铁线莲‘朱卡’组织培养技术及再生体系的建立

【目的】以铁线莲‘朱卡’(Clematis ‘Julka’)的带芽茎段为起始材料,通过组织培养方法建立再生体系。【方法】利用腋芽诱导—不定芽增殖—生根和愈伤组织诱导—增殖—分化—生根两种途径,建立该品种的组织培养再生体系,形成铁线莲‘朱卡’完整植株。【结果】铁线莲‘朱卡’组织培养最适宜灭菌条件为质量分数10%次氯酸钠溶液灭菌12min;带芽茎段诱导腋芽最适培养基为MS+NAA 0.1 mg/L+6-BA 1.0 mg/L,不定芽增殖最适培养基为MS+IBA 0.20 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+GA₃ 0.2 mg/L;带芽茎段诱导愈伤组织最适培养基为MS+NAA 0.05 mg/L+6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织增殖最适培养基为MS+NAA 0.20 mg/L +6-BA 2.0 mg/L,愈伤组织分化最适培养基为MS+NAA 0.03 mg/L+6-BA 3.0 mg/L;最佳生根培养基为1/2 MS+IBA 0.3 mg/L。【结论】首次用两种器官发生方法建立了稳定高效的铁线莲‘朱卡’再生体系。直接形成不定芽时增殖倍数可达5.52。诱导愈伤组织途径的器官发生中,愈伤组织分化率可达76.7%,分化不定芽平均数超过3。两种途径诱导生根率都在90%以上。     

“三月花”黄花菜的组织培养研究

采用单因素和正交实验方法对"三月花"黄花菜的组织培养技术进行了探索.结果显示:幼叶用0.1%升汞灭菌12 min时效果最佳,外植体污染率、死亡率均为0, 14 d后外植体启动率为62.5%.最佳愈伤诱导培养基为MS+2 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L 6-BA,外植体出愈率为86.67%;愈伤组织最适分化培养基为MS+2 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IBA,愈伤组织分化率达到80%,平均每块愈伤组织不定芽个数为1.72.最佳生根培养基为1/2 MS+0.5 mg/L NAA,生根率达到93.33%,平均每个芽苗生根数为5.83条,试管苗炼苗移栽后,成活率达95%.利用该组织培养技术,幼叶外植体通过愈伤组织途径获得"三月花"黄花菜再生苗.     

空调冷却水致病微生物处理研究综述

目前空调冷却水系统普遍受到了较为严重的污染,特别是军团菌对人群造成很大的安全威胁,也引起了人们的关注.通过查阅资料,介绍了国内外空调冷却水系统致病微生物调查现状,以及处理方法研究进展,有物理处理方法和化学处理方法,处理方法很多但是缺乏比较研究.对于空调水系统易于实施的紫外线灭菌和膜分离灭菌法进行了实验测试,实验结果表明:在一定条件下,紫外线法灭菌率为73.5%-91.9%,膜分离法灭菌率为47.9%-53.2%,紫外线灭菌效果明显比膜分离灭菌要好.     

瓦布贝母组织培养及生物碱的测定

为缓解川贝母的市场供需矛盾,本研究利用组织培养技术生产瓦布贝母再生鳞茎,探究了适宜的组织培养条件,并采取酸性染料比色法测定总生物碱.结果发现,鳞茎采用75%酒精约10 s和0.1%升汞15 min灭菌,外植体污染率最低;不同种类和浓度范围的激素能够影响外植体的启动和生长状况,NAA和6-BA浓度范围分别控制在0.5～2.0 mol/L,均能诱导出再生鳞茎;不同激素培养条件下,瓦布贝母再生鳞茎总生物碱存在差异,有超过一半的再生鳞茎总生物碱含量达到中华药典的规定要求,因此,组织培养是获取瓦布贝母活性成分的一种有效途径.     

樟树赣柠1号茎段组织培养研究

本研究拟建立樟树赣柠1号茎段组织培养技术,为其苗木繁殖提供理论依据.实验以樟树赣柠1号枝条为材料,通过植物组织培养技术,研究枝条木质化程度、外植体的采集月份、消毒时间和生长调节剂对樟树赣柠1号茎段组织培养的影响.结果表明:茎段的污染率和褐化率随枝条木质化程度的增加而升高,萌芽率随枝条木质化程度的增加而降低.5月采集樟树...     

蓝桉超级苗组培快繁技术体系研究

以蓝桉超级苗茎段为外植体,分别采用正交试验、单因素试验和两因素全因子试验逐一探讨蓝桉外植体消毒、外植体采集时期、腋芽诱导、不定芽增殖和生根培养等组培快繁主要环节中各自的最佳处理,构建蓝桉超级苗组织培养的技术体系.结果表明:外植体联合消毒的最佳处理为75%酒精消毒20 s,3%洁尔灭消毒1 min和0.05%升汞消毒6.5 min;外植体适宜采集时期为10月份,污染率和褐变率均最低,且存活率和萌芽率均最高;腋芽诱导的最佳体系为改良的MS培养基、0.5 mg/L的KT、0.4 mg/L的6-BA和0.5 mg/L的NAA,可极显著提高腋芽萌发率且诱导效果稳定;不定芽增殖的最佳处理为改良的1/2 MS培养基、0.3 mg/L的6-BA和0.5 mg/L的NAA,可极显著提高增殖系数,使20 d的增殖系数达2.75;生根培养的最佳处理为改良的1/2 MS培养基、0.2 mg/L的NAA,0.5 mg/L的IBA和0.8 mg/L的ABT,可极显著提高生根率和单株生根数量且结果稳定,使生根率达64.38%,单株生根数量达2.70.     

元宝枫组织培养及快速繁殖技术研究

【目的】通过对元宝枫外植体灭菌方法和培养基配方的筛选,建立元宝枫快速繁殖体系,为开展元宝枫优良种苗繁育推广研究奠定基础,并为元宝枫后期优良种苗的规模化生产提供理论与技术支撑。【方法】以元宝枫带芽茎段为外植体,研究不同消毒剂处理方法、不同基本培养基类型(1/2 MS、MS、1/2 NN69、NN69)以及不同浓度外源生长调节剂(IBA)对腋芽诱导、生根等过程的影响。【结果】元宝枫茎段在体积分数75%乙醇中处理30 s和0.1%HgCl₂灭菌180 s时,成活率最高,但外植体不宜在9月前后采集。在NN69培养基中添加0.2 mg/L IBA时,腋芽诱导率最高(97.2%),且用时最短(10~15 d)。在1/2 NN69中添加0.4 mg/L IBA时有利于生根,生根率可达87.8%。【结论】元宝枫带芽茎段适宜的灭菌方法为75%乙醇处理30 s,再以质量分数0.1% HgCl₂处理180 s;腋芽诱导的适宜培养基为NN69+IBA(0.2 mg/L);适宜元宝枫茎段生根的培养基为1/2 NN69+IBA(0.4 mg/L)。以泥炭、珍珠岩、蛭石体积比为7:2:1的混合基质为移栽基质时,试管苗移栽成活率可达95.0%。     

消毒剂对小麦组织培养的影响

通过对家用洗涤剂和升汞设置不同的处理时间梯度,比较了家用洗涤剂和升汞作为消毒剂对小麦幼胚、幼穗组织培养效果的影响,结果表明,体积分数为10%的白猫洗涤剂消毒处理20min与质量分数为0.1%的升汞消毒处理10min具有等同、高效的灭菌效果和组织培养效果,在单个组合中的抗污染率、愈伤组织胚性率、生根率、植株再生频率和绿点分化频率最高均可达100%,且显著高于所设置的其他各个梯度时间的处理效果;不同外植体的比较结果证实了幼胚的植株再生频率和每团愈伤组织的出苗数都显著高于幼穗.     

杜鹃‘胭脂蜜’组织培养与快速繁殖体系

以杜鹃‘胭脂蜜’(Rhododendron obtusum ‘Yanzhimi’)的新生茎段为外植体,以WPM为基本培养基,研究不同生长调节物质对杜鹃组织培养过程中芽诱导、增殖壮苗及生根的影响.结果表明,启动培养中诱导腋芽的最佳培养基为WPM＋0.1 mg·L－1 IBA＋1 mg·L－1 ZT,腋芽平均诱导率为43.67%,增殖系数为1.18;采用NAA＋TDZ与NAA＋ZT的组合分别进行增殖壮苗培养,两种在生长及诱导情况上均呈现不同状态.在添加0.5 mg·L－1 NAA和0.1 mg·L－1 IBA的1/2WPM基本培养基上,杜鹃的生根效果最佳,生根率达82.5%.该研究为杜鹃优质种苗的繁殖与生产,杜鹃遗传转化体系的建立以及转基因育种奠定了一定基础.     

花药培养过程中的灭菌与消毒

利用植物组织培养技术对花药进行组织培养,结合实验操作经验,总结了培养基、无菌室和超净工作台的灭菌方法,论述了工具器皿的消毒过程,分析了花药的预处理与消毒方法,给出了常用消毒剂的使用方法.     

贵州典型何首乌种植基地土壤重金属含量及污染评价

对都匀市王司镇中药材种植基地和施秉县双井镇龙塘村何首乌种植基地的土壤进行测定,对何首乌种植基地土壤重金属含量及其单项污染指数和综合污染指数进行了分析评价.结果表明:都匀何首乌种植基地土壤pH平均值为5.5,施秉种植基地pH平均值为6.29,两地平均值为5.73,为酸性土壤;都匀何首乌种植基地土壤中,Cu、Zn、Co、As、Cr、Cd、Pb、Hg的平均值分别为52.82、202.70、10.49、31.45、80.80、0.48、64.34、0.39 mg/kg,重金属污染情况CdHgPbAsZnCrCuCo;施秉何首乌种植基地土壤中,Cu、Zn、Co、As、Cr、Cd、Pb、Hg的平均值分别为13.65、65.31、7.08、23.19、61.21、0.35、32.37、0.06 mg/kg,重金属污染情况为CdAsPbCrZnCoHgCu;都匀和施秉种植基地的土壤重金属内梅罗污染指数分别为1.41和0.89.都匀种植基地有轻度污染,施秉种植基地尚清洁.在两种植基地重金属污染因子中,重金属Cu、Co、Cr均未超标,Cd都是最主要的污染物.     

两种火炭母基因组 DNA 提取方法的对比研究

火炭母富含有多酚、多糖等次生代谢产物．这些次生代谢产物对火炭母基因组DNA提取的质量与产量有较大影响．以火炭母的成熟叶片,幼嫩叶片、幼嫩茎尖为实验材料,采用改良SDS法和CTAB法,对火炭母进行基因组DNA提取,并通过琼脂糖凝胶电泳检测其完整性,紫外分光光度计法测定其浓度和纯度,对提取效果进行比较．以期得到提取火炭母基因组DNA的最佳方法．     

温州地区植物分布新纪录

本文报道了温州地区分布的植物新纪录计十种及一亚种．     

河南蓼属(Polygonum Linn.)增补与订正

报道了《河南植物志》中未记录的河南产蓼属植物2种1变种，其中长箭叶蓼(Polygonum hastato-sagittatum Mak.）为河南分布新记录，订正了一些分类群的学名。     

提取萹蓄总黄酮化学实验及测定

通过对提取蔚蓄总黄酮的微型化学实验法（恒压分液漏斗）与常规实验法（超声波、索氏提取器）比较,实验证明微型化学实验法与常规实验法相比较,该方法具有使用试剂量小、污染小、省时间．适合选做天然有机物的提取化学实验．对所提取的黄酮类物质进行验证,用分光光度法测定含量．微型化学实验法提取蔚蓄总黄酮,测得品中总黄酮的平均含量为1．96％,平均回收率为101％．     

武陵山区湖南新纪录植物（Ⅱ）

报道了湖南植物分布新纪录种17个,变种3个,隶属11科,16属,它们是兴山唐松草（Thalictrum xingshanicum G. F. Tao）、鹤峰铁线莲（Clematis armandii var. hefengensis (G. F. Tao) W. T.Wang）、珠芽蓼（Polygonum viviparum Linn.）、湖北凤仙花（Impatiens pritzelii Hook. f.）、东川凤仙花（I. blinii Lévl. Cat.）、野梦花（Daphne tangutica var. wilsonii (Rehd.) H. F. Zhou ex C. Y. Chang）、纤细荛花（Wikstroemia gracilis Hemsl.）、小花栝楼（Trichosanthes parviflora C. Y. Wu ex S. K. Chen）、野草莓（Fragaria vesca Linn.）、五叶白叶莓（Rubus innominatu var. quinatus Bailey）、竹叶鸡爪茶（R. bambusarum）、峨嵋蔷薇（Rosa omeiensis Rolfe）、皱叶委陵菜（Potentilla ancistrifolia Bunge）、狼牙委陵菜（P. cryptotaeniae Maxim.）、文县黄蓍（Astragalus wenxianensis Y. C. Ho）、黔蚊母树（Distylium tsiangii Chun ex Walker）、羽脉野扇花（Sarcococca hookeriana Baill.）、峨嵋鹅耳枥（Carpinus omeiensis Hu & D. Fang）、曲脉卫矛（Euonymus venosus Hemsl.）、小果卫矛（E. microcarpus (Oliv.) Sprague）,纠正了链荚豆（Alysicarpus vaginalis (Linn.) DC.）的区系记录错误.     

生态型河道应用伊乐藻修复受损水体的研究

将伊乐藻引入生态型河道受损水体修复中，通过室内试验系统地研究了伊乐藻的净化效果，结果表明：伊乐藻是修复受损水体较理想的材料，伊乐藻对总氮（TN）、总磷（TP）和CODM。的累计去除率，在夏季分别为61％、89％和34％；在冬季分别为25．74％、26．59％和10．93％；伊乐藻对水体的净化能力高于菹草和金鱼藻。同时，探讨了修复过程中可能存在的二次污染问题。通过宏观的质量平衡估算，1g伊乐藻在1a内可以从1L水体中去除TN、TP和CODMn分别达到44．57、15．42和31．13mg。     

蛇足石杉外植体表面消毒及内生菌消除方法

为了获得蛇足石杉的无菌材料,使用双氧水、酒精、升汞等消毒剂对外植体进行表面消毒,使用混合抗菌溶液及不同温度的热水浴处理外植体以消除内生菌.结果表明:茎段经预处理后,用47 ℃热水浴处理1 h,再经70 %酒精处理30 s, 0.1 %升汞处理7 min后,能达到较好的表面消毒及内生菌消除的效果;孢子囊和茎尖经预处理后,再经过70%酒精处理30 s,0.1 %升汞处理4 min即可达到较好的表面消毒效果;消毒剂结合温度处理能降低内生菌的污染率;孢子囊和茎尖几乎不含内生菌,是可用于组织培养的较好的外植体.     

苦丁茶组培苗工厂化生产若干问题探讨

探讨苦丁茶（Ｉｌｅｘｋｕｄｉｎｇｃｈａ）组培苗工厂化生产中外植体选择、繁殖系数、生根与移栽以及生产中污染问题,提出在秋季采摘的２年生苦丁茶实生苗上的幼嫩茎段作外植体,获无菌材料的得率最高。继代增殖的适宜配方为ＭＳ＋６ＢＡ１．０ｍｇ／Ｌ～４．０ｍｇ／Ｌ＋蔗糖３％～４％＋琼脂０．３％,增殖倍数可达２．７２～３．０,生产周期１．５～２个月。基内诱导生根后经蛭石假植再移栽,成活率达９０％以上;无根苗直接下土移栽,相对成活率约７５％,认为严格遵守无菌操作规程,是防止苦丁茶组培苗生产中出现大量污染的有效举措。     

何首乌根和茎愈伤组织的诱导和二苯乙烯苷含量的检测

以何首乌根和茎为外植体,通过正交试验筛选根和茎诱导的最佳培养基,结果表明在26℃和暗培养条件下,MS培养基中添加1 mg•L-1 2,4-二氯苯氧乙酸（2,4-D）和0.4 mg•L-1萘乙酸（NAA）最容易诱导出愈伤组织,诱导率可以达到96.7 %。通过HPLC测定了根和茎愈伤组织的二苯乙烯苷含量,分别为1.5mg/g和0.4mg/g。