两种红豆杉植物的愈伤组织培养及褐化抑制

在DPS系统均匀设计的基础上,对曼地亚红豆杉(Taxus m edia)和南方红豆杉(Taxus chinensisvar.mairei)的茎和叶进行愈伤组织培养,并探讨愈伤组织褐化的抑制.结果表明:两种植物茎形成愈伤组织能力均强于叶;同一种红豆杉植物愈伤组织诱导率与其直径存在一元线性回归关系;B5培养基添加0.3 mg/L 6-BA和2.9mg/L NAA(曼地亚红豆杉)、0.1 mg/L 6-BA和1.7 mg/L NAA(南方红豆杉)为最适合愈伤组织诱导和生长的培养基;南方红豆杉茎和叶产生愈伤组织平均时间分别少于曼地亚红豆杉茎和叶,其茎和叶愈伤组织平均直径显著大于曼地亚红豆杉;培养基添加0.01~0.2 mg/L抗坏血酸(Vc)能较为有效抑制愈伤组织褐化.     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导研究

为研究曼地亚红豆杉愈伤组织的诱导最佳条件,以新生嫩茎为外植体筛选最佳的灭菌方案,以新生的幼茎和叶片为外植体筛选出诱导愈伤组织适宜的外植体和最佳的激素配比。结果表明：75%酒精处理30s＋0.1%HgC12处理12min灭菌效果最好;幼茎比叶片更适合愈伤组织诱导,在MS基础上,最佳的幼茎愈伤组织诱导激素配比为0.3mg.L-16-BA、1.0mg.L-1NAA、3.0mg.L-12,4-D,此时诱导率达到93.3%,愈伤组织生长质量好。     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和继代培养研究

以曼地亚红豆杉(Taxusmedia var.hickss)嫩茎和嫩叶为外植体,进行愈伤组织诱导和继代培养研究。愈伤组织诱导以MS为基本培养基,继代培养以MS和B5为基本培养基,分别添加不同浓度和组合的细胞分裂素(6-BA、TDZ、KT、2-ip)、生长素类激素(NAA、2,4-D),和水解乳蛋白、活性碳等抗褐化试剂,考察其对愈伤组织诱导和继代培养的影响。结果表明,曼地亚红豆杉嫩茎有很强的分生能力,比嫩叶更易于诱导愈伤;在培养基MS TDZ0.002mg/L NAA1.0mg/L、MS TDZ0.002mg/L 2,4-D1.0mg/L、MS TDZ0.002mg/L NAA1.0mg/L 2,4-D1.0mg/L和MS KT1.0mg/L 2,4-D1.0mg/L NAA1.0mg/L上,嫩茎愈伤的诱导率达100%,生长迅速,品质良好,利于继代培养;培养基B5 KT1.0mg/L 2,4-D2.0mg/L NAA1.0mg/L适用于愈伤继代,每30d增殖倍数5.2倍;培养基中添加活性碳500mg/L、维生素C 1000mg/L或水解乳蛋白1000mg/L对抑制材料褐化有一定的效果。     

胀果甘草细胞的悬浮培养

切取胀果甘草(Glycyrrhiza inflate)无菌苗的子叶、下胚轴和根段外植体进行愈伤组织的诱导和悬浮细胞培养,建立了胀果甘草细胞悬浮培养体系,测定了悬浮培养细胞的生长曲线,并且研究了接种量、条件培养和激素组合对胀果甘草悬浮细胞生长的影响.结果表明子叶来源的愈伤组织最适合作为胀果甘草细胞悬浮培养的起始培养物;悬浮培养的最佳接种量为 35 g/L;条件培养基的最佳用量为总培养体积的1/3;最适合胀果甘草悬浮细胞生长的培养基是附加了 NAA 1.0 mg/L + KT 0.5 mg/L 激素组合的 MS 培养基.     

曼地亚红豆杉愈伤组织诱导和继代培养中抑制褐化的研究

对曼地亚红豆杉茎段和叶片的愈伤组织诱导条件和愈伤组织继代培养条件进行了探讨,同时对愈伤组织继代培养中的褐化问题进行了分析.结果表明:具有较强分生能力的新生茎段和叶片能够得到很高的诱导率,与NAA相比,2,4 D在诱导中作用显著.含有3mg/L2,4 D+0 5mg/LNAA+0 2mg/L6 BA的MS培养基有利于愈伤组织的诱导.在继代培养中,2,4 D比NAA对愈伤组织生长的促进作用显著,6 BA对愈伤组织生长的促进作用极显著.在继代培养中发现在第20天就开始转移继代和提高愈伤组织与培养基接触面的氧气供给能够较好克服褐化.在含有5mg·L-12,4 D5+0 5mg·L-16 BA+1g·L-1AC的B5培养基上,愈伤组织细胞增殖倍数最大,达到4 7,褐化也得到部分控制.     

甘肃康县地方茶树愈伤组织诱导研究

以康县地方茶树的茎、叶为外植体诱导愈伤组织,比较了不同激素组合对茎、叶诱导愈伤组织的影响。结果表明,以幼叶和幼茎作为外植体能获得较多的愈伤组织;幼叶外植体的适宜培养基为MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.5 mg/L+KT 1.0 mg/L,幼茎外植体的适宜培养基为6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+2,4-D 2.0 mg/L。     

黄芩愈伤组织与丛芽诱导

为寻求黄芩愈伤组织、丛芽诱导的最佳条件,分别以茎尖、茎段、叶片、带节茎段等为实验材料比较不同诱导条件对诱导率的影响;比较培养过程中愈伤组织的增重量及生长状态.结果表明,诱导率:带节茎段要高于其它外植体;MS+6-BA0.5 mg/L +NAA0.5 mg/L为愈伤组织诱导率最高、愈伤组织增殖最大的培养基组合;MS+6-BA1.0 mg/L +NAA0.5 mg/L为不定芽诱导最合适培养基.     

影响麻疯树叶片离体再生条件的优化

为建立高效稳定的麻疯树离体再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件.以无菌苗叶片为外植体,以MS为基本培养基,6-BA 2.0mg/L+2,4-D 0.02mg/L的激素组合对愈伤组织的诱导最有利,6-BA 0.5mg/L+KT 0.5mg/L+IBA 0.1mg/L+GA30.1mg/L的激素组合对不定芽分化最有利.在此基础上针对外植体培养、愈伤组织继代的培养条件和继代次数3个因素进行优化.结果表明:采用麻疯树的无菌苗叶片为外植体,黑暗条件下诱导出愈伤组织,再在黑暗条件下继代一次后转入分化培养基中对不定芽诱导最为有利,分化率达72.59%.分化后得到的不定芽在含IBA 0.2mg/L的MS培养基上生根率达75%.生根苗在添加蛭石的含IBA 0.05mg/L的改良生根培养基中驯化培养后,再经过以蛭石∶腐殖土=1∶1(V/V)为培养基质的套袋培养,移栽后成活率达93%.     

不同外植体和激素对银杏愈伤组织诱导和生长的影响

以银杏胚的不同部位子叶、胚芽、胚轴、胚根为外植体,比较不同外源激素和培养条件对银杏愈伤组织诱导和继代培养的影响,结果表明子叶最易诱导愈伤组织,且在暗条件下诱导效果最好,2,4-D和队影响子叶的愈伤诱导能力;以茎段为外植体,发现生长素为茎段愈伤组织诱导所必需,且NAA诱导效果好于2,4-D;以叶片为外植体,发现生长素中的NAA诱导愈伤效果最好,雌雄叶的诱导能力相同.在愈伤组织生长过程中,NAA是子叶和茎段愈伤组织继代培养必需的,BA对茎段愈伤组织生长速.度无显著影响,但可使愈伤组织敛密,并有利于分化.MS 1 mg/LNAA 0.005 mg/LKT(或BA)的培养基对叶片愈伤组织生长最理想,雄叶愈伤生长较快,光照培养促进愈伤组织生长.     

银杏叶片愈伤组织培养及光暗条件对黄酮含量的影响

以银杏嫩叶为外植体,在添加不同种类和浓度激素的MS培养基上进行愈伤组织诱导研究,同时分析光暗条件对愈伤组织生长和黄酮含量的影响。愈伤组织生长后,用分光光度比色法分析测定银杏愈伤组织黄酮含量。实验结果:在光照条件下,添加激素6-BA1.0mg/L和NAA2.0 mg/L的MS培养基中,诱导形成的愈伤组织生长最好,黄酮含量较高。     

影响红掌品种＂若比诺＂愈伤组织诱导因素分析

以红掌品种“若比诺”的无菌苗为材料,研究了影响红掌品种“若比诺”愈伤组织的诱导因素．结果表明,基本培养基、外源激素、外植体类型和光照培养条件对愈伤组织的诱导都有显著影响．茎段在MS＋BA（2．0mg／L）＋2,4．D（0．2mg／L）培养基中愈伤组织诱导率最高,达到100％,叶片在1／2MS＋BA（2．0mg／L）＋2,4-D（0．2mg/L）培养基中诱导率最低（为0）．不同外植体的愈伤组织诱导率有明显的差异,其诱导率的大小依次为茎段〉叶柄〉叶片,茎段最适合做外植体源．光培养下的愈伤组织诱导率比暗培养下的高,光照有利于“若比诺”的愈伤组织的诱导．     

连翘组织培养研究Ⅰ愈伤组织的诱导与培养条件的优化

在MS培养基上附加不同种类和浓度配比的激素,2000lx的光照条件下对连翘植物愈伤组织的继代培养和生长量进行了比较.当2,4-D 3.0mg/L时,愈伤组织诱导率最高,达100%;当2,4-D0.5mg/L,KT0.5mg/L和BA2.0mg/L时最适合继代和细胞生长.结果还表明:单一2,4-D的各种浓度对愈伤组织都有较高的诱导率.不同激素组合对愈伤组织生长量和发生的状况有明显影响.在固体培养基上,愈伤组织的生长周期为28d.为连翘植物细胞悬浮培养建立了基础,为解决连翘植物的资源提供了新途径.     

益母草试管苗愈伤组织培养及其生物碱含量的测定

以种子萌发的试管苗叶片为外植体,采用正交试验探究了其愈伤组织的形成,并测定了其生物碱含量。结果表明:1.5 mg/L 6-BA利于种子萌发,其萌发率最高达26.39%;叶片愈伤组织诱导适宜培养基组合为MS+2.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L 2,4-D+20 g/L蔗糖+7 g/L琼脂,诱导率可达80.00%;适宜愈伤组织增殖激素组合为2.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L 2,4-D,增殖率可达88.05%,但各激素组合对愈伤组织生物碱的含量并无显著性差异。     

甘草愈伤组织培养及其代谢产物甘草酸的研究

以MS培养基为基础,分别以甘草根、胚轴、子叶为外植体进行培养,考察光照、2,4-D质量浓度、不同激素组合、pH等理化因子对愈伤组织生长的影响,对代谢产物甘草酸进行了HPLC的定量测定.实验表明其中以根的愈伤组织中甘草酸含量最高,为70.2 mg/g;黑暗条件比光照条件更有利于甘草酸合成;以激素组合为2,4-D4.0 mg/L KT0.5 mg/L,pH为5.4时甘草酸含量最高,在此条件下悬浮培养根培养物中甘草酸质量分数为81.6mg/g,比生药增多51.08%.     

红松成熟胚愈伤组织诱导外植体选择及培养条件优化

【目的】通过培养条件的优化和适宜外植体类型的筛选,解决红松成熟胚愈伤组织诱导中存在的愈伤组织诱导率低、生长状态差、褐化率较高等问题,为建立红松成熟胚体胚发生体系奠定基础。【方法】用5种培养基类型、3种蔗糖浓度和9种植物生长调节剂组合,选择8种来源于成熟种子不同部位的外植体,对愈伤组织诱导的培养条件和适宜外植体类型进行优化和筛选。【结果】① 在5种培养基中,DCR培养基上愈伤组织诱导率高于其他培养基、生长状态好于其他培养基; ② 添加在DCR中的3种蔗糖浓度中,35 g/L时的愈伤组织诱导率最高(92.01%)、褐化率最低(17.01%); ③ DCR添加35 g/L蔗糖情况下,9种植物生长调节剂组合中NAA 2.0 mg/L + 6-BA 1.5 mg/L组合的愈伤组织诱导率最高、褐化率最低、生长状态最佳; ④ 在选出的优化培养条件下,8种来源外植体中,从裸胚上切离的下胚轴的愈伤组织诱导率高、褐化率低,且增殖能力强,具备胚性愈伤组织的形态解剖特征。【结论】红松成熟胚愈伤组织诱导的优化培养条件为DCR +蔗糖35 g/L + NAA 2.0 mg/L+ 6-BA 1.5 mg/L,适宜外植体裸胚上切离的下胚轴。     

薄荷愈伤组织诱导与分化研究

本文研究了薄荷愈伤组织诱导与分化的影响因素。以薄荷茎段为外植体,研究培养基、激素水平对愈伤组织诱导、增殖培养的影响;以叶片为外植体,探讨叶片的愈伤组织诱导;以茎段、叶片和叶柄为外植体材料,比较不同外植体的愈伤组织诱导率。实验结果表明:MS比1/2 MS、B5培养基更适于茎段的诱导培养,诱导率达80%;叶片愈伤组织的诱导率为100%,以MS+1.0 mg/L BA+0.1 mg/L KT+0.5 mg/L NAA为最佳诱导培养基;幼叶是不同外植体中诱导效果最好的,以MS+0.5 mg/L BA+0.1 mg/L NAA为最佳诱导培养基。     

黄毛草莓愈伤组织诱导条件优化

本研究分别以黄毛草莓叶片和茎尖生长点为外植体进行愈伤组织的诱导,并通过比较茎尖愈伤组织在不同培养基以及不同植物激素组合下的生长情况,为建立黄毛草莓高效快速的繁殖体系,筛选愈伤组织诱导的最适培养基奠定基础.结果表明,与1/2MS培养基相比,MS培养基作为基础培养基(0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA条件下)诱导的愈伤组织效果最佳;以MS为基本培养基,通过4因素3水平L9(34)正交实验研究不同浓度组合的4种植物激素对黄毛草莓愈伤组织诱导率的影响.结果表明2,4-D对黄毛草莓叶片愈伤组织的诱导影响最大.黄毛草莓叶片愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA;NAA对黄毛草莓茎尖愈伤组织的诱导影响最大,黄毛草莓茎尖愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.6 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.6 mg/L NAA.     

大丽花组织培养及快繁技术研究

目的探讨适合大丽花离体快繁和再生的外植体类型和激素配比.方法以D6大丽花品种为试材,比较不同类型外植体愈伤组织和芽的分化情况,以及不同激素配比对腋芽和叶片愈伤组织诱导和分化的影响.结果顶芽和带腋芽的茎段在MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.1 mg/L培养基上容易形成丛生芽;刚萌动的腋芽在MS+6-BA 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L培养基上出芽率达到81.3%,平均芽数为3.8;叶片在MS+6-BA 3 mg/L+NAA 0.1 mg/L的培养基上不定芽的分化率为37.5%,平均芽数为4.2.结论顶芽和带腋芽茎段是进行离体快繁最适合的外植体,适合刚萌动的腋芽生长和分化的激素配比是6-BA 1 mg/L+NAA 0.2 mg/L,适合叶片分化不定芽的激素配比是6-BA 3 mg/L+NAA 0.1 mg/L.     

东北红豆杉愈伤组织培养研究

以东北红豆杉幼茎为培养材料诱导出愈伤组织，并分析了不同的激素组合、糖浓度、培养条件对愈伤组织诱导的影响。结果表明，NAA激素组合比2，4－D组合更有利于愈伤组织的诱导，在25℃、2％蔗糖、0．7％琼脂、每天光照12h条件下愈伤组织诱导率达100％。     

攀枝花苏铁愈伤组织的诱导与褐变抑制研究

以攀枝花苏铁的羽叶作为外植体,在含有不同激素的培养基上诱导愈伤组织. 结果表明：以MS+ 2,4-D 0. 2 mg/L+BA1 mg/L为最适宜培养基;2,4-D有利于诱导率的提高;细胞分裂素/生长素的比值高有利于愈伤组织的诱导. BA+KT的双因子组合没有单因子的诱导效果显著;采用0.1%HgCl2消毒的外植体灭菌效果最佳;0.1%的活性炭抑制褐变效果最好.