绿色木霉固态发酵产纤维素酶条件及酶性质的研究

对绿色木霉 Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａ　ｖｉｒｉｄｅ９４０５固态发酵产纤维素酶的条件及酶的性质进行了研究。结果表明,最适产酶条件为：秸秆粉与麸皮的比 ７：３;玉米秸秆粉培养基含水量２５０％;花生皮粉培养基含水量１５０％;ｐＨ４．０～４．５;温度３０℃;周期７２ｈ。在玉米秸秆粉固体培养基上,所产纤维素酶ＣＭＣ活力为１３８６ｕ／ｇ,ＦＰＡ活力为２１７ｕ／ｇ,棉花糖化力为３２５ｕ／ｇ。必作用的最适条件为ｐＨ４． ５～５． ０,温度 ５０℃;在 ４５℃以下, ｐＨ３． ５～６． ０之间比较稳定,室温放置半年,酶活保存率在９０％以上。     

里氏木霉DWC1纤维素酶的研究

实验对纤维素酶高产菌株里氏木霉ＤＷＣ１的最佳产酶条件进行了研究。且分析了菌株在不同的营养及培养条件下的产酶情况。ＤＷＣ１菌株的最佳液体培养条件如下：温度（２５～２９）℃，初始ｐＨ５．０，发酵时间（５～７）ｄ。在此培养条件下菌株的ＣＭＣ酶活及滤纸酶活可分别达到４８３．３ｍｇ／（ｍｌ·３０ｍｉｎ）和１３６．７ｍｇ／（ｍｌ·ｈ）。     

芜青中谷氨酸脱羧酶（Gad）酶性质的时空差异

该文对芜青中谷氨酸脱羧酶(Gad)粗酶的提取和优化、酶活力最适反应条件、时空分布差异及光照影响等进行对比分析,同时利用超高效液相色谱法技术(UPLC)分析测定反应产物γ-氨基丁酸(Gaba)的含量.实验结果表明,提取Gad粗酶时加入纤维素酶能提高约70%酶活力.在最适条件对比实验中,对芜青芽苗、块根、茎生长点、茎及顶端分生组织分别进行测定,其中芽苗与顶端分生组织中的酶活力较高.光照对萌发中芽苗的Gad酶活力有较大影响,避光条件下酶活力下降约75%.结果表明,芜青芽苗Gad酶活力好且易于获取,转化谷氨酸反应生成γ-氨基丁酸的转化率高.     

拟除虫菊酯对昆虫ATPse的影响研究

美洲大蠊中枢神经系统ＡＴＰａｓｅ活力测定的最适应条件是：对于Ｎａ＋Ｋ＾＋－ＡＴＰａｓｅ,蛋白质含量５－１０μｇ,ｐＨ值７．０,反应温度３０℃,反应时间１５ｍｉｎ．Ｋｍ和Ｖｍａｘ分别为５．３８＊１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ和１４３．７５ｎｍｏｌ／ｍｉｎ．ｍｇ＾－１,Ｃａ＾２＋－Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰａｓｅ基本相同。     

微环境中脂肪酶催化椰子油水解作用研究

在ＡＯＴ／异辛烷／磷酸盐油包水型微乳液中，研究了脂肪酶催化椰子油的水解反应．并与聚乙烯醇（ＰＶＡ）－椰子油乳化液体系进行了比较．结果表明，微乳液的结构对酶的活性有很大影响，微乳液中酶促反应的最佳条件为ｐＨ＝７．５，Ｗ０＝１１，Ｔ＝３５℃．微乳液中的酶促反应符合米氏方程．由于微乳液体系中油水比界面很大，酶促反应速率明显高于其在乳化液中的反应速率．     

用诱导剂在PVA介质中研究锰(Ⅱ)催化氧化灿烂绿显色反应

提出锰（Ⅱ）在诱导剂存在下，ＰＶＡ介质中用高碘酸钾氧化灿烂绿染料的显色反应电子光谱，反应的最佳条件（ｐＨ＝５．７，ＫＩＯ４和灿烂绿浓度各为２．００×１０－３ｍｏｌＬ－１，４．５８×１０－２ｍｏｌＬ－１等）．在３．５～６．５ｍｉｎ之间吸光度与时间呈线性关系，Ｍｎ（Ⅱ）离子浓度在０～０．０６μｍｏｌＬ－１范围内遵守比尔定律，测得摩尔吸光系数ε４７０＝７．２×１０６，是一超灵敏显色反应，显色稳定性较好．     

木聚糖降解菌的筛选和木聚糖酶性质的研究

筛选两株生长快、产木聚糖酶活力高的菌种；黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｎｉｇｅｒ，ＡＮ０１）、链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｓｐ．Ｓｔｒ７Ｂ），酶活力分别达１２８ｍｇ／Ｌ·ｍｉｎ和１７６ｍｇ／Ｌ·ｍｉｎ；酶反应最适温度分别为６０℃与５０℃；最适ｐＨ值为５．０和６．０，并分别在ｐＨ２．２～５．０，５．８～６．４酶活性稳定；在６０℃条件下保温１．５ｈ，酶活力分别剩余２０．５％，８８．５％，其中ＡＮ０１株原酶液在９０℃保温１０ｍｉｎ，活力仍剩余１４．５％．Ｃｕ２＋对酶活表现出极强抑制，Ｆｅ２＋，Ｍｇ２＋，Ｃａ２＋等离子则有促进作用；用纸层析法探讨了不同培养时间各种产物产生的情况．     

Trichoderma Koningii V-6菌体氨基葡萄糖与生物量的关系

研究了康氏木霉（ＴｒｉｃｈｏｄｅｒｍａＫｏｎｉｎｇｉ）菌体中氨基葡萄糖ＮＧ与菌体量的相关性,在一定的培养条件下,ＮＧ含量与菌体量呈线性关系．在１００℃,８．５ｍｏｌ／ＬＨＣｌ水解４５ｍｉｎ,菌体中的ＮＧ能够比较完全地释放出来．探讨了影响固态发酵过程中测定菌体量的诸多因素．孢子中的ＮＧ含量约占菌体中的２２．５％,作为培养基主要成分的玉米皮、麸皮的ＮＧ均仅占４．６％．通过测定ＮＧ,能比较准确地估测固体曲的菌体量,从而为研究纤维素酶固态发酵过程中菌的生长代谢与酶合成的关系,提供一个简便可靠的方法．     

生淀粉糖化菌NL—3的发酵条件

以黑曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｕｓｎｉｇｅｒ）５２３原生质体为对象,经激光、紫外线和亚硝基胍复合诱变,选育出高产生淀粉糖化酶突变株黑曲霉ＮＬ３,其生淀粉酶活力为１５６Ｕ／ｍｌ．产酶最适培养条件为：起始ｐＨ４５,３０℃,９６ｈ产酶量达最高．Ｋ＋,Ｍｇ２＋对ＮＬ３产生淀粉糖化酶有促进作用;Ｚｎ２＋对产酶有抑制作用．酶的最适作用条件为：以玉米淀粉为底物的最适温度５０℃,最适ｐＨ４５;以甘薯淀粉、马铃薯淀粉为底物时最适温度６０℃,最适ｐＨ４０～４５．酶在６０℃保温１５ｍｉｎ,玉米淀粉为底物时酶剩余活力为８０％;甘薯淀粉、马铃薯淀粉为底物时酶剩余活力为９８％．     

纤维素酶活力的测定

本实验是用改良梅尔茨法测定纤维素酶的活力,在ｐＨ＝５．２,Ｔ＝３０℃,ｔ＝１６ｈ的条件下,测得纤维素酶的活力为１０００－１２００ｕ／ｇ之间。     

灵芝液体发酵产纤维素酶的提取及性质分析

通过对比实验，找出了较适合灵芝液体发酵并产生纤维素酶的PDY培养基：马铃薯200g，葡萄糖20g，酵母膏5g，加水至1000mL，并对纤维素酶的酶活力进行了测定。发酵液经过硫酸铵盐析，纤维素酶被纯化了1．61倍，通过快速液相色谱的分离纯化，酶被纯化了1．96倍，酶活分别达到5．68和6．89。经过快速液相色谱分离纯化，有6个组分峰。其中第一、第二峰分离较好，含量较高。对灵芝纤维素酶的氨基酸组成进行了分析，灵芝纤维素酶并经紫外-可见光吸收光谱和红外吸收光谱对纤维素酶进行了分析。     

黑曲霉β-葡萄糖苷酶菌株的筛选

采用牛津杯平板透明圈法对研究室保藏的17株黑曲霉菌株进行了β-葡萄糖苷酶产生菌初筛,得到5株透明圈相对明显的菌株,经固态发酵产酶复筛及相关纤维素酶活力的检测,选出一株β-葡萄糖苷酶酶活力高、且纤维素酶活力也较高的菌株niger-2,其β-葡萄糖苷酶酶活力为78.75 U/g、纤维素酶(CMC)活力为312.15 U/g...     

多菌灵对新疆灰漠土壤中六种酶活性的影响

采用室内模拟的方法研究5种浓度多菌灵（0、2．5、5．0、10．0和20．0mg·kg^-1干土）对土壤中纤维素酶、蔗糖酶、脲酶、碱性磷酸酶、过氧化氢酶、蛋白酶活性的影响。结果表明：土壤纤维素酶活性随多菌灵浓度的增加（2．5～20．0mg·kg^-1）而升高;多菌灵对脲酶也有显著的激活作用,其中10mg·kg^-1多菌灵处理对脲酶的激活率最高。多菌灵对土壤碱性磷酸酶和蛋白酶活性的影响随多菌灵处理浓度和时间变化而变化。多菌灵处理5d内,土壤蔗糖酶活性显著降低,且抑制率与多菌灵浓度呈正相关,土壤过氧化氢酶活性受多菌灵抑制作用显著,尤其是在多菌灵处理26d以后,土壤过氧化氢酶活性随多菌灵浓度的增加显著降低。因此,可以用蔗糖酶活性来评价多菌灵施用后1～5d在土壤中的残留情况,以过氧化氢酶活性来评价多菌灵施用后26～47d在土壤中的残留情况。     

几种糖对纤维素酶热稳定性影响的研究

研究了几种糖对纤维素酶热稳定性的影响。研究发现，20℃下海藻糖和葡萄糖都能较好地保护酶的活性，蔗糖次之，而葡聚糖则不起作用。高温下葡萄糖和蔗糖不但不能保护酶的活性，反而起到破坏作用，而海藻糖和葡聚糖则对酶有较强的保护作用。初步分析，海藻糖作用机理是羟基能替代水分子同酶结合，并且能在酶分子空隙中和酶分子周围形成玻璃态，将酶分子支撑和包裹起来。因此海藻糖能在较宽的温度范围内阻止酶分子空间结构发生变化，从而提高了酶的热稳定性。     

锯缘青蟹胚胎发育过程中几种水解酶活力的比较研究

测定了锯缘青蟹胚胎发育过程中九个发育期的四种水解酶比活力。结果表明，蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶在青蟹的整个胚胎发育过程中均有活力，１－８期活力低但较稳定，纤维素酶则到胚胎的第八期才表现出活力。临孵化前的第九期，胚胎的掾酶活力有所提高，而其余三种水解酶活力则有显著提高，表现为开口摄食饵料作准备。胚胎水解酶活力的高低可作为幼体能否培育成功的一项良好指标。     

氨基二氧化硅固定化纤维素酶及其特性

以氨基化二氧化硅为载体, 戊二醛为交联剂, 采用共价交联法制备固定化纤维素酶, 最佳条件为交联剂浓度4% (体积比), 交联时间60分钟, 给酶量35 U/g载体, 固定化反应时间5小时。所得固定化酶对pH和温度的敏感性降低, 时间稳定性和热稳定性均优于游离酶。热动力学研究表明, 固定酶的失活活化能(Ed)、失活焓(ΔH^*)和失活自由能(ΔG^*)均高于自由酶, 固定化减小酶失活反应速率, 降低酶失活反应趋势。     

上海市大气环境中PM2.5/PM10时空分布特征

针对上海市颗粒物的污染和防治问题,利用2014年4月14日—2015年3月24日10个国控监测点的PM_2.5和PM₁₀小时数据及对应的气象因素资料,以PM_2.5质量浓度占PM₁₀质量浓度的比例为研究对象,使用聚类分析和相关性分析PM2.5/PM₁₀的时空分布特征. 结果表明:P_2.5和PM₁₀的季节高低为冬>春>秋>夏,PM_2.5/PM₁₀的季节分布在不同区域存在差异性. PM_2.5/PM₁₀的日变化呈现双峰型趋势,峰值出现在05:00和14:00左右,上午PM_2.5/PM₁₀高于下午. 颗粒物质量浓度及PM_2.5/PM₁₀具有明显的“周末效应”,这与车辆通行政策与人类作息时间变动相关. 在空间分布上,颗粒物质量浓度及PM_2.5/PM₁₀均表现为背景站>浦西站>浦东站.     

参环毛蚓肠道内源性纤维素酶的分离纯化及酶学性质分析

通过对参环毛蚓肠道组织提取液进行DEAE阴离子交换及凝胶过滤层析,获得参环毛蚓单一的内源纤维素酶的活性组分.根据AlpHaEaseFCTM软件计算出该组分分子质量约为45 ku,命名为Cx1.羧甲基纤维素钠(so-dium carboxymethylcellulose,CMC)法对Cx1进行酶学性质分析.分析结果显示:对于底物羧甲基纤维素钠,Cx1的米氏常数(Km)为0.289 mg/mL,Vmax为0.446 U.mL-1.min-1,反应最适温度为55℃,最适pH为6.0,在40~60℃、pH5.0~8.0具有较好的热稳定性和pH稳定性,其相对酶活力都能保持在55%以上.Ag+和Ba2+对Cx1起显著激活作用,K+、Zn2+、Mg2+、Ca2+、NH4+、Ni2+、Na+、Pb2+部分抑制酶活性,Cu2+离子对Cx1有完全抑制作用,而Fe2+对酶活力无明显影响.     

不同糖对纤维素酶保护的机理研究

旨在通过测量海藻糖、葡萄糖、蔗糖、葡聚糖、纤维素酶以及纤维素酶分别与这些糖的混合物的红外光谱和差示扫描量热谱图，研究糖和纤维素酶分子间的相互作用，推测海藻糖对纤维素酶保护的机理。结果表明，海藻糖的羟基同酶分子以氢键的形式结合提高了酶的热变性温度，增加了酶的热稳定性。另一方面，海藻糖分子包裹在酶分子周围，或填充在酶分子的空间结构内，特别是酶的活性部位附近，并形成玻璃态，将酶蛋白的空间结构固定住而避免酶的失活。     

纤维素酶益生菌的选育及产酶条件

从土壤中筛选出一株产纤维素酶的细菌B1,通过形态观察、生理生化特征及16S rDNA同源性序列分析,鉴定为蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus).经微波-硫酸二乙酯复合诱变筛选出正突变株B1-1,其纤维素酶酶活达到0.373 U/mL,经5次传代后,该菌株遗传性状稳定,且胃肠道耐受性良好;B1-1菌株最佳产酶条件为20 g/L麦芽糖,2.5 g/L硫酸铵,pH值为5.0,37 ℃下培养36 h.