O型孕妇血清IgG抗体效价与新生儿溶血病和高胆红素血症发生的关系

目的:探讨O型孕妇血型抗体效价与新生儿溶血病和高胆红素血症发生以及蓝光治疗时间关系。方法:根据O型孕妇妊娠20～24周测定的IgG抗A或(和)抗(B)效价,把新生儿分为4组(≤1∶32、1∶64、1∶128、≥1∶256),取脐血进行Coombs实验,游离抗体和抗体释放实验以证实新生儿ABO溶血病,监测新生儿血清胆红素;并采用Fanaroff教授等制定的黄疸干预方案对新生儿进行早期综合治疗。结果:当孕妇血型抗体效价为≤1∶32、1∶64、1∶128和≥1∶256时,各组新生儿ABO溶血病的发生率分别为11 1%、13 5%、22 0%和52 9%;高胆红素血症发生率为33 3%、37 8%、46 0%和76 5%;蓝光照射时间为(7 1±3 8)、(10 9±7 7)、(17 7±9 6)和(37 1±18 7)h。结论:随着孕妇IgG抗体效价增高,新生儿ABO溶血病和高胆发生率升高,需要蓝光干预的时间延长。     

全国11城市的O型血液抗体效价调查研究

为了研究不同地区的O型血液中国人血清中的抗体效价是否有明显的差异和不同地区的抗体效价水平,对11个城市的O型血液抗体效价水平进行了检测。用全自动微板法,对调查的440份O型血抗-A、B抗体的IgM和IgG效价进行统计,表明IgM抗体效价较低,1:16出现的频次最高;IgG抗体效价较高,1:64出现的频次最高。各省市之间的抗体水平没有明显差异。     

母婴ABO血型不合新生儿溶血病的早期诊断74例分析

目的：探讨严重母婴ABO血型不合新生儿溶血症的早期诊断和治疗的可行性。方法：所有孕妇及基配偶于产前检测ABO血型。对于丈夫为A、B或AB型的O型血孕妇、则加测IgG抗A和抗B抗效价;新生儿出生后,留取脐带血进行抗人球蛋白试验、抗体释放试验和血清游离抗体测定。一旦确诊,立即采取光照疗法等,以降低胆红素。结果：46例患者狂后4－6h内确诊,并给予及时干预,无一例发生胆红素脑病。结论：早期诊断和治疗母婴ABO血型不合新生儿溶血病,可避免胆红素脑病发生。     

脊髓灰质炎病毒I型单克隆抗体的制备

目的: 为建立脊灰病毒Sabin株I型特异的单克隆抗体．方法:以Vero细胞增殖病毒并用蔗糖密度梯度离心法纯化后,用病毒免疫SPF级Balb/c小鼠．取小鼠免疫脾淋巴细胞与SP2/0-Ag14骨髓瘤细胞进行细胞融合,通过间接 ELISA 法筛选抗体阳性的杂交瘤细胞,并用有限稀释法克隆化．用细胞培养法制备脊灰病毒单抗,并以中和试验测定单抗效价．结果:获得了8株分泌抗脊灰病毒Sabin株I型单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中1株G8G7能够稳定分泌抗体．间接ELISA 法测得单抗的效价为1∶8,中和试验测得中和抗体的效价为1∶58．结论:G8G7分泌的抗体为抗脊灰病毒Sabin株I型特异的单克隆抗体.     

唾液IgG抗体测定在幽门螺杆菌感染诊断中的价值

目的 :探讨唾液抗幽门螺杆菌(Helicobacterpylori,Hp)IgG测定对Hp感染的诊断价值。方法 :用ELISA法测定67例Hp阳性及20例Hp阴性患者的唾液内抗HpIgG ,并与血清抗体测定结果比较。结果 :唾液抗HpIgG对Hp感染的敏感性为91 1% ,特异性为85 0% ,准确性为89 7 % ,与血清测定结果接近(分别为92 6 % ,90 0%和91 9 %)。结论 :唾液抗Hp抗体测定对Hp感染的诊断有较好的应用价值。     

兔抗小鼠IgG-HRP酶标抗体的制备及应用

制备并纯化小鼠腹水IgG,鉴定IgG纯度;免疫新西兰大白兔制备兔抗小鼠IgG的抗血清并纯化血清IgG;用改良过碘酸钠法制备兔抗小鼠IgG酶标抗体,对其进行鉴定,并与市场上的同类产品对比。结果,纯化的小鼠腹水IgG,其纯度约为80%—90%;免疫新西兰大白兔所制备的抗血清免疫双扩散效价在1：32以上;用改良过碘酸钠法制备酶标兔抗小鼠IgG酶标结合物与市场同类产品相比质量优良,特异性较强,亲和力较好,并在较长时间内效价稳定。结果表明,制备的小鼠IgG抗血清和酶标抗体,适合于小鼠的血清学检测体系的建立。     

杀鲑气单胞菌单克隆抗体的制备及其特性分析

应用杂交瘤单克隆抗体技术制备了6株分泌抗杀鲑气单胞菌杀鲑亚种的单抗细胞株,并对其特性进行分析。结果显示：6株单抗中IgM有3株,IgG1有2株,IgG2a有1株,且抗体效价为1：12800-1：51200,检测灵敏度为1．0×10^5-1．0×10^8cfu·mL^-1。进一步实验证实这些单抗与其他病原菌都无交叉反应。但单抗5C7、7H6与杀日本鲑亚种有交叉反应;单抗8A2与无色亚种存在阳性反应。表明杀鲑气单胞菌亚种之间既有独特的抗原决定簇,又有共同抗原位点。制备的单抗可用于杀鲑气单胞菌的快速诊断和亚种鉴定,为该菌的进一步研究提供必要手段。     

欧洲鳗鲡抗体生成规律的初步研究

用山羊IgG注射欧洲鳗鲡背部肌肉后,采用山羊IgG-琼脂糖亲和层析柱对欧鳗血清免疫球蛋白（IgM）进行分离纯化,并通过SDS-PAGE电泳对纯化后的IgM进行检测,同时制备兔抗欧鳗IgM血清,运用间接ELISA检测正常欧鳗血清（第0天）以及山羊IgG注射欧鳗后第7、14、21、28、35、42天的血清抗体水平,同时利用荧光定量PCR测定了第0天至第28天的欧鳗肾脏、脾脏和鳃中IgM基因表达水平变化.结果表明：纯化后的欧鳗IgM经SDS-PAGE检测含有一条分子质量约68 ku的重链,以及分子质量分别为26 ku和28 ku的两条轻链,获得的兔抗欧鳗IgM血清效价达1/51 200;欧鳗血清抗体水平在第28天达到峰值,脾脏IgM基因表达水平在第14天达到峰值,肾脏和鳃均在第21天达到峰值,血清抗体水平以及三种组织器官IgM基因表达水平的变化规律均为先升高、达到峰值后再降低.     

电位型无标记IgG免疫探针

用戊二醛交联法在铂电极上固定IgG抗体 ,制备了可重复使用的电位型无标记IgG免疫探针 .用两种IgG抗体制备的免疫探针 ,响应时间均小于 6min ;对IgG的测定范围分别为 0 .2 0～ 1.2 0 μg·L- 1 和 0 .2 0～ 0 .90 μg·L- 1 ;相关系数分别为 0 .9984和 0 .9977;检测下限小于 0 .2 0 μg·L- 1 .如以 0 .2 5mol·L- 1 脲为再生液 ,探针可重复使用 8次     

抗迟缓爱德华氏菌单克隆抗体制备及初步鉴定

用灭活迟缓爱德华氏菌菌株AL60306NA1免疫Balb/c小鼠,采用杂交瘤技术制备抗迟缓爱德华氏菌的McAb,获得3株可持续分泌抗迟缓爱德华氏菌McAb的杂交瘤细胞株3A7、4F11和4C9;腹水效价分别达到1.0×10-6、1.0×10-6和1.0×10-5;细胞亚型分别为IgG1、IgG2b、IgM.交叉反应结果...     

天花粉蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞系的制备及鉴定

将小鼠骨髓瘤细胞（SP2／0细胞）与经TCS免疫过的小鼠脾细胞融合，融合后的细胞悬浮于HAT培养液中进行选择性培养，挑选可以分泌TCS单克隆抗体的细胞系，再经克隆化为单克隆细胞系。用间接酶联免疫吸附法检测此细胞系分泌单克隆抗体情况。经细胞融合和2次克隆化后，获得1株可以稳定分泌TCS单克隆抗体杂交瘤细胞系，ELISA检测结果为阳性。获得了可以稳定分泌天花粉蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞系，为TCS鉴定、应用奠定良好的基础。     

电化学酶免疫分析法测定甲胎蛋白

将酶联免疫吸附试验（ELISA）与单扫描示波谱（LSP）相连接，使用直接与酶联板配套的小型三电极系统，建立了测定甲胎蛋白（AFP）的新方法－电化学酶免疫分析法。AFP浓度与极谱峰高在05100ng/mL范围内呈良好线性关系（r=0\9984)，检出限为0．0625ng/mL，比ELISA测得灵敏约一个数量级。测定了36名健康人血清中AFP含量，结果与献报道相符。测定了32例病人血清标本中AFP含量，并将结果与ELISA试验测得值进行比较，经统计学处理，两无显性差异（t=1.291,P>0.05)。     

用修饰方法产生催化抗体

催化抗体和酶具有相似性，它们都可以和特定分子以高特定性及亲核性结合。所不同的是抗体的产生没有局限性，它们可用特定的半抗原产生，这就为设计生物催化剂提供了可能性。其中化学修饰和基因修饰都可用来产生催化抗体。     

云南省野生恒河猴三种病毒血清抗体的初步调查

用酶免疫法（ＥＩＡ）检查了云南省３６０只野生恒河猴的轮状病毒、腺病毒和痘病毒血清抗体,抗体阳性率分别为８６７％,８０８％和１９４％．成年猴上述三种病毒抗体的阳性率明显高于未成年猴．在云南省思茅、文山和临沧地区三种病毒抗体阳性率无明显差异,其中轮状病毒、腺病毒抗体阳性率较高,痘病毒抗体阳性率较低．结果表明：轮状病毒、腺病毒和痘病毒抗体阳性动物在野外广泛存在,抗体阳性动物的分布与年龄有关．在云南省思茅、文山和临沧三个地区,三种病毒的抗体阳性率无差异．     

抗人骨桥蛋白单克隆抗体制备及其特异性研究

利用RT-PCR技术克隆人骨桥蛋白(hOPN)基因,构建OPN原核表达质粒pET-32a(+)-hOPN,转化BL21菌株,经IPTG诱导表达重组人骨桥蛋白(rhOPN).以纯化的rhOPN为免疫原,免疫BABL/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞NS1融合.通过有限稀释法进行克隆和间接ELISA筛选,获得抗人OPN蛋白单克隆抗体杂交瘤细胞株,以ELISA、Western blot对抗体特异性进行鉴定.通过竞争抑制试验对单克隆抗体识别抗原位点进行分析.结果共获得2株抗人OPN单克隆抗体,分别命名为8F1和2B5,亚型测定皆为IgG1.通过细胞侵袭抑制试验检测,2株抗人OPN mAb皆能很好地抑制细胞迁移.本研究成功获得了抗人骨桥蛋白的特异性单克隆抗体,为进一步研究OPN蛋白在自身免疫病和肿瘤中的功能提供了重要的工具.     

用荷瘤裸鼠模型研制抗人肝癌单克隆抗体

1985年Watanabe等报道:用去胸腺载瘤小鼠的脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞SP 2/0融合获得抗结肠癌单克隆抗体之后,利用荷瘤裸鼠模型成功研制抗人肿瘤单抗的报道已相继出现:但所获单抗多为IgM,IgG类的单抗得率不高,本工作采用多次手术大部切除瘤块的方法延长荷瘤裸鼠的成活期,获得一株抗人肝癌IgG类单抗、其研制过程和结果报道如下。     

四种赤潮藻多克隆抗体的制备及特异性分析

为了建立4种赤潮藻（赤潮异弯藻（Heterosigma akashiwo）、海洋褐胞藻（Chattonella,marina）、卵圆褐胞藻（Chattonella ovata）、具齿原甲藻（Prorocenlnmz dentatum））的免疫学检测方法,分别用4种赤潮藻免疫Balb／C小鼠,制备针对4种不同赤潮藻的抗血清,间接ELISA检测其亲和性和特异性．结果显示,4种赤潮藻的抗血清对各自藻体均有良好的亲和力和特异性,交叉反应结果显示,抗血清与同种藻之间有较强的反应而异种赤潮藻之间交又反应较弱．表明单种藻免疫获得的小鼠多克隆抗体可特异性地与相应赤潮藻作用,可用于赤潮藻的免疫学检测分析．     

一种免疫小鼠制备大量多克隆抗体的新方法

研究了一种用纯抗原免疫小鼠,在抗体产生时注射腹水癌细胞,最后取其腹水(含抗体)的多克隆抗体制备方法,免疫1只小鼠共需免疫抗原60～300μg,可获得15～30mL腹水抗体.此法既适合于大分子质量抗原,也适合于小分子质量抗原.用ELISA、免疫印迹、免疫滴定等方法检测抗体效价、特异性、结合力等,均得到满意的结果.此种抗体在-20或-70℃最少能保持稳定1a以上.