固态发酵生产饲用β-葡萄糖酶的产业化技术研究

采用黑曲霉菌株An08-752,经曲盘、发酵床(帘子床)、厚层通风制曲池进行固态发酵,产业化生产饲用β-葡萄糖酶,结果表明:通风曲池厚层通风发酵培养30～32 h,产β-葡聚糖酶最高,发酵酶活力达到1.15×105μ/g;发酵床发酵培养时间35～37 h,产β-葡聚糖酶最高,发酵酶活力达到1.28×105μ/g;曲盘发酵培养32～34 h,产β-葡聚糖酶最高,发酵酶活力达到1.36×105μ/g.     

纳豆激酶酶学性质的初步研究

通过(NH4)2SO4对NK分级盐析浓缩,发现用饱和度为65%的(NH4)2SO4盐析,浓缩10倍,NK回收率最高,可达到87.1%.对其纤溶活性研究表明,NK在40℃以下时,纤溶活性相对稳定,65℃以上时,活性迅速下降;pH<4时,显著抑制NK活性;Mg2+对其纤溶活性有显著激活作用,Zn2+,Ca2+,Fe2+和Cu2+对NK有不同的抑制作用,而Al3+则使NK活性完全丧失.     

抗沙门氏菌O8因子单克隆抗体的研制及初步应用

制备抗沙门氏菌O8因子单克隆抗体,建立C2、C3亚群沙门氏菌酶联免疫吸附分析检测方法.用加热灭活的纽波特沙门氏菌免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合建立分泌抗体的杂交瘤细胞株.用ELISA法检测及鉴定单克隆抗体,酶联免疫吸附分析法初步判断抗体应用于检测试剂的可能性.得到4株与沙门氏菌C2、C3亚群菌株发生反应的单克隆抗体细胞株,分别命名为6F2、7A2、8D8和8D9;4株抗体与肠道正常细菌和常见的致病细菌无交叉反应;单克隆抗体免疫球蛋白类型分别为小鼠IgG_1、IgG_3、IgG_(2b)、IgM,轻链均为kappa;用单克隆抗体7A2和8D8研制的酶联免疫吸附分析试剂盒,对沙门氏菌C2亚群的纽波特沙门氏菌、波那雷恩沙门氏菌和C3亚群的肯塔基沙门氏菌的最低检出值均可达到10~5cfu/m L.获得的单克隆抗体具有较高的特异性,有可能应用于生产检测C2和C3亚群沙门氏菌的酶联免疫吸附分析试剂盒.     

心肌肌钙蛋白I胶体金免疫层析快速检测法的建立

为建立一种快速、简单实用的检测心肌肌钙蛋白I的胶体金免疫层析法(GICA),用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,用鼠源抗cTnI单克隆抗体进行胶体金标记,采用胶体金免疫层析技术及双抗体夹心法原理检测心肌肌钙蛋白I,并对该方法进行敏感性、特异性和稳定性分析.结果:该方法能在10 min内完成检测;该试纸条仅与心肌肌钙蛋白I阳性样品发生特异性反应;检测心肌肌钙蛋白I的最低检出质量浓度为1.0 ng/mL;与化学发光免疫分析法(CLIA)对比检测63份临床标本,阳性符合率97.0%,阴性符合率100%,总符合率98%,试纸条性能稳定.     

天然食用色素色变的原因及其防护

天然食用色素由于具备低毒安全、色泽鲜艳等特点，备受人们青睐。但是，由于其自身的不稳定性给应用带来了诸多不便，笔者通过对影响色变因素的研究分析和论证，提出了相应的防护措施，为天然食用色素的合理应用提供了依据。     

反相高效液相色谱法测定培养基中苯磺隆

采用反相高效液相色谱法,对农药苯磺隆在MS培养基中含量变化进行分析,使用C18和紫外检测器,样品前处理采用二氯甲烷萃取后旋蒸甲醇溶解,苯磺隆质量浓度在25～200μg/mL之间有良好的相关系数(R2=0.999).培养基苯磺隆样品溶液标准偏差0.082,变异系数0.16%,平均回收率100.86%,能够准确测得培养基中苯磺隆含量变化.     

液体发酵饲料植物乳杆菌诱变育种的研究

通过紫外线诱变植物乳杆菌选育具有良好发酵性能的液体发酵饲料专用乳酸菌.试验中采用紫外线的最佳诱变时间为120s,并用溶钙圈法对诱变后的菌株进行初步筛选,在MRS-CaCO_3培养基上得到溶钙圈直径较大的菌株79株.通过对这79株菌株的液体发酵饲料进行乳酸含量的测定,最终得到一株乳酸高产菌株UR-3,显著提高了产乳酸量(p0.05),在液体发酵饲料中,该菌株产乳酸能力较出发菌株提高了44.53%.     

软腐白菜根系土壤中短稳杆菌的分离和鉴定

采用选择性培养基,从软腐白菜根系土壤中分离出产生香气的细菌,通过对菌株进行形态学观察、生理生化试验以及16S rRNA基因序列测定、比对分析和系统发育树构建,对该类群菌株进行初步分类鉴定.结果表明,12株产生烘焙香气细菌的形态学特征及生理生化特性与短稳杆菌(Empedobacter brevis)LMG 4011T(AM177497)一致,16S rRNA基因序列与短稳杆菌基因序列同源性达99.86%,初步鉴定该类菌为短稳杆菌.     

产纤溶酶菌株的分子鉴定及其液体产酶特点分析

通过对实验室分离筛选出的2株产纤溶酶能力较强的细菌菌株进行16S rRNA碱基序列测定,并与已发表的16S rRNA序列进行对比分析,确定2个菌株均属于枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis).在此基础上,对2个菌株液体发酵产纤溶酶的特点进行了对比分析.实验结果表明,2个菌株适宜的发酵产酶时间均为60～108 h.在优化的液体发酵条件下,2个菌株单位发酵液中纤溶酶平均产量可分别达到773.07 U/mL(菌株1)和962.28 U/mL(菌株2).     

抗沙门氏菌O4抗原单克隆抗体的研制及鉴定

制备抗沙门氏菌O4抗原单克隆抗体并鉴定其特性.用加热灭活的乙型副伤寒沙门氏菌免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合方法建立分泌抗体的杂交瘤细胞株.用包被沙门氏菌全菌和纯化的乙型副伤寒沙门氏菌LPS的间接ELISA法筛选杂交瘤细胞和鉴定抗体.其中3株杂交瘤细胞分泌的抗体初步判断为针对O4抗原的抗体,分别命名为1E12、2D5和4C2,这3株抗体与肠道正常细菌及常见的致病性细菌无交叉反应;单克隆抗体的免疫球蛋白类型分别为IgG1κ和IgMκ.获得的单克隆抗体具有较高的特异性,有可能用于B群沙门氏菌免疫学检测方法的建立.