翅果油树组织培养染色体制片方法的探讨及其染色体稳定性研究

本实验从解离条件、取材时间、培养时间、预处理药剂与时间等方面探讨了翅果油树愈伤组织染色体观察的制片方法,并在细胞水平上对翅果油树愈伤组织的染色体稳定性进行了研究.得出了翅果油树愈伤组织的最佳制片方法.翅果油树的染色体在组织培养过程中存在着一定程度的变异,且其变异率随继代次数的增加呈上升趋势.但细胞学的变异只能解释少数较极端的无性系变异,更多的无性系变异则有待于从DNA水平和生化水平进一步研究.     

组织培养诱导的玉米F_1杂交种印迹基因的表达变异研究

为了探索玉米印迹基因在组织培养过程中是否产生表达变异,以玉米正反F1杂交种授粉后18d的幼胚为外植体,诱导和继代培养愈伤组织12个月.采用半定量RT-PCR方法,检测了不同继代培养时间(0,3,5,9,12个月)的愈伤组织中玉米10个母本印迹基因(maternally expressed imprinted gene,MEG)和10个父本印迹基因(paternally expressed imprinted gene,PEG)的表达变异.结果表明:4个MEG和5个PEG在愈伤组织中发生了不同程度的基因激活或基因沉默的表达变异;与MEG比较,PEG的表达变异更为明显;在9个月及以上继代时间的愈伤组织中变异增多.玉米印迹基因在组织培养过程中发生变异,暗示印迹基因可能在抗胁迫过程中发挥作用.     

兰州百合继代培养过程中的染色体变异

对兰州百合 (Liliundavidiivar Unicolor(hong)cotton)组培过程中的染色体行为进行了研究 .随着其继代次数的增加 ,愈伤组织细胞染色体数目变异随之增加 .而继代次数对诱导小鳞芽的染色体数目影响不大 ,仅与诱导成芽率成负相关 .同时研究了不同激素配比与染色体数目的变异效应     

植物组织培养中褐化问题的研究

在植物的愈伤组织培养过程中，褐化现象也是常见的问题，尤其是在愈伤组织的继代培养中，褐变现象特别严重。因此，采取有效措施进行褐化控制是银杏组织培养成功的关键。     

福建茶种子胚愈伤组织诱导与增殖

采用植物组织培养技术对其种子胚进行愈伤组织的诱导及其优化培养的研究,结果表明:MS+1.00mg·L-12,4-D+0.05mg·L-1BA的培养基配方能较好的诱导福建茶种子的胚产生愈伤组织;MS+1.00mg·L-1NAA+0.05mg·L-1玉米素的培养基配方最适合福建茶愈伤组织的生长和继代的培养.     

长期培养的红豆草愈伤组织及其分化芽中染色体变异的研究

对长城１号和埃斯基红豆草在组织培养和原生质体培养中形成的愈伤组织及分化的芽进行了细胞学研究．结果表明，在上述材料中均存在染色体数的变异，其变化范围为７～１１２，主要变异类型是以７为基数的整倍性增减，非整倍性变化的较少．染色体数的变异程度与愈伤组织的性质、培养时间的长短、继代培养中激素的累积浓度以及２，４－Ｄ的浓度有着密切的关系．在丧失分化能力的长城１号红豆草愈伤组织中，正常核型的细胞仅占３３％～３５％；有分化能力的埃斯基红豆草愈伤组织中，正常细胞为４１％～５０％；而在分化的芽中正常细胞数均超过５０％．培养时间越长，激素累积浓度越高，染色体的变异程度越大．在短时间内使用高浓度的２，４－Ｄ进行培养，也可以引起较大的变异．另外，还观察到了染色体结构的各种变异和有丝分裂异常     

香果树愈伤组织诱导及抗褐化研究

以珍稀濒危植物香果树的叶片、叶柄、茎段为外植体,进行胚性愈伤组织诱导,并针对愈伤组织继代培养中褐化严重的问题进行抗褐化剂的筛选。实验结果表明,叶柄是香果树愈伤组织诱导的最适外植体,依次用75%酒精处理60 s、0.2%HgCl_2处理15 min灭菌效果最好,并选定了香果树愈伤组织最适诱导培养基和继代培养基。     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和继代培养中抑制褐化的研究

对曼地亚红豆杉茎段和叶片的愈伤组织诱导条件和愈伤组织继代培养条件进行了探讨,同时对愈伤组织继代培养中的褐化问题进行了分析.结果表明:具有较强分生能力的新生茎段和叶片能够得到很高的诱导率,与NAA相比,2,4 D在诱导中作用显著.含有3mg/L2,4 D+0 5mg/LNAA+0 2mg/L6 BA的MS培养基有利于愈伤组织的诱导.在继代培养中,2,4 D比NAA对愈伤组织生长的促进作用显著,6 BA对愈伤组织生长的促进作用极显著.在继代培养中发现在第20天就开始转移继代和提高愈伤组织与培养基接触面的氧气供给能够较好克服褐化.在含有5mg·L-12,4 D5+0 5mg·L-16 BA+1g·L-1AC的B5培养基上,愈伤组织细胞增殖倍数最大,达到4 7,褐化也得到部分控制.     

长期继代小麦培养细胞的染色体结构变异特征

本文对继代培养12．5年的普通小麦济南177愈伤组织染色体的结构变异进行了研究，并与继代时间为1．5－8．6年的进行比较，发现其染色体结构变异的类型发生了改变，除了原有的少数染色体断片和双着丝粒染色体以外，较高频率地出现了近端着丝粒染色体和端着丝粒染色体，分布频率分别为91．11％和84．44％。同工酶和RAPD分析表明，不同继代时期的培养细胞基因的组成和表达存在差异。     

剑麻组织培养诱导产蛋白酶研究

以剑麻株芽或幼叶为外植体,研究了不同培养基、不同培养温度和光照条件下,剑麻愈伤组织的诱导和生长特性．结果证明,Ｎ６培养基诱导剑麻愈伤组织启动最快;ＭＳ、ＬＳ培养基无论对愈伤组织的诱导还是继代培养都具有良好的效果;Ｂ５培养基不适于剑麻组织培养．剑麻愈伤组织诱导和生长最适宜的温度为（２５±２）℃、光照为１２ｈ．剑麻愈伤组织细胞可诱导产生蛋白酶．     

燕麦抗盐愈伤组织变异系的选择

以普通燕麦成熟胚为起始材料,置于附加一定激素配比的ＭＳ培养基上诱导产生愈务组织（经继代培养获大量愈伤组织块）,再转至含有不同盐浓度的筛选培养基上继续培养,结果产生抗盐愈务组织。这些抗盐愈伤组织再经逐级增大的含盐培养基培养后,愈务组织的存活率逐级提高,获得具有一定稳定性的抗盐愈伤组织变异系。     

籼稻9311成熟胚再生体系

建立9311水稻高效再生体系，将有利于人们以9311水稻为受体进行遗传改良及籼型水稻基因功能的研究．报道了9311成熟胚高效再生途径．以9311成熟胚为外植体，设计了5类（N6DP，N6DA，MSDP，MSDA和MSDAP）共13种不同愈伤组织诱导培养基，比较了9311成熟胚在不同培养基中愈伤组织的诱导以及初始愈伤组织被继代后的表现．结果显示：9311成熟胚在添加2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-D）的所有培养基中都能够形成愈伤组织；将最初被诱导的愈伤组织进行继代培养，在前4类培养基上诱导的初始愈伤组织，不论被分别继代于与原培养基成分相同的新鲜培养基上，还是被继代于MSDAP培养基上，继代后的愈伤组织都相继褐化死亡，而将从MSDAP培养基上诱导的初始愈伤组织继代在MSDAP培养基上，愈伤组织很少出现褐化现象，并且能够较快地增殖．由此表明，MSDAP培养基是9311成熟胚合适的愈伤组织诱导培养基和增殖培养基．采用MSDAP培养基培养，9311水稻成熟胚愈伤组织诱导率达87．5％．分化率为46．7％．再生植株的比例为23．3％、     

大花君子兰幼嫩子房培养再生植株的研究

以大花君子兰(Clivia miniata)的幼嫩子房组织为外植体,在附加2mg/LKT和lmg/L2,4-D的MS基本培养基上培养,诱导愈伤组织的频率可达90％以上,诱导出的愈伤组织经同一诱导培养基长期继代培养后可以“一次成苗”。胚性愈伤组织在2～6年的继代培养过程中,其增殖生长与苗的分化同时进行,分化频率随着继代培养的延长而上升,经长期继代培养后,已建立了具有持久高分化潜力的胚性愈伤组织无性系,由无性系不断分化产生的大量再生植株,移栽到盆钵中能够成活,并且生长良好。     

甘草根愈伤组织诱导与可溶性蛋白含量变化

利用胀果甘草无菌苗根作为外植体诱导愈伤组织,经过多次继代培养筛选出4种类型的愈伤组织,并以不同质量浓度的NaCl胁迫处理Ⅰ型愈伤组织.测定了在根愈伤组织诱导过程中,不同类型愈伤组织继代培养中和Ⅰ型愈伤组织在NaCl胁迫处理条件下的生长情况及可溶性蛋白含量的变化情况.结果显示,以苗龄10d的无菌苗根为外植体可以诱导产生愈伤组织,以MS培养基附加1.0mg/L 2,4-D和0.2mg/L6-BA时,根愈伤组织的诱导率最高,继代培养生长状况良好为Ⅰ型愈伤组织;根外植体两端开始形成愈伤组织时可溶性蛋白含量最高,为2.01mg/g;不同培养基上继代培养的根愈伤组织生长状态不同,可溶性蛋白含量也有不同,以Ⅰ型愈伤组织中可溶性蛋白含量最高;Ⅰ型愈伤组织在5g/L NaCl胁迫下,继代培养21d后,愈伤组织生长量明显提升,在14~21d愈伤组织可溶性蛋白含量明显提高.本研究表明甘草愈伤组织对低质量浓度的盐胁迫有一定的适应性,使其可溶性蛋白含量升高,在可溶性蛋白含量剧烈变化期间,愈伤组织生长量明显提高.     

水仙的试管繁殖

水仙鳞茎切块在含BA 1mgl~(-1)和2,4-D C.1mgL~(-1)的MS培养基上诱导出白色致密表面有许多瘤状突起的愈伤组织.愈伤组织可在上述培养基上不断地继代培养.从一个约27mm~3的鳞茎切块开始,在两年(包括小鳞茎的休眠期3—4个月)内,可获得10,000多完整小植株.水仙试管苗根尖细胞的染色体数目和培养亲本的一样,都是2n=3x=30.     

连翘组织培养研究Ⅰ愈伤组织的诱导与培养条件的优化

在MS培养基上附加不同种类和浓度配比的激素,2000lx的光照条件下对连翘植物愈伤组织的继代培养和生长量进行了比较.当2,4-D 3.0mg/L时,愈伤组织诱导率最高,达100%;当2,4-D0.5mg/L,KT0.5mg/L和BA2.0mg/L时最适合继代和细胞生长.结果还表明:单一2,4-D的各种浓度对愈伤组织都有较高的诱导率.不同激素组合对愈伤组织生长量和发生的状况有明显影响.在固体培养基上,愈伤组织的生长周期为28d.为连翘植物细胞悬浮培养建立了基础,为解决连翘植物的资源提供了新途径.     

彩色马蹄莲叶片愈伤组织培养体系的建立

采用彩色马蹄莲（Zantedeschia spp cv Pink Giant）的叶片为外植体,运用正交设计方法,对诱导马蹄莲愈伤组织培养基进行了预试验,并对影响马蹄莲愈伤组织诱导的因素进行了定量分析;在正交试验基础上,设计了14种不同激素种类和配比的配方,进行了诱导愈伤组织体系的建立．对愈伤组织发生过程中形态学和细胞学结构进行了动态观察．结果表明：在MS基本培养基中添加6-BA和2,4-D对以叶片外植体的愈伤诱导率有显著影响;对初代诱导的愈伤组织进行的两次继代培养结果表明,继代和愈伤组织继续发生的最佳培养基为MS附加2,4-D2.0mg／L和BA2,0mg／L．     

向日葵耐盐突变体筛选

以MS为基本培养基,研究了不同激素对康地5号向日葵愈伤组织的诱导效果,筛选出了最佳诱导愈伤组织培养基;以子叶、下胚轴及真叶作为外植体。确定了子叶和下胚轴作为康地5号组织培养的最佳外植体;在含50、100、及150mmol／L NaCl不同盐浓度培养基上分别诱导出向日葵耐盐愈伤组织,继代培养后得到不同耐盐程度的新株系,移栽后得到完整植株．     

桉树组培育苗新技术

全面介绍桉树组织培养试验研究成果。通过筛选出改良Ｈ、Ｂ１、Ｂ２基本培养基，成功地从桉树愈伤组织诱导发生胚性细胞团，分化出根苗齐全、遗传性状稳定、频率很高的胚状体苗，成苗系数高达１０１１；用杂交优势种的芽器官离体培养，不经过愈伤组织途径，避免脱分化过程易引起染色体变异的弊端，以芽繁芽，以苗繁苗成功，年繁殖系数３．５１２，解决了桉树组织培养的一系列技术关键。     

伪东方罂粟愈伤组织细胞核型研究

本文研究了伪东方罂粟（Ｐａｒａｖｅｒｐｓｅｕｄｏｏｒｉｅｎｔａｌｅ）愈伤组织细胞核型的变化特点，结果证明培养初期的愈伤组织细胞经常发生染色体的大量丢失．继代培养两个月的愈伤组织细胞染色体数目变化较大，培养３个月、４个月、５个月以后染色体数目减少到２１条时趋于稳定，经对各个时期细胞的２１条染色体测量分析，证明这些细胞不是真正的单倍性细胞．随着培养时间的延长，染色体的结构变化也越大．在每一个具有２１条染色体的细胞中发现都有一条较长的具中部着丝粒的染色体．