模拟失重效应下龙血素B在大鼠体内的药物动力学及排泄

比较正常重力与模拟失重效应下大鼠口服龙血素B的血浆药物动力学及排泄差异.大鼠吊尾21 d模拟失重效应,单次灌胃给予25 mg/kg龙血素B.于系列时间点收集静脉血,并分时间段收集尿液、粪便和胆汁,采用HPLC-MS方法测定各样本中龙血素B含量,并求算药物动力学参数和排泄量.模拟失重效应下龙血素B的血药浓度-时间曲线下面积（AUC_0-t）、血药峰浓度（C_max）、达峰时间（t_max）、表观分布容积（V_d）、消除速率常数（K_e）以及生物半衰期（T_1/2）与正常重力组相比均出现显著变化,说明模拟失重效应明显改变龙血素B在大鼠体内的药物动力学过程.尿液、粪便和胆汁中龙血素B的排泄量也在增加,但与正常重力相比不明显.      

龙血素B在模拟失重效应大鼠体内的分布研究

研究传统名贵傣药龙血竭中有效成分龙血素B在大鼠体内重要组织的分布情况,同时探讨长期模拟失重效应对龙血素B分布的潜在影响.将SD大鼠分为正常重力组和模拟失重效应组,采用21 d大鼠尾悬吊方法模拟长期失重效应,单次灌胃给予大鼠25 mg/kg龙血素B,于给药1 h后收集心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、脑、睾丸和骨骼肌10种组织,采用HPLC-MS/MS方法测定各组织中龙血素B质量分数.在正常重力组中,龙血素B在肝、胃分布较多,其次是肾、肠、心、脾、骨骼肌和肺,脑中最少.与正常重力组相比,模拟失重效应组大鼠肝中龙血素B的质量分数显著升高47.7%（p<0.05）,脑中质量分数上升5.4倍（p<0.05）;在肠和肾中质量分数显著下降52.7%和22.0%（p<0.05）;在大鼠胃、心、肺、脾、睾丸和骨骼肌中质量分数无显著变化.龙血素B的分布具有明显组织特异性,长期模拟失重效应显著改变龙血素B在大鼠肝、肠、脑、肾等重要组织的分布.      

一种新的评估龙血竭3种化学成分相互作用特性的分析方法

为了评估龙血竭的3种化学成分剑叶龙血素A、剑叶龙血素B和龙血素B在活体动物实验中的相互作用特性,从经典的Loewe Additivity模型中推导出了在效价强度比变化的情况下判断3种药物的相互作用性质的等效图分析方法,以此分析了龙血竭的上述3种化学成分联合抑制大鼠脊髓背角广动力范围(WDR)神经元诱发放电频率时的相互作用类型.结果表明:剑叶龙血素A与剑叶龙血素B在抑制WDR神经元诱发放电时具有拮抗作用,剑叶龙血素A、剑叶龙血素B、龙血素B的组合在抑制WDR神经元诱发放电时具有协同作用.这种等效图分析方法能直观精确地描述效价强度相异的药物的相互作用性质,为联合用药治疗评价提供了新的思路.     

HPLC法同时测定不同产地龙血竭中3种黄酮类成分

为建立HPLC测定不同产地龙血竭中3种黄酮类成分的方法,选择了广西、云南产9个批次的龙血竭,测定了其中龙血素A、龙血素B、剑叶龙血素B的含量.采用Thermo BDS Hypersil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相乙腈-1%冰醋酸,梯度洗脱,流速1.0 m L·min~(-1),柱温40℃,检测波长278 nm.3个药效成分在45min内达到基线分离,线性关系良好.9个批次龙血竭中龙血素A、龙血素B、剑叶龙血素B的平均含量分别为:0.47%,0.96%,0.44%;平均加样回收率分别为:99.6%,103.2%,100.5%;RSD分别为:1.20%,0.65%,1.30%.该实验方法操作简便,结果准确,重复性和稳定性良好,可为龙血竭的质量控制提供参考.     

毛细管区带电泳技术研究龙血竭有效单体与核酸适配体及凝血酶之间的相互作用

利用毛细管区带电泳技术（CZE）研究5个龙血竭有效单体与牛凝血酶（B-Thr）、29碱基凝血酶核酸适配体（Apt29）之间的相互作用.电泳条件为有效长度是40 cm的非涂层石英毛细管,气压进样3.45 kPa,进样时间5 s,分离电压+15 kV,分离温度15℃,检测波长分别为214 nm（牛凝血酶体系）和330 nm（核酸适配体体系）.结果表明,龙血素A和B-Thr之间的结合常数K_b为4.73×104 L/mol,白藜芦醇、龙血素B、7,4'-二羟基黄酮、龙血素C与B-Thr没有显著结合;龙血素B和7,4'-二羟基黄酮与核酸适配体的结合常数K_b分别为1.98×104,1.83×104 L/mol,白藜芦醇、龙血素A、龙血素C与核酸适配体之间没有表现出明显的结合现象.本文结果对进一步研究龙血竭在凝血酶上的潜在结合位点,以及核酸适配体能否向凝血酶靶向转运龙血竭,提供了科学数据支持.      

剑叶龙血素B对辣椒素诱发大鼠背根神经节细胞VR1电流的抑制作用

使用全细胞膜片钳技术,在急性分离的大鼠背根神经节细胞上,观察了剑叶龙血素B(CB)对辣椒素(CAP)诱发电流和电压反应的影响.在-60 mV的钳制电压下,剑叶龙血素B快速、可逆地抑制了辣椒素诱发电流,并且该抑制呈浓度依赖性,半数抑制浓度(IC50)为0.92 mmol/L;在电流钳条件下,剑叶龙血素B抑制了辣椒素诱发的去极化.0.38 mmol/L的剑叶龙血索B产生的抑制率为38.6士1.9%,而0.76 mmol/L的剑叶龙血素B几乎全部抑制了辣椒素诱导的去极化.这些结果表明:剑叶龙血素B对CAP/VR1反应的抑制可能用来解释一些血竭的镇痛效应.     

龙血竭HPLC指纹图谱研究

为建立龙血竭指纹图谱质量控制方法,采用HPLC法测定,液相色谱仪Agilent 1100,色谱柱为Waters Xterra C184.6×250 mm,5μm;流动相为0.1%的磷酸溶液和乙腈梯度洗脱,流速为0.7 mL/min,检测波长为280 nm,理论板数按参照物(龙血素B)峰计算不低于6000.实验结果表明,10批成品指纹图谱与对照指纹图谱计算相似度,其结果均大于0.90.该方法稳定可行,可用于龙血竭质量控制.     

龙血竭总酚活血化瘀活性成分的虚拟筛选及初步活性研究

应用Discovery Studio虚拟筛选软件,以凝血酶为受体,对龙血竭总酚活血化瘀有效成分进行了虚拟筛选. 虚拟筛选确定的受试成分对体外凝血酶活性的影响数据表明,计算机辅助虚拟筛选结果与体外药理实验结果基本符合. 受试成分龙血素A、龙血素B、龙血素C、7-羟基-4'-甲氧基黄烷、4',7-二羟基高异黄烷能抑制体外凝血酶活性,具有活血化瘀的药理作用.      

氢氯噻嗪在Caco-2细胞模型中的体外转运研究

采用体外培养的人小肠上皮细胞模型Caco-2考察浓度、时间、P-糖蛋白(P-glyprotein,P-gp)抑制剂维拉帕米(verapamil)以及pH对氢氯噻嗪(hydrochlorothiazide)跨膜转运的影响.氢氯噻嗪双向转运的Papp比值即Papp B→A/Papp A→B均大于1.5.在加入P-gp抑制剂维拉帕米后,氢氯噻嗪PappA→B极显著增大,Papp B→A降低,且Papp B→A/Papp A→B从2.87下降到0.67,加入前后有极显著差异(P0.01),且氢氯噻嗪的吸收转运随pH值的降低而显著增加.结果表明,氢氯噻嗪在Caco-2细胞模型中的吸收可能存在由载体介导的主动转运,同时它还受到P-糖蛋白的外排作用.     

冰片对反式白藜芦醇药动学的影响研究

为了研究冰片对反式白藜芦醇(resveratrol,Res)药代动力学的影响,将雄性SD大鼠分为灌胃给药和尾静脉注射给药两大组,灌胃给药组和尾静脉注射给药组均包括反式白藜芦醇(30 mg/kg)单用组,反式白藜芦醇与低、中、高剂量冰片(50、100和200 mg/kg)合用组.大鼠给药后不同时间点Res的血药浓度用高效液相色谱法测定,并用DAS3.0软件处理计算Res药动学参数.结果表明,不管是灌胃给药,还是静脉注射给药,冰片对反式白藜芦醇大鼠体内药动学均有明显影响.尾静脉注射给药中,单用Res对照组的药-时曲线下面积AUC0~∞为(127.04±29.84)mg/(L·min),血浆药物总清除率CLz为(0.088±0.029)L/(min·kg).低、中剂量冰片对Res的药代动力学无显著影响,高剂量冰片使血浆中Res的AUC(0~∞)增大了73.6%,CLz降低了42.1%,且与对照组相比差异具有统计学意义(P0.05).表明高剂量冰片可促进Res的吸收,降低Res的体内清除.1     

异丙嗪麻黄碱合剂在模拟失重大鼠体内的药动学研究

分别对不同模拟失重周期大鼠,展开给药异丙嗪和麻黄碱合剂的药物动力学研究,获取不同模拟失重时间点下两种药物的药物动力学参数,为保障航天员合理、安全用药提供基础研究数据.采用大鼠尾悬吊模型模拟失重,建立LC-MS/MS法测定大鼠血浆中异丙嗪和麻黄碱浓度,并求算各组中两种药物的动力学参数.与对照组相比,异丙嗪和麻黄碱在不同吊尾组药时曲线下面积（A_UC0-t）,血药峰浓度（C_max）,消除速率常数（K_e值）,血浆半衰期（T_1/2）均有变化.不同模拟失重周期对异丙嗪和麻黄碱在大鼠体内的药动学过程产生显著影响.      

Microcalorimetric investigation of effect of berberine alkaloids from Coptis chinensis Franch on intestinal diagnostic flora growth

The inhibitory effect of three berberine alkaloids (BAs) from Coptis chinensis Franch, a traditional Chinese medicinal (TCM) herb, on Bifidobacterium adolescentis growth was investigated by microcalorimetry. The power-time curves of B. adolescentis with and without BAs were acquired, meanwhile the extent and duration of inhibitory effect on the metabolism were evaluated by the growth rate constant (k), half inhibitory ratio (IC₅₀), maximum heat-output power (P _max), peak time of maximum heat-output power (t _p) and total heat production (Q _t). k, P _max and Q _t decreased, and t _p was prolonged with the increase of BAs concentration. The IC₅₀ of BAs is 806 μg/mL for berberine, 341 μg/mL for coptisine and 236 μg/mL for palmatine. The sequence of antimicrobial activity of BAs is berberine < coptisine < palmatine. Combined with previous studies, it could be shown that the sequences of antimicrobial activity of BAs on both Bacillus shigae and Escherichia coli are berberine > coptisine > palmatine. The structure-function relationship of BAs indicates that the functional group methylenedioxy or methoxyl at C2 and C3 might be the major group inducing the activities of BAs on E. coli and B. adolescentis. Meanwhile, the substituent groups at C2, C3, C9 and C10 almost have equal effect on B. shigae. Supported by the National Natural Science Foundation of China (Grant Nos. 30625042 and 30873385) and Key Projects of National Science & Technology Pillar Program of China in the 11th Five-Year Period (Grant No. 2007BAI40B05)     

亮菌甲素在大鼠体内的绝对生物利用度

采用液相色谱 串联质谱（LC-MS/MS）法测定大鼠血浆中亮菌甲素的浓度, 研究亮菌甲素在大鼠体内药动学特征及其绝对生物利用度. 结果表明, 亮菌甲素灌胃给药(ig)1.44 mg和静脉注射给药(iv)0.9 mg后, 在大鼠体内的主要药动学参数达峰浓度(cmax)分别为(58.33±23.41),(825.25±92.13) μg/L, 半衰期(t_1/2)分别为(1.55±0.43), (0.75±035) h, 血药浓度-时间曲线下面积(AUC_0~t)分别为(41.87±7.54), (140.64±19.73) h·(μg/L). 经剂量校正后求得亮菌甲素在大鼠体内的绝对生物利用度(F_ab)为18.61%.     

摄入L-肌肽对女子足球运动员高强度训练后肌肉损伤恢复和抗氧化能力的影响

目的:探讨L-肌肽补充对女足运动员高强度运动后氧化伤害和肌肉损伤恢复的影响.方法:本研究招募30名女足受试者,在完成身体基本测量和最大摄氧量测验后,依照个人最大摄氧量表现进行配对分组,各组分别进行高剂量L-肌肽(HL组)、低剂量L-肌肽(LL组)、安慰剂(C组)补充.持续补充28 d后,在下坡跑运动前24h检测受试者肌肉损伤生理指标:最大等长收缩肌力、视觉模拟评分和血清肌酸激酶等氧化应激生化指标.次日在跑台上进行以70%最大摄氧量及强度在-15%坡度进行30 min下坡跑,在运动后24,48,72 h分别检测视觉模拟评分、最大等长收缩肌力、肌酸激酶,谷胱甘肽等指标.结果:LL组和HL组最大等长收缩肌力后测结果显著高于P组,p0.05. LL组和HL组视觉模拟评分后测结果显著低于P组,p0.05. LL组、 HL组的尿素氮、肌酸激酶、乳酸脱氢酶、谷丙转氨酶后测结果显著低于P组,p0.05. LL组、 HL组的谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化酶、谷胱甘肽—S转移酶后测结果显著低于P组,p0.05; LL组、 HL组的超氧歧化酶后测结果显著高于P组.结论:摄入L-肌肽可以显著改善高强度运动后的肌力减退、肌肉疼痛,降低血清尿素氮肌酸激酶、乳酸脱氢酶和天冬氨酸转氨酶等肌肉疲劳和肌肉损伤指标;降低谷胱甘肽、谷胱甘肽过氧化酶、谷胱甘肽—S转移酶血清浓度,提升超氧歧化酶浓度,增强机体抗氧化作用.此外研究发现,摄入低剂量L-肌肽与高剂量L-肌肽相比在衡量肌肉疲劳损伤和抗氧化等关键指标上没有统计学意义.     

一类2n次Kolmogorov系统的极限环

研究一类2n次Kolmogorov系统{dx/dt=x(a0-a1x a3x3-a4x4 a5xy2n-1),dy/dt=y(b1x2n-b2),极限环的存在性问题.主要讨论a5＞0和a5＜0两种情形.当a5＞0时,系统在第一象限内不存在极限环;当a5＜0时,得到了平衡点的稳定性态,系统无闭轨的充分条件以及在第一象限内存在稳定极限环的条件.     

通管汤盆腔灌注对大鼠输卵管炎性阻塞性不孕模型病理及BCL-2、EGFR蛋白表达的影响

目的研究自拟通管汤(简称通管汤)盆腔灌注对大鼠输卵管炎性阻塞的作用及机制。方法选用体重为(200±20)g,鼠龄8~12周的SD雌性大鼠130只,用混合菌制造大鼠输卵管炎性阻塞模型114只,随机分为正常对照组(A)、模型组(B)、兔耳风胶囊组(C)、通管汤组(低剂量组D_1、中剂量组D_2、高剂量组D_3)。采用输卵管通液观察输卵管通畅,HE染色观察输卵管组织形态学变化,免疫组化检测输卵管上皮细胞Bcl-2、EGFR的表达。结果 (1)治疗组输卵管通畅率D_3、D_2、C组与B、D_1组比较有非常显著性差异(P0.01);(2)D_3组与D_2、C组比较有较显著差异(P0.05);中高剂量治疗组(D_3、D_2)输卵管组织形态好转明显好于模型组(B)与低剂量组(D_1);治疗组输卵管上皮细胞Bcl-2、EGFR表达(P0.05-P0.01),差异有显著性,15 d与30 d比较无明显差异。结论通管汤高剂量组能缓解输卵管肿胀、减轻炎性细胞浸润、增加管腔纤毛数量和恢复输卵管通畅性;并通过下调Bcl-2、EGFR的过度表达,抑制输卵管上皮细胞凋亡和炎症反应,达到治疗输卵管炎性阻塞的作用。     

槲皮素镧配合物对S.Pombe细胞生长代谢热动力学的影响

采用八通道微量热法探讨槲皮素镧配合物对粟酒裂殖酵母细胞生长代谢热动力学的影响。测定在槲皮素镧配合物作用下S.Pombe细胞的生长代谢产热曲线,并研究其生长速率常数(k)、最大发热功率(pmax)、达最大发热功率时间(tmax)和抑制率(I)等热动力学参数。微量热结果表明:随着槲皮素镧配合物浓度c的增大,最大发热功率pmax和速率常数k减小;达最大发热功率时间tmax和抑制率I增大。研究表明槲皮素镧配合物对粟酒裂殖酵母细胞生长代谢产生了抑制作用。