蜜汁葡萄愈伤组织染色体数目变异的初步研究

植物细胞在离体培养过程中,培养物存在着相对遗传稳定性和广泛的变异性,组织培养使培养物发生细胞学变化,导致染色体的畸变。目前已在几十种植物的组织培养中发现了染色体的变异。李少生、张玉珍(1991)对培养在含有不同附加成分的 MS 培养基上的小麦愈伤组织染色体进行了跟踪研究表明,在整个培养过程中,各培养基中的愈伤组织都有一定程度的变异。李国珍、明波(1992)进行了新疆紫草的组织培养,发现随着继代培养代数的增高,染色体变异的种类和频率以及染色体数目显著增加;若继代培养时间较长,染色体数目变异的更广,而且出现了染色体结构的变异。目前关于葡萄愈伤组织染色体的变异情况未见有报道,为此,我们对蜜汁葡萄的茎、叶诱导产生的愈伤组织染色体数目进行了观察,来了解长期继代培养的葡萄愈伤组织染色体变异情况。     

翅果油树组织培养染色体制片方法的探讨及其染色体稳定性研究

本实验从解离条件、取材时间、培养时间、预处理药剂与时间等方面探讨了翅果油树愈伤组织染色体观察的制片方法,并在细胞水平上对翅果油树愈伤组织的染色体稳定性进行了研究.得出了翅果油树愈伤组织的最佳制片方法.翅果油树的染色体在组织培养过程中存在着一定程度的变异,且其变异率随继代次数的增加呈上升趋势.但细胞学的变异只能解释少数较极端的无性系变异,更多的无性系变异则有待于从DNA水平和生化水平进一步研究.     

植物组织培养中褐化问题的研究

在植物的愈伤组织培养过程中，褐化现象也是常见的问题，尤其是在愈伤组织的继代培养中，褐变现象特别严重。因此，采取有效措施进行褐化控制是银杏组织培养成功的关键。     

拟南芥CAM5基因对愈伤组织形成的影响

愈伤组织形成是植物组织培养的重要阶段.钙调素含量在愈伤组织形成过程中发生变化,但钙调素是否参与愈伤组织形成仍不清楚.为此,本文分析了一个钙调素基因CAM5的组织表达模式,结果发现,CAM5基因在拟南芥植株的根、茎、叶、花及幼苗中均有表达.此外,鉴定了拟南芥CAM5基因的纯合突变体CAM5,并观察其叶柄外植体在愈伤组织诱导过程中的表型,结果发现,在愈伤诱导培养基中培养20d,与野生型相比,突变体的叶柄外植体膨大比较明显.进一步分析显示,培养20d后,突变体外植体的鲜重比培养前增加了39倍,而野生型仅增加了16倍.这些结果暗示犆犃犕5基因参与了愈伤组织形成.     

玉米幼胚组织培养及其转化的研究

对6个玉米自交系和15个杂交组合的幼胚在不同培养基中进行了愈伤组织诱导、继代、分化培养,所试材料都能诱导出状态良好的愈伤组织,并在继代培养中生长正常.使用D icam ba和A gNO3能促进和改善愈伤组织的诱导数量和质量,二者对愈伤组织的良好状态和分化能力的保持具有协同效应.在分化培养基中提高蔗糖的浓度和附加细胞分裂素有利于胚状体的形成和苗的分化.杂交组合的愈伤组织生长状态遗传了双亲的特点,正反交试验表明,其特征更接近母本.对自交系Z3和Z31进行基因枪转化,PCR及PCR-Sou thern检测证实外源基因的导入.     

笋玉米原生质体培养及遗传转化的研究

以自花受粉的笋玉米幼胚为外植体建立了胚性细胞悬浮系,酶解游离原生质体通过液体浅层培养得到了再生植株;通过PEG法和电激法对原生质体进行了遗传转化,转化用外源基因是潮霉素抗性基因和BT基因,原生质体再生愈伤组织经潮霉素筛选后,PEG法和电激法获得抗性愈伤组织的频率分别为9 3%和8.9%,Southem-blotting证明外源基因已整合到玉米抗性愈伤组织细胞基因组中,转基因工程植株的分化工作在正在进行中.     

福建茶种子胚愈伤组织诱导与增殖

采用植物组织培养技术对其种子胚进行愈伤组织的诱导及其优化培养的研究,结果表明:MS+1.00mg·L-12,4-D+0.05mg·L-1BA的培养基配方能较好的诱导福建茶种子的胚产生愈伤组织;MS+1.00mg·L-1NAA+0.05mg·L-1玉米素的培养基配方最适合福建茶愈伤组织的生长和继代的培养.     

玉米幼胚的组织培养及其植株再生的研究

以成单１４,１５,１８三种基因型玉米为材料,对幼胚愈伤组织的诱导和继代培养,植株再生,再生苗的培养和移栽等方面进行了系统的研究,三种基因型玉米幼胚经诱导均可产生愈伤组织,但只有成单１５,１８两种基因型玉米幼胚产生的愈伤组织可继代培养下去。     

簇毛麦（Haynaldia Villosa）的原生质体培养

簇毛麦的幼胚在含有９μｍｏｌ／Ｌ２，４－Ｄ的ＭＢ固体培养基上诱导产生愈伤组织，在相同的培养基上继代培养两个月后出现淡黄色的致密瘤状愈伤组织．在继代培养过程中，愈伤组织的分化能力丧失较快．继代培养一年左右，改变培养条件，可得到颗粒状及粉粒状愈伤组织．分别用这两种类型的愈伤组织建立悬浮培养细胞系．愈伤组织的形态结构与悬浮系的建立及原生质体培养密切相关．来源于颗粒悬浮系的细胞团块产生的原生质体分裂后可产生体细胞胚，而用粉粒悬浮系分离的原生质体不能持续分裂．     

利用电击法转化玉米胚性愈伤组织获得GUS基因瞬时表达的研究

作者以成单玉米幼胚经诱导、继代、筛选,获得了可分化的胚性愈伤组织,采用电击转化法,将质粒PBI121导入成单玉米的胚性愈伤组织中,通过组织化学染色法,观察到了GUS基因的瞬时表达,并筛选出对愈伤组织损害轻、GUS表达较强的最适电击条件为：960μF,375V/cm,61ms。     

提高籼稻品种组织培养效果的研究

以培矮64S和盐恢559的成熟胚和未成熟胚为外植体,研究对2个籼稻品种的组织培养效果的影响因素,在诱导培养过程中,2个品种对最适2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）浓度要求不一样,在适宜的2,4=-D浓度的基础上,添加某些外源激素,并不能提高对愈伤组织的诱导效果,在继代过程中,交替借助不同浓度的2,4-D,能明显改善愈伤组织的生长状态,提高愈伤的质量,对不易形成胚性愈伤组织的品种（盐恢559）,在继代过程中加入适量的脱落酸,可明显改善愈伤组织的生长状态,增加胚性愈伤组织的数目,不同糖类试验结果表明：麦芽糖较蔗糖更适宜作为籼稻的碳源,综合考虑成本和效率问题,可将不同的糖类配合使用。     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和继代培养中抑制褐化的研究

对曼地亚红豆杉茎段和叶片的愈伤组织诱导条件和愈伤组织继代培养条件进行了探讨,同时对愈伤组织继代培养中的褐化问题进行了分析.结果表明:具有较强分生能力的新生茎段和叶片能够得到很高的诱导率,与NAA相比,2,4 D在诱导中作用显著.含有3mg/L2,4 D+0 5mg/LNAA+0 2mg/L6 BA的MS培养基有利于愈伤组织的诱导.在继代培养中,2,4 D比NAA对愈伤组织生长的促进作用显著,6 BA对愈伤组织生长的促进作用极显著.在继代培养中发现在第20天就开始转移继代和提高愈伤组织与培养基接触面的氧气供给能够较好克服褐化.在含有5mg·L-12,4 D5+0 5mg·L-16 BA+1g·L-1AC的B5培养基上,愈伤组织细胞增殖倍数最大,达到4 7,褐化也得到部分控制.     

8种基因型的高羊茅的组织培养与植株再生

以8个品种的高羊茅下胚轴为外植体，分别在诱导培养基D1、D3、D5和D9上培养，除D1培养基上的愈伤组织的出愈率为51．3％外，其他诱导培养基上的出愈率均为100％．其中在D5培养基上继代3个月左右，获得了胚性愈伤组织，此胚性愈伤组织在F1分化培养基上的分化率达到70％～80％．在较长时间的继代培养中，D3培养基可以保持愈伤组织的高分化率．     

长期培养的红豆草愈伤组织及其分化芽中染色体变异的研究

对长城１号和埃斯基红豆草在组织培养和原生质体培养中形成的愈伤组织及分化的芽进行了细胞学研究．结果表明，在上述材料中均存在染色体数的变异，其变化范围为７～１１２，主要变异类型是以７为基数的整倍性增减，非整倍性变化的较少．染色体数的变异程度与愈伤组织的性质、培养时间的长短、继代培养中激素的累积浓度以及２，４－Ｄ的浓度有着密切的关系．在丧失分化能力的长城１号红豆草愈伤组织中，正常核型的细胞仅占３３％～３５％；有分化能力的埃斯基红豆草愈伤组织中，正常细胞为４１％～５０％；而在分化的芽中正常细胞数均超过５０％．培养时间越长，激素累积浓度越高，染色体的变异程度越大．在短时间内使用高浓度的２，４－Ｄ进行培养，也可以引起较大的变异．另外，还观察到了染色体结构的各种变异和有丝分裂异常     

甘草根愈伤组织诱导与可溶性蛋白含量变化

利用胀果甘草无菌苗根作为外植体诱导愈伤组织,经过多次继代培养筛选出4种类型的愈伤组织,并以不同质量浓度的NaCl胁迫处理Ⅰ型愈伤组织.测定了在根愈伤组织诱导过程中,不同类型愈伤组织继代培养中和Ⅰ型愈伤组织在NaCl胁迫处理条件下的生长情况及可溶性蛋白含量的变化情况.结果显示,以苗龄10d的无菌苗根为外植体可以诱导产生愈伤组织,以MS培养基附加1.0mg/L 2,4-D和0.2mg/L6-BA时,根愈伤组织的诱导率最高,继代培养生长状况良好为Ⅰ型愈伤组织;根外植体两端开始形成愈伤组织时可溶性蛋白含量最高,为2.01mg/g;不同培养基上继代培养的根愈伤组织生长状态不同,可溶性蛋白含量也有不同,以Ⅰ型愈伤组织中可溶性蛋白含量最高;Ⅰ型愈伤组织在5g/L NaCl胁迫下,继代培养21d后,愈伤组织生长量明显提升,在14~21d愈伤组织可溶性蛋白含量明显提高.本研究表明甘草愈伤组织对低质量浓度的盐胁迫有一定的适应性,使其可溶性蛋白含量升高,在可溶性蛋白含量剧烈变化期间,愈伤组织生长量明显提高.     

长期继代小麦培养细胞的染色体结构变异特征

本文对继代培养12．5年的普通小麦济南177愈伤组织染色体的结构变异进行了研究，并与继代时间为1．5－8．6年的进行比较，发现其染色体结构变异的类型发生了改变，除了原有的少数染色体断片和双着丝粒染色体以外，较高频率地出现了近端着丝粒染色体和端着丝粒染色体，分布频率分别为91．11％和84．44％。同工酶和RAPD分析表明，不同继代时期的培养细胞基因的组成和表达存在差异。     

玉米胚性愈伤组织诱导和植株再生的研究

采用生产上推广的14个基因型的玉米为材料,由幼胚诱导出胚性愈伤组织并再生植株。其中原齐722×5003等单交种在适宜条件下,胚性愈伤组织的诱导率可达90%,愈伤组织分化苗频率高于80%。在加有1ppm 6BA 和0.1%活性碳的改良 N_b 培养基上,分化出的幼苗长成健壮的小植株。接种幼胚的大小和基因型、基本培养基成份及蔗糖浓度、激素种类和浓度等对胚性愈伤组织的诱导、继代和分化幼苗均有明显的影响。另外,将培养7-8天的幼胚抉碎,可显著提高胚性愈伤组织的诱导率,并能使较大的幼胚产生胚性愈伤组织。随着胚性愈伤组织继代次数的增多,再生植株中畸形苗频率也升高     

杂交粳稻3优18胚性悬浮细胞系的建立

杂交粳稻3优18是天津水稻研究所选育的强优粳型杂交新组合，其成熟胚在MS1培养基上诱导形成的初始愈伤组织呈深黄色、瘤状，为非松脆型．初始愈伤组织MS2培养基上经3～4个月继代培养，转变为浅黄色、小颗粒状、松脆型胚性愈伤组织．将胚性愈伤组织置于悬浮培养基中培养，经4个多月可得分散性好、生长快的胚性悬浮细胞系．     

玉米再生植株的性状和染色体变异

继代培养6～8个月的玉米自交系黄早4愈伤组织产生的植株,其形态特征和生长发育出现多种变异。平均株高、叶片数和茎粗低于对照(实生苗).多数植株生育期变短,生殖器官发育异常,结实率低,单株结籽数少.一些植株的株型、叶序或花丝颜色等性状也发生变化.根尖细胞染色体分析表明,再生植株中,二倍体、混倍体和非整倍体的频率分别为84.25％、9.45％和6.36％,有25.2％的植株出现明显的染色体结构变异。     

大花君子兰幼嫩子房培养再生植株的研究

以大花君子兰(Clivia miniata)的幼嫩子房组织为外植体,在附加2mg/LKT和lmg/L2,4-D的MS基本培养基上培养,诱导愈伤组织的频率可达90％以上,诱导出的愈伤组织经同一诱导培养基长期继代培养后可以“一次成苗”。胚性愈伤组织在2～6年的继代培养过程中,其增殖生长与苗的分化同时进行,分化频率随着继代培养的延长而上升,经长期继代培养后,已建立了具有持久高分化潜力的胚性愈伤组织无性系,由无性系不断分化产生的大量再生植株,移栽到盆钵中能够成活,并且生长良好。