4种促性腺激素释放激素抗体的制备、鉴定和纯化

用3-马来酰亚胺基苯甲酸琥珀酰亚胺酯(MBS)法将人工合成的4种不同来源的促性腺激素释放激(GnRH)(即章鱼GnRH、海鞘GnRH-Ⅰ、七鳃鳗GnRH-Ⅰ和七鳃鳗GnRH-Ⅲ)分别与匙孔戚血蓝蛋白(KLH)偶联后作为抗原,免疫新西兰大白兔获得GnRH抗体.用间接ELISA方法检测抗血清效价,并用Western blot鉴定其特异性.制备抗原肽亲和纯化柱,纯化多克隆抗体.结果显示,4种多克隆抗体效价高达1∶500 000(体积比),并能和相应的GnRH多肽特异性结合,纯化后的抗体在SDS-PAGE显示为单一条带.通过上述方法,获得4种高效价、高纯度的GnRH抗体,为低等动物GnRH的研究提供了理论依据.     

锯缘青蟹(Scylla serrata)脑中FSH和LH的免疫识别

为研究甲壳动物卵泡刺激素(FSH)和黄体生成素(LH)的存在与分布，我们应用免疫细胞化学技术对FSH和LH在锯缘青蟹(Scylla serrata)脑中的分布进行了定位研究.结果显示：在近成熟期雌蟹和精子细胞期雄蟹脑中检测到FSH中等免疫阳性反应和LH弱免疫阳性反应，免疫阳性细胞分布在前脑的前中胞体群和后脑的后侧胞体群.发育早期雌蟹和精原细胞期雄蟹未见FSH和LH免疫阳性反应.研究结果表明：FSH和LH存在于锯缘青蟹脑中并具有发育阶段特异性，可能参与性腺发育及精卵成熟的调节.     

锯缘青蟹胚胎复眼发生的形态观察

采用光镜和电镜技术。观察了锯缘青蟹胚胎复眼发生的过程，并将之划分为4个阶段：复眼色素带出现期，复眼色素带斑状期，复眼色素带条状期和复眼色素带核仁期．刚孵出幼体的复眼呈黑色半球形，着生在粗短的眼柄原基上。小眼表面观呈六边形．复眼发生和胚胎颜色变化密切相关，复眼可作为评判锯缘青蟹胚胎发育阶段的重要指标，为其科学人工育苗提供指导．     

中华乌塘鳢消化道内分泌细胞的鉴别与定位

应用链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶免疫细胞化学方法,对中华乌塘鳢消化道中的Som、5-HT、PP、VIP、SP和CT等内分泌细胞进行鉴别和定位.结果表明:Som细胞在贲门胃、中肠分布较多,食道与幽门胃较少.5-HT细胞在食道较为丰富,胃中次之,前肠较少.PP细胞仅分布于肠道,后肠居多,前肠、中肠较少.VIP细胞分布于食道及贲门胃,食道处较少.SP细胞在后肠较为丰富,前肠分布较少.CT细胞集中在胃部,前肠偶见,其余部位未发现.不同种类内分泌细胞的数量分布和形态特征存在一定的差异,本文对其可能的内分泌方式和功能进行了讨论.     

雌激素受体在锯缘青蟹视神经节的免疫识别

利用免疫细胞化学SABC法对锯缘青蟹(Scylla serrata)视神经节雌激素受体(ER)进行定位研究.结果表明:视神经节的视外髓、视内髓和视端髓存在ER免疫阳性细胞.视神经节存在的ER免疫阳性细胞可以为雌激素提供结合位点.本研究为雌激素参与视神经节神经内分泌调节作用提供了形态学依据.     

虾蟹亲体生殖生态学的研究

凡纳滨对虾、日本囊对虾和锯缘青蟹是我国海水养殖的重要种类.本文概述了作者近年来有关凡纳滨对虾、日本囊对虾和锯缘青蟹亲体生殖生态学方面的部分研究结果.     

水生动物细胞周期蛋白研究进展

细胞周期蛋白是真核细胞周期循环中主要的调控因子，参与细胞周期的精密调控，维持细胞正常生长及发育平衡．本文简述了细胞周期蛋白与水生动物卵子发生、早期胚胎发育的关系以及细胞周期蛋白在生殖过程的表达与调控．     

日本囊对虾电压门控钠通道基因克隆与组织表达

利用基因克隆等分子生物学技术,获得日本囊对虾(Marsupenaeus ja ponicus)的电压门控钠通道(voltage-gate sodium channel,VGSC)蛋白的部分eDNA序列,获得的片段核苷酸长度为2 877 bp,可编码954个氨基酸残基,总分子质量约为108.2 ku.与同源蛋白比较结果显示,日本囊对虾的VGSC序列与其他一些物种具有较高相似性,特别是跨膜蛋白结构域具有极高的保守性.基于VGSC氨基酸序列比对绘制的系统树基本能够反映出各物种间的进化关系.以RT-PCR法检测日本囊对虾VGSC的组织表达,结果显示VGSC表达与各组织的功能有极其密切的关系.VGSC mRNA在脑神经节中表达量最高,其次为肝胰腺,说明了钠通道在神经信号传导以及调节内分泌中都起到了重要的作用.     

中国鲎脑神经节5-羟色胺免疫组化的定位观察

中国鲎(Tachypleus tridentatus)是一种具有特殊研究意义的海洋动物.本研究应用免疫组织化学方法对中国鲎脑神经节中5-羟色胺(5-HT)的分布进行了定位观察,发现5-HT免疫阳性主要分布在视神经层和视神经髓的神经纤维,中间体以及蕈形体周边的细胞群中,而蕈形体中未发现免疫阳性.经比较,中国鲎5-HT的分布与美洲鲎(Limulus polyphemus)相似,而与昆虫、甲壳类存在一些区别.本研究可为中国鲎的神经生物学提供基础资料.     

锯缘青蟹消化系统内分泌细胞的免疫细胞化学定位

采用兔抗哺乳类Glu、SP、Gas、Pro、SOM、ACTH和PP等7种抗血清．应用链霉菌抗生物素蛋白一过氧化物酶免疫细胞化学技术，从锯缘青蟹的消化系统检测出前4种抗血清呈免疫阳性反应．Glu细胞分布于食道的皮腺、后肠肌层和肝胰腺．SP细胞位于后肠皮腺和肝胰腺．Gas细胞分布于食道和后肠的皮腺、贲门胃粘膜上皮以及肝胰腺．Pro细胞仅见于肝胰腺内．锯缘青蟹消化道粘膜上皮内分泌细胞少，这与脊椎动物内分泌细胞主要分布于消化道粘膜上皮的模式不同．肝胰腺具有4种内分泌细胞。提示了肝胰腺是锯缘青蟹体内重要的内分泌腺．