缺氧胁迫小细胞团法选育高产黄酮苷悬浮细胞系

以银杏优良品种的种苗诱导愈伤组织,考察了B5,sH,MS,White4种培养基对银杏愈伤组织生长性状和黄酮苷合成能力的影响,采用缺氧胁迫小细胞团法从愈伤组织中筛选高产黄酮苷的细胞系,并对细胞系在悬浮培养时的条件进行了优化.结果表明TZG-1培养周期18d,生长指数为4.12,黄酮苷含量为1.25％,比愈伤组织提高了257.1％;Ms培养基有利于形成质地松软的愈伤组织,当培养基中NH4+与NO3-的浓度比为20.3/39.4或10.3/29.1,蔗糖质量浓度为30g/L或40g/L,pH值为5.6～6.0时,有利于细胞生长和黄酮苷合成.     

激素质量浓度及不同培养方式对马铃薯愈伤组织的诱导

以马铃薯幼茎为供试材料,通过在液体和固体的MS培养基中分别添加植物激素NAA和6-BA,进行愈伤组织诱导.实验结果表明,无论激素是添加在液体培养基还是固体培养基中,愈伤组织诱导率都随着NAA质量浓度的增加先升高后降低,液体培养基中愈伤组织最佳诱导率是77.78%（NAA2.5 mg/L＋6-BA0.5mg/L）;固体培养基中愈伤组织最佳诱导率是100.00%（NAA3.5mg/L＋6-BA0.5mg/L）.并且,固体培养基中添加激素的诱导率普遍高于液体培养基中添加激素的诱导率,表明液体培养基中添加激素的方式不能提高马铃薯的愈伤组织诱导.6-BA对马铃薯愈伤组织的诱导影响没有NAA显著.本文还对马铃薯未分化愈伤组织及分化出不定根的愈伤组织进行扫描电镜观察.     

甘蓝型油菜萝卜胞质不育恢复材料测交F4代的快繁生根及愈伤组织诱导

利用油菜萝卜胞质不育恢复材料测交F4代种子,在附加各种不同激素浓度组合的MS培养基上诱导丛生芽、生根及愈伤组织诱导,结果表明在MS培养基中添加1.0mg/L 6-BA+0.1mg/L NAA对诱导丛生芽有较好的效果,1/2MS培养基对小芽生根效果最好,在MS培养基中添加0.5mg/L 6-BA +0.1mg/L NAA+0.25mg/L GA3+0.1mg/L 2,4-D对诱导愈伤组织效果最好.     

组培条件对何首乌愈伤组织诱导及生长的影响

为了寻找适合何首乌愈伤组织诱导与生长的培养条件，本文考察了愈伤组织形成的比率，分析了取样时间、光照条件、培养基中2，4-D、6BA和IBA的浓度对愈伤组织诱导和生长的影响。实验表明，在黑暗中，在添加有1．5mg/L2，4-D，1mg/L 6BA和0．5mg/L BA的MS培养基上，夏季取样的茎段，愈伤组织诱导率可达100％。     

西洋参组织培养及愈伤组织中人参皂苷Rg1和Rb1含量分析

用西洋参(Panax quinquefolium L.)根作为外植体进行愈伤组织诱导,通过不同的培养基和激素配比实验,发现2.0mg/L 2,4-D 0.5mg/L 6-BA适合西洋参愈伤组织的诱导,愈伤组织在MS 2.0mg/L 2,4-D 0.5mg/L 6-BA培养基上生长较快,而在NB 2.0mg/L 2,4-D 0.5mg/L 6-BA培养基上细胞培养物中人参皂苷Rg1和Rb1含量较高,分别占干重的1.40%和0.24%.     

甘蓝型油菜萝卜胞质不育恢复材料测交F4代的快繁生根及愈伤组织诱导

利用油菜萝卜胞质不育恢复材料测交F4代种子，在附加各种不同激素浓度组合的MS培养基上访导丛生芽、生根及愈伤组织诱导，结果表明：在MS培养基中添加1．0mg/L6—BA_0.1mg/L NAA对诱导丛生芽有较好的效果，l／2MS培养基对小芽生根效果最好，在MS培养基中添加0．5mg/L 8-BA 0.1mg/L NAA 0.25mg/L GA3 0.1mg/L 2,4-D对诱导愈伤组织效果最好．     

黄毛草莓愈伤组织诱导条件优化

本研究分别以黄毛草莓叶片和茎尖生长点为外植体进行愈伤组织的诱导,并通过比较茎尖愈伤组织在不同培养基以及不同植物激素组合下的生长情况,为建立黄毛草莓高效快速的繁殖体系,筛选愈伤组织诱导的最适培养基奠定基础.结果表明,与1/2MS培养基相比,MS培养基作为基础培养基(0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA条件下)诱导的愈伤组织效果最佳;以MS为基本培养基,通过4因素3水平L9(34)正交实验研究不同浓度组合的4种植物激素对黄毛草莓愈伤组织诱导率的影响.结果表明2,4-D对黄毛草莓叶片愈伤组织的诱导影响最大.黄毛草莓叶片愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.4 mg/L TDZ+0.2 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L NAA;NAA对黄毛草莓茎尖愈伤组织的诱导影响最大,黄毛草莓茎尖愈伤组织诱导的最优培养基为MS+0.2 mg/L TDZ+0.6 mg/L 6-BA+0.15 mg/L 2,4-D+0.6 mg/L NAA.     

碱蓬愈伤组织的诱导及继代生长

本实验首先在MS基本培养基或A号培养基（MS BA0.2mg/L NAA0.1mg/L)上培养出盐地碱蓬的无菌苗，然后在MS基本培养基中添加不同的激素种类及浓度配比，对所培养的无菌苗的下胚轴和叶进行愈伤组织的诱导与继代。结果表明：3号培养基（MS 2，4-D0.4mg/L BA0.5mg/L)是诱导和继代下胚轴的最适培养基，也是继代叶的最适培养基；12号培养基（MS 2，4-D1mg/L BA0.4mg/L）是诱导叶的最适培养基。继代数月后得到了生长旺盛、疏松、呈乳白色的愈伤组织。     

青大1号紫花苜蓿愈伤组织的诱导

为了探讨青大1号紫花苜蓿愈伤组织的最佳诱导条件,本文以MS培养基为基本培养基,分别选用青大1号紫花苜蓿的种子、无菌苗的叶片、根为外植体,通过改变MS培养基中生长素(2,4-D)和细胞分裂素(6-BA)的配比以及光照条件,研究影响紫花苜蓿愈伤组织形成的条件因素。结果表明:在25℃光照/黑暗(16 h/8 h)条件下,选用种子为外植体,在添加40μmol/L 2,4-D和15μmol/L 6-BA的MS培养基上愈伤组织诱导率为92.5%;选用叶片为外植体,在添加45μmol/L 2,4-D和10μmol/L 6-BA的MS培养基上愈伤组织的诱导率为45%;选用根为外植体,在添加10μmol/L2,4-D和2.5μmol/L6-BA的MS培养基上愈伤组织的诱导率为40%;全日照或者全黑暗都不利于紫花苜蓿愈伤组织的诱导。继代培养发现,25℃光照/黑暗(16 h/8 h)条件下,10μmol/L 2,4-D的MS培养基上最适宜紫花苜蓿的愈伤组织继代生长。青大1号紫花苜蓿愈伤组织形成的最佳组合为:选用种子为外植体,25℃光照/黑暗(16 h/8 h)条件下,添加40μmol/L 2,4-D和15μmol/L 6-BA的MS培养基进行诱导,10μmol/L 2,4-D的MS培养基进行继代生长。     

白芨愈伤组织诱导研究

目的:以白芨假鳞茎为培养材料,进行愈伤组织诱导和抗褐化研究.方法:使用兰科常用培养基MS,B5,KC分别作为基础培养基,应用正交试验方法设计生长调节剂配比.结果:当基础培养基为MS培养基时,并且6-BA1.5mg/L+2,4-D3.0mg/L时,愈伤组织诱导率最高,达73.3%.另外,添加活性炭可防止外植体褐化:活性炭含量为1.5g/L时,褐化率为44%,愈伤组织诱导效果最好;活性炭含量为3.0g/L时,褐化率最低为11%,愈伤组织诱导效果不好.结论:白芨愈伤组织诱导的最佳培养基为MS+6-BA1.5 mg/L+2,4-D3.0mg/L+AC2 g/L.     

胀果甘草愈伤组织培养及甘草酸含量分析

将胀果甘草的根、胚轴、子叶分别接种到含有不同激素组合的MS培养基上 ,在光照或黑暗下培养 .将根接种到液体培养基中培养 .结果发现不同的激素组合对愈伤组织生长和甘草酸质量分数的影响是不同的 .首先 ,随着 2 ,4D质量浓度上升 ,愈伤组织生长状况下降 ,甘草酸质量分数却增多 ,2 ,4D质量浓度为 4 .0时愈伤组织中甘草酸质量分数比生药中的增加 18.9% .加入BA或KT后 ,甘草酸含量明显增多 ,结果显示愈伤组织的生长与甘草酸的质量分数不成正相关 .其次 ,光照培养的愈伤组织比黑暗培养的生长快 ,但甘草酸含量低于黑暗培养 .第三 ,悬浮培养条件下 ,离体根培养物产生大量须根 ,根培养物中甘草酸质量分数明显高于其他培养物 ,比生药增多 4 3.3% ,反映出不同培养物产生甘草酸的能力不同 ,其中以离体根更适于甘草酸的合成 .     

驱蚊香草愈伤组织的诱导和增殖

以驱蚊香草（Pelargonium graveolens）的幼嫩叶片为外植体,接种于附加不同浓度的NAA、2,4-D、6-BA、KT及其组合的MS固体培养基上,结果表明：单独使用4种植物生长调节物质对驱蚊香草愈伤组织的诱导在一定浓度范围内都有效果,其中单独使用KT时效果不太明显;最佳的组合培养基为MS＋2,4-D0．2mg／L＋6BA0．5mg／L．在黑暗和光照培养条件下．愈伤组织的增殖呈“S”型,且生长周期均为30d．     

长春花愈伤组织的诱导和增殖

以长春花(Catharanthus roseus (L.)Don)幼嫩叶片作为外植体．接种于附加不同浓度的NAA,2,4-D、6-BA、KT及其组合的MS固体培养基上,结果发现除单独使用KT不能产生愈伤组织外,其它3种单独使用时,在一定的浓度范围均有愈伤组织产生;最佳的组合培养基为MS NAA 0．5mg／L 2,4-D0．5mg／L 6-BA2．0mg／L．进一步研究发现,在黑暗和光照培养条件下,愈伤组织增殖呈“S”型,且生长周期均为27d。     

不同培养条件对益母草悬浮培养细胞生长的影响

测定了不同的基本培养基,不同的激素水平,不同的糖含量以及不同的初始接入量对益母草悬浮培养细胞生长的影响．结果发现MS培养基最益于悬浮培养细胞的生长,3％的蔗糖水平细胞的生物量增长率最大．在初始接入量为6g／L时细胞增殖最快,在低接入量的情况下细胞停止生长．在6-BA无论与2,4-D组合还是与NAA组合,均在细胞分裂素2mg／L和生长素0．5mg／L时悬浮培养细胞的增殖率达到最大．研究结果为细胞培养生产益母草生物碱提供参考依据．     

甘薯愈伤组织的诱导、生长调节及原生质体培养

甘薯叶片培养在附加NAA0.01-1.0/ZT0.01-10mg/L的MS培养基上可以100％地诱导产生愈伤组织,NAA1.0/ZT0-0.1mg/L可诱导叶片产生根。经HPLC测定,甘薯叶片内源生长素含量为480ng/g·FW,可能与甘薯叶片易诱导生根有关。在MS培养基上诱导产生的甘薯愈伤组织质地致密、生长缓慢,当继代于高NO_3~-低NH_4~+含量的改良MS培养基上就可转变为疏松、生长迅速的愈伤组织。用疏松愈伤组织酶解出了大量原生质体,并培养再生成了愈伤组织块。     

不同光质对47号山药零余子愈伤组织诱导的影响

以47号山药脱毒试管苗诱导的零余子为材料,研究了光质和培养基组合对愈伤组织诱导形成时间及诱导率的影响,再将其培养在最佳培养基中,研究不同光质对愈伤组织鲜重、干重和生长率的影响.结果表明,从愈伤组织诱导形成的时间和诱导率方面,红光与MS+6-BA 2mg.L-1+2,4-D 2mg.L-1组合最佳,第6d开始形成愈伤组织,30d时愈伤组织诱导率达到100%;从愈伤组织的生长方面,白光和红光有利于愈伤组织鲜重的增加,白光和黄光有利于愈伤组织干物质的积累,红光和黄光有利于愈伤组织生长率的提高;而绿光则起了抑制作用.     

胀果甘草愈伤组织生长和多糖合成的调控

为了研究培养基基本成分、碳源以及离子浓度对甘草愈伤组织生长和多糖合成的影响,以MS,6,7-V为基本培养基,改变碳源、PO43-及Ca2+浓度,分析胀果甘草愈伤组织生长及多糖产量.结果表明:MS培养基附加蔗糖最利于甘草愈伤组织生长,6,7-V培养基虽利于甘草多糖的合成但不利于愈伤组织生长从而影响多糖产量.当培养基中PO43-浓度为1.25mmol/L、Ca2+浓度为2.99mmol/L时,甘草愈伤组织生长量积累最高,同时对多糖的生物合成也最为有利.高浓度的PO43-和Ca2+有利于甘草多糖的合成,但不利于愈伤组织的生长.研究结果为利用生物工程手段进行甘草多糖的产业化生产提供参考数据.     

植物生长调节剂对黄芪愈伤组织中次生代谢物质含量的影响

以膜荚黄芪幼叶为外植体,运用正交设计研究2,4-D、6-BA和NAA等3种植物生长调节剂组合对愈伤组织生产黄芪黄酮和黄芪皂苷的影响．结果表明对黄芪黄酮合成的影响顺序是：NAA〉6-BA〉2,4-D;对黄芪皂苷合成的影响顺序是：2,4-D〉6-BA〉NAA．生产黄芪黄酮和黄芪皂苷的最佳培养基分别为;MS＋2,4-D（0．5mg·L^-1）＋6-BA（1．0mg·L^-1）＋NAA（2．0mg·L^-1和MS＋2,4-D（2．0mg·L^-1）＋6-BA（2．0mg·L^-1）＋NAA（1．0mg·L^-1）．细胞伸长有利于愈伤组织中次生代谢物质的合成．     

南方红豆杉组织培养和紫杉醇含量测定

比较了从南方红豆杉的芽及幼茎诱导愈伤组织的情况,并对愈伤组织的增殖条件进行了研究,利用HPLC方法测定了愈伤组织合成紫杉醇的能力,结果表明以芽作为外植体在附加2．0mg/L 2,4-D 和0．5mg/L NAA的MS培养基上,产生愈伤组织的速度较快,诱导效果最好,第5天即有愈伤组织发生,且诱导率可达100％,附加0．5mg/L,2,4-D,1.0mg/L NAA和0．5mg/L KT的B5培养基较适合愈伤组织的增殖,生长率达7．74g/L,紫杉醇含量达干重的0．0098％。