八宝景天茎段的组织培养和快速繁殖①

以八宝景天茎段为外植体,以MS为基本培养基,对八宝景天外植体消毒、不定芽诱导、继代增殖和生根培养基进行筛选试验,建立了八宝景天组织培养快繁技术体系。结果表明:75%C_2H_5OH 30s+0.1%HgCl_2 6min为八宝景天茎段消毒的最佳方法;MS+6-BA 2.0mg/L+NAA 0.1 mg/L为不定芽诱导的最佳培养基;MS+6-BA 3.0mg/L+NAA 0.1mg/L为继代增殖培养的最佳培养基;不定芽诱导生根的最佳培养基为1/2MS+NAA 0.1 mg/L或1/2MS+IBA 0.1 mg/L,生根率达100%。     

非洲茉莉再生体系的建立

以非洲茉莉(Stephanotis floribunda R.Br.)茎尖和带芽茎段为外植体,研究激素对非洲茉莉芽增殖和生根的影响.实验结果表明,非洲茉莉愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA 0.5 mg/L(单位下同)+IAA 0.5,诱导率可达100%.适合愈伤组织分化的最佳培养基为MS+6-BA 1.0+IAA 0.1,分化率可达80%.适合芽增殖的最佳培养基为MS+6-BA 0.5+IBA 0.1,增殖系数为5.9.生根培养基为1/2MS+IBA 0.5+NAA 0.2,生根率可达40%,且根生长健壮.     

高盆樱桃的组培快繁研究

【目的】通过对高盆樱桃外植体灭菌方法的筛选和培养条件的优化,解决高盆樱桃在快速繁殖中存在的丛生芽诱导率低、增殖率低、生根难等问题,为建立高盆樱桃组培快繁体系奠定基础。【方法】以高盆樱桃带芽茎段为外植体,探讨了外植体的灭菌方法、基本培养基类型(MS、1/2 MS和1/4 MS)以及不同外源激素(6-BA、NAA和IBA)对丛生芽诱导、丛生芽增殖、生根等过程的影响。【结果】高盆樱桃茎段在75%乙醇灭菌20 s,0.1%升汞灭菌300 s时,污染率最低。在MS培养基中添加1.2 mg/L 6-BA和0.1 mg/L IBA时,丛生芽诱导率最高(82.22%)。在MS培养基中同时添加0.8 mg/L 6-BA、0.06 mg/L IBA、0.08 mg/L NAA时丛生芽增殖效果最好,增殖率为7.32。1/2 MS+IBA(0.5 mg/L)培养基有利于生根,生根率达92.22%。【结论】高盆樱桃带芽茎段适宜的灭菌方法为75%酒精处理20 s后,再以0.1%升汞处理300 s; 丛生芽诱导的适宜培养基为MS+6-BA(1.2 mg/L)+IBA(0.1 mg/L); 丛生芽增殖的适宜培养基为MS+6-BA(0.8 mg/L)+IBA(0.06 mg/L)+NAA(0.08 mg/L); 适宜高盆樱桃生根的培养基为1/2 MS+IBA(0.5 mg/L)。以体积比为1(河沙):1(腐殖质):2(蛭石)的混合基质为移栽基质时,试管苗移栽成活率可达72.2%。该试验结果可为高盆樱桃的规模化生产提供一定的理论基础和技术支撑。     

珙桐叶片的脱分化和分化诱导研究

研究了以濒危植物珙桐叶片作为外植体诱导愈伤组织及分化再生植株.结果表明:本实验中,诱导愈伤组织的最佳培养基为1/2MS+2.0 mg/L IBA+1.0 mg/L 6-BA;愈伤组织继代的最佳培养基为1/2MS+3.0 mg/L IBA+1.5 mg/L 6-BA最佳分化培养基为MS+2.0mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA+0.2 mg/L GA_3,芽分化率为6.2%;生根最佳培养基为1/2MS+0.4 mg/L IBA,生根率为60%.     

南天竹的离体培养研究

以南天竹茎段为材料,对不同消毒剂、消毒时间和内生菌抑制剂的消毒效果及诱导、增殖和生根培养基进行研究.结果表明:不同消毒剂消毒效果最佳时间为10min;消毒效果排序1g/L HgCl250mL/L NaClO220mL/L NaClO280mL/L NaClO2;适宜的诱导培养基为MS(murashige skoog培养基)+1mg/L 6-BA+0.1mg/L IBA+90mg/L青霉素+1 600mg/L Vc,诱导率达66.67%;MS+0.5mg/L 6-BA+0.05mg/L NAA是最适增殖配方,株高1.67cm,增殖系数2.63;最佳壮苗培养基为MS+0.01mg/L NAA+0.3mg/L 6-BA,株高2.17cm,增殖系数6.27;在微量元素减半的1/2MS+0.2mg/L NAA+0.2mg/L IBA+4g/L活性碳+30g/L蔗糖的液体培养基上生根率可达76.67%.     

蓝靛果忍冬芽体组织培养技术研究

采用随机区组和正交试验设计,对蓝靛果芽体组织培养技术进行了系统研究.结果表明:外植体以冬眠枝条经水培后萌发的嫩枝茎段为最好;最佳消毒方法为0.1%HgCl2消毒6 min;最佳培养基为MS 6-BA(1.0 mg/L) IBA(0.2 mg/L).     

麻疯树根高效再生体系的建立及不定芽起源研究

为了克服现有麻疯树快繁技术的不足,分别以麻疯树胚根和子叶外植体诱导的不定根为外植体诱导不定芽.麻疯树子叶不定根诱导的最佳培养方式为:MS+5 mg/L IBA上培养4天,然后转至MS0培养基上生根.诱导生根率和生根数分别达到93.33%和6.54个/外植体.子叶不定根诱导不定芽的最佳培养基是MS+3.0 mg/L 6-BA+3 mg/L IAA,诱导率达到83.33%.麻疯树胚根的最佳不定芽诱导培养基为MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L IBA,分化率达67.80%,平均出芽数为3.25个/外植体.对麻疯树胚根再生的各阶段进行了石蜡切片观察,明确了不定芽起源于根的薄壁细胞层.与现有技术相比,本方法具有周期短、再生效率高的特点.     

铁线莲'Multi-Blue'体细胞胚诱导和植株再生

以铁线莲品种'Multi-Blue'的茎尖为外植体,1/2MS为基本培养基,进行胚性愈伤组织和体细胞胚的诱导及植株再生条件的选择.结果表明:茎尖外植体在1/2MS+TDZ(1.0mg/L)+NAA(0.5mg/L)+2%蔗糖+0.7%琼脂的固体培养基中培养时可形成淡黄色块状至颗粒状愈伤组织,经继代培养后可逐渐形成胚性愈伤组织;体细胞胚诱导以1/2MS+TDZ(0.2mg/L)+IBA(0.1mg/L)+ABA(0.3mg/L)+CH(0.5g/L)为佳,诱导率可达96%;而适宜的体细胞胚萌发培养基为1/2MS+6-BA(0.2mg/L)+IBA(0.05mg/L).体胚再生植株经驯化后,移栽成活率可达80%以上.     

铁线莲‘Multi Blue’体细胞胚诱导和植株再生

以铁线莲品种‘Multi Blue’的茎尖为外植体,1/2MS为基本培养基,进行胚性愈伤组织和体细胞胚的诱导及植株再生条件的选择。结果表明：茎尖外植体在1/2MS+TDZ(1.0 mg/L)+NAA(0.5 mg/L)+2 %蔗糖+0.7 %琼脂的固体培养基中培养时可形成淡黄色块状至颗粒状愈伤组织,经继代培养后可逐渐形成胚性愈伤组织;体细胞胚诱导以1/2MS+TDZ(0.2 mg/L)+IBA(0.1 mg/L)+ABA(0.3 mg/L)+CH(0.5 g/L)为佳,诱导率可达96 %;而适宜的体细胞胚萌发培养基为1/2MS+6-BA(0.2 mg/L)+IBA(0.05 mg/L)。体胚再生植株经驯化后,移 栽成活率可达80 %以上。     

香果树的快速繁殖

以香果树芽外植体在MS+6-BA 0.5mg/L+IBA 0.5mg/L培养基上进行丛芽诱导和继代培养.丛芽分化率达100%,年繁殖系数为6.3×10~5.将单个芽转移到1/2MS无机盐+MS有机物+IBA 0.5mg/L培养基上,生根率为83.1%,移栽成活率达到90%.     

铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

落叶型冬青雌、雄株茎段的组织培养技术

【目的】建立落叶型冬青(Ilex verticillata L.)雌雄株的组织培养快繁体系。【方法】以落叶型冬青优良雌株和雄株的幼嫩茎段为材料, 通过添加不同浓度的6-BA、IBA、NAA、氯吡苯脲(CPPU)等植物生长调节剂,对外植体消毒时间、诱导培养基、增殖及生根培养基进行了优化。【结果】落叶型冬青雌株、雄株茎段外植体腋芽诱导最好的培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA和MS+0.5 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,诱导率分别为93.3%和83.3%; 雌株和雄株丛芽增殖效果最好的培养基分别是MS+1.0 mg/L CPPU+0.2 mg/L NAA和MS+1.0 mg/L CPPU+0.1 mg/L NAA,增殖系数分别达3.48和1.25; 落叶型冬青在1/2 MS+0.4 mg/L NAA培养基上雌、雄株的生根率分别为26.7%和20.0%; 添加一种促根剂后,雌、雄株的生根率可达66.7%和46.7%。【结论】该组织培养体系特别是雄株组培体系的建立可为落叶型冬青苗木的快速繁殖提供技术支持。     

米邦塔食用仙人掌组培快繁技术研究

探索了米邦塔食用仙人掌组培快繁技术。得出不定芽诱导使用培养基MS＋6-BA3．0mg／L＋NAA0．1mg/L，外植体分化率达77．3％；继代增殖使用培养基MS＋6-BA1mg／L＋KT0．5mg／L＋NAA0．3mg/L，试管苗平均增殖倍数达10.19，结合反复利用原外植体的方法，增殖效率可进一步提高；生根培养基使用1／2 MS＋NAA0．1mg／L＋IBA0．1mg／L，生根率达100％，且根系发育优良；驯化及试管苗入地后，以保湿为主要管理措施，可保证移栽成活率在95％左右。     

741杨离体快繁和叶片再生体系的建立

选用741杨的茎段和生根组培苗叶片为外植体,采用不同浓度组合的BA和NAA对741杨的离体快繁和叶片再生体系进行了研究。结果表明：741杨芽增值的最佳培养基为MS＋6-BA 0．5mg／L＋NAA 0．1mg／L;最佳生根培养基为MS＋IBA 0．3mg／L;741杨叶片不定芽诱导的最佳培养基为MS＋6-BA 1．0mg／L＋NAA 0．1mg/L。试验还研究了不同着生位置的叶片以及叶片在培养基上的放置方式对741杨叶片再生的影响。     

大叶常绿杜鹃叶片离体培养及不定芽再生

以大叶常绿杜鹃无菌苗的嫩叶为试验起始材料,研究了其离体培养和不定芽再生的过程。结果表明:培养基为MS+ZT(1.0 mg/L)+ NAA(0.1 mg/L)时,大叶常绿杜鹃叶片可直接诱导再生不定芽,诱导率达70%; 也可以通过愈伤组织途径间接诱导出不定芽,愈伤组织诱导培养基为MS+2,4-D(2.0 mg/L)+KT(0.2 mg/L),增殖最佳培养基为MS+ZT(0.5 mg/L)+IBA(0.1 mg/L),愈伤组织分化的最佳培养基为MS+ZT(0.04 mg/L)+NAA(0.01 mg/L); 分化率最高为70%,分化苗数为6～10株; 生根培养基为MS+NAA(0.2 mg/L)+IBA(0.4 mg/L)时,生根率可达90%。腐殖土、黄沙、珍珠岩配比为4:1:1的混合基质较适合常绿杜鹃试管苗的炼苗移栽,成活率为90%。     

彩色马蹄莲籽球离体培育技术

为了克服彩色马蹄莲在组培苗移栽过程中重复感染细菌性软腐病的生产难题,提高籽球生成率和品质,选取彩色马蹄莲的休眠芽作为外植体进行瓶内籽球培养试验。结果表明：MS＋6-BA 1.5 mg/L＋NAA0.3 mg/L为芽诱导最佳培养基;MS＋6-BA 1.0 mg/L＋NAA 0.1mg/L为芽增殖最佳培养基;MS培养基上的籽球形成率为100%;MS培养基添加0.4 mg/L磷酸二氢钾可有效的提高籽球直径大小,籽球平均直径可达1.22 cm。试验结果应用于实践中收到了较好的经济效益。     

大叶饲料槐高频再生体系建立及试管苗工厂化生产

通过叶片外植体愈伤组织诱导和直接不定芽再生途径，建立了大叶饲料槐的高频再生系统，采用正交试验筛选出愈伤组织最适诱导培养基为；MS附加0．5mg／L 6-BA和1．0mg／L NAA；愈伤组织分化最适培养基为：MS附加2．0mg／L 6-BA和0．2mg／L NAA。叶片外植体直接分化最适培养基为：MS附加2．0mg／L 6-BA和0．1mg／L NAA；试管苗在1／2MS附加0．2mg／L IBA、0．1mg／L NAA和2g／L AC的培养基上生根率高达100％，移栽成活率达90％，从而实现了大叶饲料槐的工厂化生产．     

耐盐碱刺槐离体再生快繁体系的建立与优化

为提高耐盐碱刺槐的快繁效率,满足沿海及滨海盐碱地区绿化要求,以耐盐碱刺槐无性系"W009"和"W038"为试材,研究不同条件对耐盐碱刺槐试管苗分化和生根的影响.结果表明:两刺槐茎尖初代接种不定芽萌发率均好于茎段,"W009"离体茎尖不定芽萌发的最适培养基为MS+6-BA 0.5 mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1),茎段不定芽萌发的最适培养基为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1mg·L~(-1);而适合"W038"离体茎尖和茎段不定芽萌发的最适培养基则为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1);适合"W009"不定芽增殖的培养基为MS+6-BA 1.0mg·L~(-1)+NAA 0.05mg·L~(-1),"W038"不定芽增殖的培养基为MS+6-BA 2.0mg·L~(-1)+NAA 0.1 mg·L~(-1);"W009"最适生根培养基为:1/2 MS+0.1 mg·L~(-1) IBA+0.2mg·L~(-1) NAA+1.0g·L~(-1)活性炭;"W038"最适生根培养基为:1/2 MS+0.3 mg·L~(-1) IBA+0.2 mg·L~(-1) NAA+1.0g·L~(-1)活性炭.