超声波辅助酶解制备东海海参胶原蛋白低聚肽及其活性的研究

以东海海参胶原蛋白为原料,采用超声波辅助酶解制备低聚肽(分子量小于1 kDa),并对其抗氧化性进行了研究。研究结果表明,超声波辅助对胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解东海海参胶原蛋白均有显著促进效果,低聚肽含量和收率均有大幅提高。当超声波功率为100 W时,中性蛋白酶酶解的低聚肽含量最高,达70.5%。采用单因素试验,对超声波辅助下中性蛋白酶酶解工艺进行优化,确定最佳酶解工艺为:超声波功率100 W,酶解温度60℃,酶解pH 7.0,酶添加量5%(w/w),酶解时间20 min。在最佳工艺条件下,低聚肽含量和收率最大达75.4%和52.9%。抗氧化试验表明,该低聚肽对DPPH和ABTS清除的效果均随低聚肽浓度的增加而增强。该低聚肽对ABTS的清除快速高效,对DPPH的清除则随着处理时间的延长而缓慢增加。当低聚肽浓度为8 mg/mL,处理时间为30 min时,DPPH和ABTS的清除率分别为19.0%和87.2%。     

超声波在酶法生产紫菜降血压肽过程中的应用

为从紫菜蛋白中制备降血压肽，采用8种商业蛋白酶进行筛选，确定了以中性蛋白酶作为水解用酶和相应的酶解条件．研究了超声波处理紫菜蛋白后对酶解过程的影响，超声波处理后紫菜蛋白水溶液中游离氨基酸、酸溶性肽的质量浓度未变化，紫菜蛋白的紫外可见差示光谱也未出现变化；超声波处理的紫菜蛋白经酶解的产物，与未超声处理紫菜蛋白在同样条件酶解的产物相比，水解度增加1．1倍，IC50值降低29．5％．结果表明，超声处理没有破坏紫菜蛋白的分子结构，可能使它的分子空间构象发生变化，更加容易与酶分子结合，促进了酶解的进程．     

2种蛋白酶对鲢鱼蛋白质的酶解作用

为了利用蛋白酶水解低值鱼或鱼加工下脚料生产水解鱼蛋白质,以鲢鱼蛋白质为原料对比研究了原料前处理、底物浓度、酶解时间、产物抑制浓度等对碱性蛋白酶和复合蛋白酶水解鱼蛋白质的影响,并研究了用2种蛋白酶分阶段水解鱼蛋白质的工艺.结果表明,碱性蛋白酶水解鲢鱼蛋白质在pH 8.0时的适宜条件为:温度45 ℃,酶解时间20 min,蛋白质质量分数低于6%,产物氨基态氮质量浓度低于2.55 g/L;复合蛋白酶在pH 6.5时的最适水解条件为:温度50 ℃,酶解时间20 min,蛋白质质量分数小于6%,产物氨基态氮质量浓度小于2.25 g/L;用2种蛋白酶分段水解鲢鱼蛋白质可大大提高水解产物的氨基态氮含量,增加水解产物的得率.     

花生分离蛋白复合酶水解工艺优化研究

探讨了超声波辅助前处理对花生分离蛋白复合酶解的影响,比较了碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶等六种蛋白酶解物清除DPPH自由基的效果,确定碱性蛋白酶和胰蛋白酶较佳的复合比例为8∶2.在此基础上,开展响应面优化试验,以DPPH自由基清除率和水解度为指标,探讨复合酶与风味蛋白酶酶解的较佳工艺参数,并分析DPPH清除率和水解度相关性.实验结果表明,复合蛋白酶制备花生分离蛋白抗氧化肽的较佳酶解工艺为pH 8.5,温度49.36℃,酶添加量(E/S,质量分数m/m)3.40%,酶解时间203.59 min.     

中国毛虾木瓜蛋白酶水解的工艺条件

以水解度和总氮回收率为指标,研究了单酶水解中国毛虾的工艺条件,分析了酶解温度、加酶量、料水比、酶解时间四因素对中国毛虾蛋白水解的影响。通过正交试验,确定最佳水解条件。综合考虑,木瓜蛋白酶水解中国毛虾的最适条件为：温度55℃,加酶量0．5％,料水比1：4,水解时间3h。在此条件下,中国毛虾的水解度为30．69％,总氮回收率为68．82％。     

酶水解麦糟蛋白制备可溶性肽工艺研究

对碱性蛋白酶水解麦糟蛋白制备多肽的工艺条件进行了研究。通过单因素实验和正交实验,确定了较佳工艺条件：酶解pH10,加酶量3500u/g,酶解温度50℃,酶解时间20min。在此条件下,麦糟蛋白的水解度（DH）达22.18%,氮溶指数（NSI）达23.68%。     

酶解法去除宣木瓜中单宁酸

采用酶解法去除宣木瓜中的单宁酸。对影响反应的工艺参数如加酶量、酶解温度、时间、和pH进行了研究,确定了最佳工艺条件。结果表明,单宁酶的最佳作用条件为加酶量为0.2g,水解温度30℃,酶解时间40min,pH 4.5,酶解后宣木瓜汁中剩余单宁酸含量可降低为0.390mg/mL。     

大豆蛋白酶解物抗氧化及促进微生物生长研究

研究Alcalase蛋白酶对大豆蛋白的水解作用,通过正交设计确定酶解最佳条件,探讨最佳水解条件下不同酶解时间酶解物的抗氧化性和促进微生物生长的作用.结果表明,酶解最佳条件为:pH 9.0、温度65℃、底物酶量比100 g/mL;酶解90 min的酶解物清除自由基能力最强,酶解30 min的酶解物对酵母菌生长有促进作用,酶解60 min酶解物对酵母菌的代谢作用显著;酶解60、90 min的酶解物对黑曲霉的生长均有较好的促进作用.可见,酶解时间不同,酶解物的抗氧化活性与促进微生物生长作用有差别.     

蛋白酶水解骨素的对比及其优化研究

选取木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶分别对骨素进行酶解,对比了几种酶解液的苦味和水解度.结果表明:风味蛋白酶最适合酶解骨蛋白,其水解产物鲜味明显,无明显苦味;木瓜蛋白酶水解骨蛋白效果最差,其水解产物苦味最为明显;中性蛋白酶水解效果介于风味蛋白酶和木瓜蛋白酶之间.风味蛋白酶水解骨蛋白的最佳酶解条件为:温度50℃,加酶量6 000 U/g底物蛋白,p H值为7.0,酶解时间2 h,料液比1∶5(g/m L),在此条件下其水解度可达34.80%.     

蚝油酶水解条件的研究

对蚝油的酶水解工艺条件进行初步研究。结果表明：酶水解的最佳条件为酸性蛋白酶，酶水解温度５０℃，超始ｐＨ２．５，酶用量５０００ｕ／ｇ，酶水解时间４－５ｈ。     

α-淀粉酶协同超声波法提取复方半边莲注射液工艺优化

在超声波条件固定的情况下,采用正交试验设计,运用α-淀粉酶提取复方半边莲注射液指标成分野黄芩苷,以HPLC方法检测野黄芩苷含量.最佳工艺条件为:酶解时间30 min,pH6.0,酶解温度30℃,酶用量0.5 g.在此优化条件下,提取复方半边莲注射液的野黄芩苷含量为4.45 g/L,明显大于复方半边莲注射液注册标准煎煮法野黄芩苷的含量1.34 g/L、单一超声法3.84 g/L、单一α-淀粉酶法1.89 g/L.     

霉菌发酵型奶酪粉的制备工艺研究

以液态奶为原料,以卡地干酪青霉（Penicilliumcandidum）、娄地青霉（Penicilliumroquefo）和雅致放射毛霉（Actinomucorelegans）为发酵菌种,通过测定发酵奶的游离脂肪酸（freefatacid,FFA）和游离氨基酸（freeaminoacid,FAA）含量,选出最佳发酵菌种为雅致放射毛霉．优化后的发酵条件为：雅致放射毛霉接种量（按孢子数计）1．94×10。mL,在29℃、95r／min下摇床培养4d,发酵奶中的游离脂肪酸和游离氨基酸分别为4．28％和0．37％．为了加速发酵奶中风味物质的形成,继而对脂肪酶和蛋白酶水解发酵奶进行了单因素实验和正交实验,确定最佳酶解条件为脂肪酶添加量为1．5％,无水奶油添加量为12％;蛋白酶添加量为0．15％,大豆粉添加量为6％,经55℃酶解8h后发酵奶中的游离脂肪酸、游离氨基酸和脂解率分别为11．12％、1．12％和71．6％．在此条件下对水解产物进行喷雾干燥得到的霉菌发酵型奶酪粉水分含量9．71％,蛋白质含量为29．21％,粗脂肪含量27．23％,基本与进口奶酪粉接近（水分含量7．35％,蛋白质含量35．53％,粗脂肪含量24．91％）．     

超声法提取木立芦荟总黄酮的研究

本研究以木立芦荟干粉为原料,乙醇为溶剂,采用超声法提取总黄酮。通过单因素试验和正交试验优化提取工艺,结果最佳提取条件为:超声功率70 W、超声时间25 min、乙醇浓度80%、固液比1∶30,在此条件下,提取率达到3.05%,明显高于不经过超声处理的对照组。     

桑叶多糖的提取工艺研究

研究了水浸提法提取桑叶多糖的工艺条件,比较了超声法、酶法和微波法等不同的前处理方法对桑叶多糖提取效率的影响．结果表明：（1）水浸提法提取桑叶多糖的较优方案为：温度80℃、时间1h、料液比1：40,桑叶多糖的得率约为11．50％．（2）超声法辅助提取桑叶多糖的较优方案为：超声功率300W,超声处理10min,之后水浸提多糖的得率为12．25％．（3）纤维素酶为桑叶多糖的最佳酶提取剂,其酶解的较优方案为：酶用量为桑叶量的1．5％,酶解时间2h,酶解温度50℃,酶处理后水提多糖得率为12．49％．（4）微波辐射时间以8min为宜,微波法辅助提取多糖得率为11．68％．（5）比较4种处理方法提取桑叶多糖的得率,依次为：酶辅助法〉超声辅助法〉微波辅助法〉水浸提法,综合考虑成本、工作效率等因素,以超声法前处理、水浸提桑叶多糖得率较高．     

基于超声波辅助法的杜仲籽蛋白提取工艺优化

采用单因素和正交试验方法对超声波辅助提取杜仲籽蛋白工艺进行了优化.先选取料液比、超声时间、超声温度、浸提pH值等条件对杜仲籽蛋白的提取工艺进行单因素实验,采用L9(34)正交试验确定本工艺最佳条件.实验结果表明,在超声波辅助提取杜仲籽蛋白最佳工艺条件（料液比为1∶25,超声时间为30 min,超声温度为50 ℃,浸提pH值为10.0）下,杜仲籽蛋白提取率为77.03%.     

蚕蛹抗氧化肽的制备及其体外抗氧化活性评价

为更客观地评价蚕蛹抗氧化肽的抗氧化能力, 以人工胃肠模拟液对不同蛋白酶酶解物的抗氧化能力进行评价, 优选获得最佳的制备用酶——碱性蛋白酶. 在此基础上,以蚕蛹抗氧化肽总还原能力为指标, 利用响应曲面法(response surface method, RSM)优化碱性蛋白酶制备蚕蛹抗氧化肽的最佳酶解工艺. 结果表明: 碱性蛋白酶的最佳酶解条件为pH=8.30, 加酶量为15.34 μL(1 902 U), 温度为50.47 ℃, 时间为2.45 h; 在此条件下优化预测得到的2 mg 蚕蛹蛋白/mL 酶解液的总还原能力为0.434, 蚕蛹抗氧化肽对·OH 和DPPH· 自由基的半数清除率IC50 分别为4.51 与4.24 mg/mL.     

海参内脏酶解制备海参肽工艺

以蛋白水解度和酶解液中海参肽相对分子质量的分布作为指标,考察不同蛋白酶的酶解效果,筛选水解海参内脏的最适合蛋白酶,并通过单因素实验和正交实验优化酶解工艺.实验结果表明:胰蛋白酶的水解效果最佳,可用于水解海参内脏制备海参肽;在底物质量分数为1.0%,加酶量为0.375 1 mkat·g^-1,pH值为8.0,酶解温度为37 ℃,水解时间为5 h的最优酶解条件下,海参内脏的水解度可达到48.90%,酶解液中的多肽(2 000~5 000 u)质量分数为52.68%,寡肽(含氨基酸)(≤2 000 u)质量分数为47.25%.     

超声法提取萹蓄总黄酮的正交试验研究

采用正交试验法优化篇蓄总黄酮的超声波提取工艺,系统考察了乙醇体积分数、料液比、超声温度、超声时间对总黄酮提取量的影响.篇蓄总黄酮的最佳提取工艺如下:料液比为1∶25,超声温度为45℃,超声萃取时间为25 min,乙醇体积分数为90％.此条件下总黄酮得率为12.012 mg/g.