消毒剂对小麦组织培养的影响

通过对家用洗涤剂和升汞设置不同的处理时间梯度,比较了家用洗涤剂和升汞作为消毒剂对小麦幼胚、幼穗组织培养效果的影响,结果表明,体积分数为10%的白猫洗涤剂消毒处理20min与质量分数为0.1%的升汞消毒处理10min具有等同、高效的灭菌效果和组织培养效果,在单个组合中的抗污染率、愈伤组织胚性率、生根率、植株再生频率和绿点分化频率最高均可达100%,且显著高于所设置的其他各个梯度时间的处理效果;不同外植体的比较结果证实了幼胚的植株再生频率和每团愈伤组织的出苗数都显著高于幼穗.     

小麦染色体标本制备方法的优化

制备出分裂相多、杂质少、背景清晰、染色体分散且形态好的染色体标本,一直是细胞遗传学实验课关注的重点和难点.本文在去壁低渗火焰干燥法的基础上,改良了小麦染色体制片方法,分析了影响染色体标本制备效果的主要因素.     

转1Dx5基因小麦突变株系的研究

以转1Dx5基因小麦3个高分子量麦谷蛋白突变株系B73-6-1-1、B73-6-1-2和B73-6-1-3及转基因受体L88-6为材料,对其主要农艺性状、低分子量麦谷蛋白表达情况及染色体核型进行研究.结果表明:在田间栽培条件下,纯合稳定转基因突变株系之间及其与转基因受体之间主要农艺性状存在差异,其中株高和千粒重存在显著差异(P=0.05);同时,SDS-PAGE结果显示,在小麦低分子量麦谷蛋白区域,突变株系之间无明显差异,而突变株系与转基因受体之间部分区域表达量存在明显差异并产生一个突变条带;通过核型分析比较,得出突变株系之间及其与转基因受体之间,染色体无论是相对长度还是臂比值都没有显著差异.     

外源基因1Dx5在转基因小麦后代中的表达

采用PCR和SDS-PAGE技术,分析研究了转基因小麦后代外源品质基因1Dx5的遗传分离及表达规律,结果显示:转基因小麦后代的遗传分离完全符合孟得尔遗传分离规律,转基因植株都达到了纯合状态,1Dx5基因在转基因植株中已经稳定整合并稳定遗传,并发现了超表达的差异表达现象,在转基因植株中没有发现基因沉默现象.     

新疆主栽小麦品种高分子量麦谷蛋白亚基组成分析

采用SDS-PAGE技术，分析了38份新疆主栽小麦品种（系）的高分子量麦谷蛋白亚基组成．结果表明，38份材料在Glu-1位点共检测到14种等位基因变异类型，其中Glu—A1位点有“1、2＊、Null”3种变异类型，Glu-B1位点有“7、7＋8、7＋9、6＋8、13＋16、17＋18、14＋15”7种，Glin-D1位点有“2＋12、5＋10、5＋12、2＋10”4种．“Null、7＋8、2＋12”是主要亚基，它们的频率分别是55．3％、57．9％和65．8％．亚基组合类型有17种，其中Null、7＋8、2＋12亚基组合占39．5％；1、7＋8、2＋12亚基组合为10．5％，其余亚基组合的频率都在10％以下，不同材料的品质评分在3～10之间，平均评分为6．3．     

龟鹿补肾片质量标准研究

龟鹿补肾片质量标准的制定是进行生产质量控制的重要依据。针对该制剂的主要药效成分,文章通过薄层鉴别对陈皮、枸杞进行了鉴别,并采用高效液相色谱法测定了淫羊覆苷的含量。结果显示在薄层色谱中能检出陈皮:淫羊藿苷在0.1036~0.5180μg范围内呈良好的线性关系(r=1.0000),回收率达99.85%,RSD为0.53%,表明该方法准确、灵敏、重现性好,能有效地控制龟鹿补肾片的质量。     

转基因小麦环境释放中基因漂移研究

基因漂移供体是转基因小麦，受体有转基因小麦的非转基因分离体、受体对照品系和地方小麦品种，以外源uidA基因表达作为基因漂移的分子标记，在供体开花期间，距供体5个不同距离上收集花粉，约80％的花粉分布在距供体中心15m以内，距离35m处只检测到约6％的花粉，在11个检测样点检测受体和供体间杂交率，供体与分离体混种同一小区时，基因漂移频率较高(1．08％)；与其受体对照播种于相邻小区(相距约0．5m)时，基因漂移频率居中(0．63％)；地方品种距供体边缘0．5～2．5m处，频率较低(0．25％)；3m以外没有检测到基因漂移，认为转基因小麦基因漂移距离应在3m以内。     

转基因小麦T1代中外源基因的检测和分析

该研究采用Multiplex PCR和SDS-PAGE技术对转1 Dx5基因(ORF)T1代小麦进行了检测和分析.结果显示,Multiplex PCR能够扩增出转基因T1代材料中1 Dx2基因和1 Dx5基因的特征片段,表明外源基因已整合到受体基因组中;SDS-PAGE检测到一新的蛋白质亚基X,表明外源基因的插入引起了转基因T1代籽粒中HMW-GS组成的变化.该研究不仅验证了线性基因片段遗传转化策略的可行性,而且印证了普通小麦Glu-1D等位基因的多重PCR分子标记体系的有效性,为培育安全型的转基因作物新种质打下坚实的基础,加快小麦分子育种进程.     

两个杂交组合中转基因小麦外源1Dx5基因的遗传

利用杂交组合川89-107×B72-8-11b和绵阳26×B72-8-11b的亲本、F1、F2代,研究转基因小麦B72-8-11b中外源品质基因1Dx5表达的遗传.结果表明:外源1Dx5基因在F1代中呈现显性,在F2代中呈现3(有):1(无)的分离,有功能拷贝整合在1个位点,遵从孟德尔遗传模式,这对杂交育种选择策略的制订具有指导意义.     

转基因小麦小花开放特性与基因漂移关系研究

选用3个转基因小麦、2个受体对照与170个地方品种对照，在武汉进行环境释放试验．约20％的小麦地方品种与转基因小麦花期相遇，所有地方品种开花时柱头都部分外露，且小花开放度和开放时间品种间有差异，表明存在着转基因小麦以花粉为媒介向地方品种发生基因漂移的可能性，且不同地方品种作为接受者，在不考虑其他影响因素时，因小花开放度的差异发生基因漂移的可能性也应存在差异．