D0.2 3%蔗糖,子叶及下胚轴诱导的愈伤组织在MS BA4 NAA0.2-0.4培养基中的出芽效果较好,子叶直接在MS 4-PU0.5培养基中诱导丛生芽效果最好,出芽率达90%,根诱导培养基为MS IBA2 NAA1,生根率为27.8%。     

萘乙酸和6苄基腺嘌呤对甘薯离体器官发生的影响

以重庆市主载和自育的甘薯优良品种为试材,比较了植物生长调节物质萘乙酸（NAA）和6－苄基嘌呤（BA）对甘薯离体器官发生的影响,试验结果表明：（１）NAA能明显促进不定根和不定芽的分化,当培养中添加1．0mg/LNAA时效果最好,3种外植体不定根、不定芽的分化频率以及根的分化量都达最大值,其中茎段分别为96．2％,65．4％,4．1,（2）BA对苷薯外植体的离体器官发生有一定的影响,高浓度的BA明显抑制外植体不定根和不定芽的分化。（3）茎段为诱导不定根和不定芽的最适外植体。     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

牛樟的组织培养和植株再生

以牛樟侧枝茎段为外植体,建立了牛樟高效离体再生体系,研究取材季节、消毒方式、不同激素配比等因素对茎段再生的影响。结果表明:牛樟外植体采集最佳季节为春夏两季,此时采集的外植体其污染率与褐化率均较低,且出芽快、出芽率高。依次用1 000倍甲基托布津处理10 min、75%酒精消毒30 s和0.1% HgCl₂消毒8～10 min的消毒方式能明显降低牛樟外植体的污染率,且对外植体伤害较小。MS培养基为牛樟生长最适基本培养基,牛樟外植体诱导的最佳培养基为MS + 6-BA(1.0 mg/L)+ IBA(0.1 mg/L),芽诱导率高且芽体粗壮; 丛芽增殖的最佳培养基为MS + 6-BA(1.5 mg/L)+ IBA(0.1 mg/L),丛芽增殖率高且芽体健壮; 生根培养的最佳培养基为1/2MS + ABT(0.2 mg/L)+ IBA(0.05 mg/L)+ 活性炭(0.5 g/L),30 d后生根率可达100%且根系状态较好。     

大叶常绿杜鹃叶片离体培养及不定芽再生

以大叶常绿杜鹃无菌苗的嫩叶为试验起始材料,研究了其离体培养和不定芽再生的过程。结果表明:培养基为MS+ZT(1.0 mg/L)+ NAA(0.1 mg/L)时,大叶常绿杜鹃叶片可直接诱导再生不定芽,诱导率达70%; 也可以通过愈伤组织途径间接诱导出不定芽,愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D(2.0 mg/L)+KT(0.2 mg/L),增殖最佳培养基为MS+ZT(0.5 mg/L)+IBA(0.1 mg/L),愈伤组织分化的最佳培养基为MS+ZT(0.04 mg/L)+NAA(0.01 mg/L); 分化率最高为70%,分化苗数为6～10株; 生根培养基为MS+NAA(0.2 mg/L)+IBA(0.4 mg/L)时,生根率可达90%。腐殖土、黄沙、珍珠岩配比为4:1:1的混合基质较适合常绿杜鹃试管苗的炼苗移栽,成活率为90%。     

芦荟的组织培养

针对芦荟自然繁殖率低下的情况, 探讨了利用组织培养方法解决生产中繁殖的问题.在叶和茎 2 种外植体中,嫩茎的出愈率最高,是理想的快速繁殖材料,较适宜的诱导愈伤组织的激素组合是 BA 2. 0 mg•L^{- 1}+ IBA 0. 2 mg•L^{- 1}, 诱导不定芽的适宜激素组合是 BA 3. 0 mg•L^{- 1}+ NAA 1. 0 mg•L^{- 1}, 而根的诱导则是在1/ 2MS+NAA 1. 0 mg•L^{- 1}+ 庶糖 1. 5%+活性碳 3%培养基上进行.     

高盆樱桃的组培快繁研究

【目的】通过对高盆樱桃外植体灭菌方法的筛选和培养条件的优化,解决高盆樱桃在快速繁殖中存在的丛生芽诱导率低、增殖率低、生根难等问题,为建立高盆樱桃组培快繁体系奠定基础。【方法】以高盆樱桃带芽茎段为外植体,探讨了外植体的灭菌方法、基本培养基类型(MS、1/2 MS和1/4 MS)以及不同外源激素(6-BA、NAA和IBA)对丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根等过程的影响。【结果】高盆樱桃茎段在75%乙醇灭菌20 s,0.1%升汞灭菌300 s时,污染率最低。在MS培养基中添加1.2 mg/L 6-BA和0.1 mg/L IBA时,丛生芽诱导率最高(82.22%)。在MS培养基中同时添加0.8 mg/L 6-BA、0.06 mg/L IBA、0.08 mg/L NAA时丛生芽增殖效果最好,增殖率为7.32。1/2 MS+IBA(0.5 mg/L)培养基有利于生根,生根率达92.22%。【结论】高盆樱桃带芽茎段适宜的灭菌方法为75%酒精处理20 s后,再以0.1%升汞处理300 s; 丛生芽诱导的适宜培养基为MS+6-BA(1.2 mg/L)+IBA(0.1 mg/L); 丛生芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA(0.8 mg/L)+IBA(0.06 mg/L)+NAA(0.08 mg/L); 适宜高盆樱桃生根的培养基为1/2 MS+IBA(0.5 mg/L)。以体积比为1(河沙):1(腐殖质):2(蛭石)的混合基质为移栽基质时,试管苗移栽成活率可达72.2%。该试验结果可为高盆樱桃的规模化生产提供一定的理论基础和技术支撑。