幽门螺杆菌培养滤液对 IL- 8 及胃粘膜增殖细胞核抗原表达的影响

目的：研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori，Hp)代谢产物对炎性细胞因子白细胞介素8(interleukin-8，IL-8)表达的影响以及在胃粘膜上皮细胞增殖中的作用。方法：用CagA阳性Hp培养滤液给大鼠灌胃，2周后，采用ELISA法检测鼠血清中的IL-8水平，免疫组织化学SP(stveptavidin／perosidase)法检测胃粘膜增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antign，PCNA)的表达。结果：灌服Hp滤液组与对照组比较，血清IL-8升高，胃粘膜PCNA标记指数阳性率升高，均有显著性意义。结论：CagA阳性Hp培养滤液可促进炎性因子IL-8的表达，促进胃粘膜上皮细胞的增殖，可能促进胃癌的发生。     

幽门螺杆菌粘附素基因的原核表达

目的：构建幽门螺杆菌粘附素（hpaA）基因的原核表达载体，并诱导表达。方法：用PCR扩增hpaA目的基因片段，克隆至pQE-30表达载体中，构建含目的基因的表达质粒pQE-hpaA，转化E．coli DH5α，经IPTG诱导表达蛋白HpaA；Western blot分析其免疫反应性。结果：经测序hpaA基因片段由783bp组成，可编码260氨基酸残基的多肽。经SDS—PAGE分析相对分子量（Mr）约为30000。可溶性表达占全菌的42％以上。Western blot分析能与Hp全菌抗血清反应。结论：成功构建了粘附素hpaA基因的原核表达载体并能高效表达，为研制Hp疫苗提供理论依据。     

大理地区志贺菌的血清型分布及耐药性分析

目的:了解大理地区志贺菌的血清型分布及对12种常用抗生素的耐药性。方法:通过分离培养和鉴定得到68株志贺菌,血清学鉴定其血清型,K-B法检测其对12种抗生素的敏感性。结果:血清学鉴定显示68株志贺菌中福氏志贺菌41株,宋内氏志贺菌25株,鲍氏志贺菌2株。志贺菌对萘啶酸耐药率最高,对复方磺胺甲噁唑和氨苄西林耐药率较高;对头孢曲松和头孢噻肟较敏感,对喹诺酮类显示出不同程度的耐药。结论:大理地区以福氏志贺菌感染为主。在志贺菌治疗中可首选头孢曲松和头孢噻肟。     

两歧双歧杆菌抗福氏痢疾杆菌感染的机制研究

目的：以福氏痢疾杆菌感染大鼠为模型,研究两歧双歧杆菌对福氏痢疾杆菌感染大鼠肿癌坏死因子-α（TNF-α）水平的影响,从而探讨其抗福氏痢疾杆菌感染的机制。方法：先用硫酸链霉素给正常大鼠灌胃,出现菌群失调症状,再通过福氏痢疾杆菌灌胃感染大鼠,使用两歧双歧杆菌液干预治疗福氏痢疾杆菌感染大鼠,检测干预治疗后各组大鼠血及脾中TNF-α的含量。结果：福氏痢疾杆菌感染各组与正常组相比,大鼠体内血及脾中TNF-α的含量均有明显差异;福氏痢疾杆菌感染各组中,未干预组、生理盐水组及双歧杆菌组脾中TNF-α的含量有显著变化。其中,双歧杆菌组的TNF-α水平升高更明显。结论：两歧双歧杆菌对福氏痢疾杆菌感染机体的TNF-α分泌有一定促进作用,是其抗福氏痢疾杆菌感染的可能机制。     

结核分枝杆菌MTB8.1蛋白自诱导发酵研究

目的:初步摸索出一条适合工业化开发、高效的、可溶表达结核分枝杆菌MTB8.1蛋白的发酵工艺。方法:利用菌株pUC18/MTB8.1/DH10B为发酵株,通过对培养基组成和发酵参数进行系统研究,从而获得一全新的发酵工艺。结果:重组结核分枝杆菌MTB8.1蛋白通过本发酵工艺的表达,单位体积发酵液可溶性蛋白的产量大幅提高,每升发酵液纯化得到可溶性蛋白约30 mg左右。结论:初步摸索出一条较好的MTB8.1在大肠埃希菌系统中的可溶性表达的途径,为其工业化生产奠定了理论基础。     

双歧杆菌介导的福氏志贺菌Bb-ipaB疫苗的构建

目的:构建福氏志贺菌重组双歧杆菌Bb-ipaB疫苗。方法:以福氏志贺菌DNA为模板扩增福氏志贺菌ipaB基因,双酶切后克隆到pGEX-1λT质粒上,构建重组质粒pGEX-ipaB,电穿孔法将该质粒转化入Bb,构建福氏志贺菌重组Bb-ipaB疫苗。结果:成功扩增出分子量约为1 711 bp的ipaB基因,双酶切证实基因成功插入pGEX-1λT中,并成功转化入双歧杆菌,构建rBb-ipaB疫苗。结论:成功构建福氏志贺菌重组rBb-ipaB疫苗,为该疫苗的进一步研究奠定了基础。     

幽门螺杆菌培养滤波对IL-8及胃粘膜增殖细胞核抗原表达的影响

目的:研究幽门螺杆菌(Helicobacter pylori,Hp)代谢产物对炎性细胞因子白细胞介素8(interleukin-8,IL-8)表达的影响以及在胃粘膜上皮细胞增殖中的作用。方法:用CagA阳性Hp培养滤液给大鼠灌胃,2周后,采用ELISA法检测鼠血清中的IL-8水平,免疫组织化学SP(streptavidin/perosidase)法检测胃粘膜增殖细胞核抗原(proliferation cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果:灌服Hp滤液组与对照组比较,血清IL-8升高,胃粘膜PCNA标记指数阳性率升高,均有显著性意义。结论:CagA阳性Hp培养滤液可促进炎性因子IL-8的表达,促进胃粘膜上皮细胞的增殖,可能促进胃癌的发生。     

留学生医学微生物学与免疫学实验教学实践

目的:探索留学生医学微生物学与免疫学实验教学的特点和方法.方法:运用全英文对留学生开展实验教学,课后随访并结合相关文献资料进行分析总结.结果:医学微生物学与免疫学是一门重要的医学基础课程,通过课前精心准备、采用灵活多样的教学方法、加强与学生交流和探索有效的考评制度,收到了良好的教学效果.结论:该教学方法适合于留学生医学微生物学与免疫学实验教学的开展.     

VNTR技术用于大理地区结核分枝杆菌基因分型的研究

目的:应用数目可变串联重复序列(VNTR)分子分型技术,对大理地区60株肺结核临床分离株进行分型研究,探讨大理地区菌株DNA多态性及基因型特征。方法:采用VNTR分子分型技术对60株结核分枝杆菌3个VNTR位点进行检测,应用Quantity one软件和BioNumerics 6.6软件进行聚类分析。结果:60株结核分枝杆菌可以分为4个基因群(Ⅰ群、Ⅱ群、Ⅲ群、Ⅳ群),28个基因型。Ⅰ群占15.0%,含有5个基因型,Ⅱ群占31.7%,含有8个基因型,Ⅲ群占40.0%,含有11个基因型,Ⅳ群占13.3%,含有4个基因型。结论:大理地区的结核分枝杆菌存在基因多态性,其主要流行群为Ⅲ群。     

幽门螺杆菌感染慢性胃炎与红细胞免疫功能相关性研究

目的：探讨幽门螺杆菌感染慢性胃炎患者对红细胞免疫功能的影响。方法：采用红细胞C3b受体花环（RBC—C3bRR）百分率试验和免疫复合物花环（RBC—ICR）百分率试验，检测86例Hp阳性慢性胃炎患者、42例Hp阴性慢性胃炎患者以及38例健康志愿者红细胞免疫功能情况。结果：慢性胃炎组RBC—C3bRR％低于正常组（P〈0．01）；RBC—ICR％高于正常对照组（P〈0．05）；Hp阳性慢性胃炎组RBC—C3bRR明显低于Hp阴性组（P〈0．05）。RBC—ICR明显高于Hp阴性组（P（0．05）。结论：慢性胃炎患者红细胞免疫功能低下与Hp感染存在相关性。