4种促性腺激素释放激素抗体的制备、鉴定和纯化

用3-马来酰亚胺基苯甲酸琥珀酰亚胺酯(MBS)法将人工合成的4种不同来源的促性腺激素释放激(GnRH)(即章鱼GnRH、海鞘GnRH-Ⅰ、七鳃鳗GnRH-Ⅰ和七鳃鳗GnRH-Ⅲ)分别与匙孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联后作为抗原,免疫新西兰大白兔获得GnRH抗体.用间接ELISA方法检测抗血清效价,并用Western blot鉴定其特异性.制备抗原肽亲和纯化柱,纯化多克隆抗体.结果显示,4种多克隆抗体效价高达1∶500 000(体积比),并能和相应的GnRH多肽特异性结合,纯化后的抗体在SDS-PAGE显示为单一条带.通过上述方法,获得4种高效价、高纯度的GnRH抗体,为低等动物GnRH的研究提供了理论依据.     

度夏仿刺参病原菌伯麦罗氏弧菌的分离鉴定和特征研究

以患有腐皮综合征的度夏仿刺参(Apostichopus japonicus)为对象,从其体壁病灶处分离纯化获得一株病原细菌.通过传统细菌鉴定方法对病原菌的形态学、生理生化特征和培养特征进行研究;以16SrRNA基因测序为基础,结合基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)进行鉴定,结果表明该菌株在分类上属于伯麦罗氏弧菌(Vibrio pomeroyi);人工感染实验验证了不论是注射感染还是浸浴感染,该菌株均能导致仿刺参发病甚至死亡.此外,将本次实验获得的伯麦罗氏弧菌菌株SUS(V.pomeroyi SUS)与伯麦罗氏弧菌的其他菌株,如V.pomeroyi LMG20537T(典型菌株)、V.pomeroyi 929进行比较,探讨了来自不同海域的菌株生理生化特征与环境因子之间的关系.研究结果显示:伯麦罗氏弧菌为南移度夏仿刺参腐皮综合征的病原菌,而且表明MALDI-TOF MS技术结合微生物数据库MALDI Biotyper系统的鉴定方法准确、便捷、重复性高,非常适合于传统鉴定方法易混淆的种类鉴别,这为南移仿刺参的疾病检查和预防奠定了基础.     

设施养殖条件下不同因素对拟穴青蟹幼蟹存活率的影响

在水温25.2±1℃、连续充气和pH 7.8～8.03条件下,以蚊帐布和筛绢网制成网笼作为养殖设施,以7个盐度梯度、6种养殖密度和2种网衣材质的3因素多水平实验设计进行幼蟹养殖试验.结果表明:幼蟹存活率均在盐度25时最高,分别为C1 95.0%,C2 90.5%,盐度高于或低于25均有下降趋势,C1和C2在各盐度梯度组累计存活率均差异显著(p＜0.01),而在同一盐度梯度下差异不显著(p＞0.05);C1至C2和C2至C3在盐度5、30、35时发育时间为120±2h,而在盐度10、15、20、25时为96±2h,同时在盐度10、15、20、25组中幼蟹蜕皮的同步性优于盐度5、30、35组.在不同密度条件下,幼蟹均在密度为637 ind/m2时存活率最高,且C1的平均存活率(89.6%)比C2(84.5%)高,C1和C2在同一密度梯度下的存活率差异极显著(p＜0.01).在蚊帐布和筛绢网2种材质养殖容器中,C1的平均存活率分别为90.4%和88.7%.差异不显著(p＞0.05),而C2的平均存活率分别为86.6%和82.6%,差异极显著(p＜0.01),表明C1对养殖容器材质的选择性不强.综上所述,在盐度为25,养殖密度为637 ind/m2,蚊帐布为网衣材质的实验条件下,幼蟹生长最,存活率可达到最高值.     

中华假磷虾线粒体DNA COⅠ基因片段序列分析

采用苯酚-氯仿提取、异丙醇沉淀提取中华假磷虾基因组DNA;以相应引物经PCR扩增得到线粒体DNA COⅠ片段;PCR产物采用化学法与载体(pGEM-T Easy Vector)重组基因、热休克法转化重组质粒至感受态大肠杆菌(JM109)、氨苄LB培养基扩大培养;测序.结果表明,中华假磷虾线粒体COⅠ碱基709 bp,其碱基组成A、T、G、C含量分别为28.59%、35.35%、17.61%和18.45%(国际基因库索引号AY754819);与同科内其它3属10种磷虾的mtCOⅠ基因片段核苷酸组成相似.     

浮游动物对重金属的累积及转移

原于吸收法的测定结果表明,厦门海区几种常见浮游动物的主要重金属含量因种类而异,含Zn量30.40-291.4μg/g.dw含Cu3.620-37.62μg/g.dw,含Cd最低(0.025-1.38μg/g.dw).经一定时间培养的中华哲水蚤的累积Cu量随水体Cu浓度的增大和培养时间的延长而提高,但Cd含量则几乎不变,中华哲水蚤粪块含Cu量的比用作饵料的三角指藻高2.7-29倍,ECd含量略低于藻.桡足类可从粪块中排除相当部分进入体内的重金属,这对海洋环境的金属下移具有重要作用.     

锯缘青蟹(Scylla serrata)脑中FSH和LH的免疫识别

为研究甲壳动物卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的存在与分布，我们应用免疫细胞化学技术对FSH和LH在锯缘青蟹(Scylla serrata)脑中的分布进行了定位研究.结果显示：在近成熟期雌蟹和精子细胞期雄蟹脑中检测到FSH中等免疫阳性反应和LH弱免疫阳性反应，免疫阳性细胞分布在前脑的前中胞体群和后脑的后侧胞体群.发育早期雌蟹和精原细胞期雄蟹未见FSH和LH免疫阳性反应.研究结果表明：FSH和LH存在于锯缘青蟹脑中并具有发育阶段特异性，可能参与性腺发育及精卵成熟的调节.     

锯缘青蟹生殖肢腺体的结构与功能

青蟹雄性腹肢具有生殖肢腺体(GTG).雄性第一腹肢向末端逐渐变成一细薄的弯曲突起.腺体主要集中于腹肢距基部长度的2/5处,即第二腹肢入口处的附近,末端也有少量分布.腺体在组织学上和玫瑰状的皮腺相似,群绕着射精管腔.经染色表明腺体含有中性粘多糖(NMPS)和酸性粘多糖(AMPS),同一批腺体,甚至同一个腺体两种类型糖类的染色状况有异.腺体由分泌细胞和管细胞组成,管细胞含有一导管,多个导管形成网络.导管末端通向交接器内壁表皮开孔处,孔径约为2.5～3.5 μm,这些孔通向交接器管腔,孔中及开口处分泌物的染色性质和腺体中相似.第二腹肢也具有腺体,但分布较少,且不太集中.GTG分泌物可能具有几个复杂的功能,其中低粘度的NMPS可能有助于加速强粘性精液通过狭窄的交接器管腔作用,而高粘度的AMPS功能则更为复杂.     

锯缘青蟹胚胎复眼发生的形态观察

采用光镜和电镜技术。观察了锯缘青蟹胚胎复眼发生的过程，并将之划分为4个阶段：复眼色素带出现期，复眼色素带斑状期，复眼色素带条状期和复眼色素带核仁期．刚孵出幼体的复眼呈黑色半球形，着生在粗短的眼柄原基上。小眼表面观呈六边形．复眼发生和胚胎颜色变化密切相关，复眼可作为评判锯缘青蟹胚胎发育阶段的重要指标，为其科学人工育苗提供指导．     

雌激素受体在锯缘青蟹视神经节的免疫识别

利用免疫细胞化学SABC法对锯缘青蟹(Scylla serrata)视神经节雌激素受体(ER)进行定位研究.结果表明:视神经节的视外髓、视内髓和视端髓存在ER免疫阳性细胞.视神经节存在的ER免疫阳性细胞可以为雌激素提供结合位点.本研究为雌激素参与视神经节神经内分泌调节作用提供了形态学依据.     

海洋浮游桡足类滞育及其生理生态学研究进展

简述了海洋浮游桡足类滞育及其生理生态学的研究进展,总结了厦门大学海洋学系在这一研究领域的研究成果,包括滞育卵的形态与孵化、桡足类的季节演替以及桡足类滞育的生理生态学3个方面的研究.