生菜基因转化组织培养受体系统的建立

以散叶生菜大速生（Lactuca sativa var. capatata L.）为试材,以MS为基本培养基,采用不同的激素配比,经愈伤组织诱导、芽分化、生根、移植入土四个步骤的离体培养,获得正常的再生植株,建立了散叶生菜大速生的基因转化受体系统,为下一步的基因转化工作提供了有利条件。高效诱导愈伤组织培养基为MS 0.5 mg/L 6-BA 0.1 mg/L NAA,高效诱芽培养基为MS 0.1 mg/L 6-BA 0.05 mg/L NAA。同时确定了子叶外植体对抗生素的敏感性。试验表明,筛选培养基中适宜的卡那霉素选择压在100 mg/L以下,抑菌剂羧苄青霉素或头孢噻肟钠的适宜质量浓度均为300 mg/L。     

大叶饲料槐高频再生体系建立及试管苗工厂化生产

通过叶片外植体愈伤组织诱导和直接不定芽再生途径，建立了大叶饲料槐的高频再生系统，采用正交试验筛选出愈伤组织最适诱导培养基为；MS附加0．5mg／L 6-BA和1．0mg／L NAA；愈伤组织分化最适培养基为：MS附加2．0mg／L 6-BA和0．2mg／L NAA。叶片外植体直接分化最适培养基为：MS附加2．0mg／L 6-BA和0．1mg／L NAA；试管苗在1／2MS附加0．2mg／L IBA、0．1mg／L NAA和2g／L AC的培养基上生根率高达100％，移栽成活率达90％，从而实现了大叶饲料槐的工厂化生产．     

厚荚相思组织培养与快速繁殖

以5年生厚荚相思(Acacia crassicarpa)的萌芽茎段为外植体进行了组织培养的初步研究，结果表明：改良的MS 6-BA2．0mg／L NAA0．2mg／L培养基能够较好地诱导芽的分化和增殖；适宜的继代增殖培养基为改良MS 6-BA1．5mg／L NAA0．2mg／L；较为想的生根培养基为1／2MS IBA0．5mg／L，生根率达95．0％；生根苗的移栽基质以黄心土的移栽效果最好，移栽成活率达90．0％。     

密蒙花(Buddlija officinalis)基因转化受体系统的建立

以密蒙花(Buddlija officinalis Maxim)芽、叶、茎段为外植体，在B5，MS，White培养基上获得愈伤组织。结果表明：芽、幼叶脱分化能力差异不大；不同时期的叶片差异较大，以幼叶诱导为佳；作者筛选出的愈伤组织最佳培养基为B5 6-BA0．5mg／L 2，4-D0．5mg／L。在继代培养阶段，B5比MS和White更适合细胞的快速生长和繁殖；并且以叶片的愈伤组织生长较快，芽、茎段次之，最佳继代培养基为B5 6-BA0．5mg／L NAA0．5mg／L，继代的愈伤组织可在B5 6．BAlmg／L NAA0．1mg／L GA0．1mg／L培养基中分化出幼苗，在生根培养基1／2MS NAA0．2mg／L或1／2MS NAA0．6mg／L中分化出根且获得再生植株，将长4～6cm的再生小苗练苗3d后移植，幼苗成活率达100％，并于当年开花。     

丽格秋海棠的快速繁殖

以丽格秋海棠幼嫩的叶片、花梗等材料作为快速繁殖的外植体进行组织培养，结果表明，叶片的诱导效果最好．经无菌处理的幼叶在培养基改良MS 6-BA1．5mg／L NAA0．5～0．8mg／L上可以直接分化出芽体，改良MS 6-BA0．5mg／L NAA0．05mg／L是合适的继代增殖培养基，1／2MS NAA0．2mg／L适宜用来促进幼苗的生根．     

新几内亚凤仙离体快速繁殖技术研究

取新几内亚凤仙具有顶芽或腋芽的新生茎段为外植体，诱导芽体萌发，进行繁殖培养．通过大量试验，筛选出各阶段适宜的培养基组成．萌芽诱导阶段培养在MS 6-BA2．0mg／L NAA0．2mg／L中，顶芽萌发早，生长快；在继代和增殖培养中以MS 6-BA1．5mg／L NAA0．2mg／L培养基效果最好．1／2MS NAA0．2mg／L诱导生根，生根率可达100％．根质量较好；适宜条件下炼苗移栽．试管苗成活率缺95％以上。     

叶子花的组织培养及快速繁殖研究

以叶子花的茎尖为外植体，通过13种培养基的试验，从中筛出适宜叶子花组织培养、快速繁殖的一整套稳定、高效的生产程序，即芽诱导培养基为MS BA0.2mg／L IAA1．0mg／L，增殖培养为MS BA0.5mg／L IAA1.5mg／L，生根培养基为MS IBA0．1mg／L 2，4，5-T0．1mg／L。为规模化生产叶子花提供了快速繁殖的方法。     

蒜头果细胞悬浮培养的研究

采用蒜头果(Malania oleifera Chun et．K Lee)新鲜种子的胚乳在4种含不同激素浓度组合的培养基上诱导产生愈伤组织并建立起细胞悬浮培养体系。结果表明：愈伤组织诱导率为66．7％～86．6％，其中以MS 6-BA0.5mg／L 2，4-D 2．0mg／L 蔗糖3％的培养基最佳，其诱导出的愈伤组织具有较强的增殖能力和较好的脆散结构；最佳继代培养基为MS 6-BA0．2mg／L 2，4-D2．0mg／L 蔗糖3％；将继代后的愈伤组织转入6种含不同激素浓度组合的MS液体培养基中进行振荡培养，在综合分析各培养基的单细胞密度，细胞团块密度。细胞生物量增长率等指标后，初步筛选出MS 6-BA0．2mg／L 2，4-D 2．5mg／L 蔗糖3％培养基为较好的液体培养基。     

兰州百合和野百合组织培养及快速繁殖研究

以兰州百合（Lilium davidii Var.Unicolor (Hoog)Cotton)和野百合（Lilium brownii F.E.Brown ex Miellez) 鳞茎及叶片为外植体获得再生植株，并建立起快速无性繁殖系。兰州百合鳞茎的最佳诱导培养基为MS＋0．6－1．0mg/LBA＋0．2mg/LNAA；芽增殖培养基选MS＋0．5－0．6mg/LBA 0.1mg/L NAA；生根培养基为1／2MS＋0．2mg/l IAA 0.1%活性炭。野百合鳞茎及叶的最佳诱导培养基分别为MS＋0．1－0．5mg/LBA 0.1-0.2mg/L NAA或0.5mg/L IAA和MS＋0.7mg/L BA 0.07mg/L NAA；鳞茎诱导的芽的增殖培养基为MS＋0.2-0.4mg/L BA 0.1mg/L NAA；生根培养基为1／2MS＋0.15mg/L NAA 0.1%活性炭。     

景观树种红叶石楠的组织培养

针对景观树种红叶石楠的组织培养的各个环节进行试验性研究．结果表明：红叶石楠表面灭菌以二次灭菌4＋3．5min较好，成活率达85％，启动培养基以MS＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．2mg／L较好，分化率达100％．适宜的增殖培养基为MS＋6-BA2．0mg／L＋NAA0．1mg/L，增殖系数为7．2，适宜生根培养基为...     

4种抗生素对菘蓝外植体生长的影响

对抗生素卡拉霉素和潮霉素进行菘蓝外植体抗性浓度筛选，结果表明不同外植体具有不同抗性．子叶芽分化阶段，卡拉霉素和潮霉素筛选浓度范围分别为10-50mg／L和5-30mg／L；下胚轴芽分化阶段的筛选浓度分别为15-50mg／L和10-30mg/L；分化苗生根时筛选浓度分别为30mg/L和20mg/L．芽分化阶段宜使用头孢霉素为抗菌剂，但分化苗生根时宜选用羧苄青霉素．     

农杆菌介导的ACC氧化酶反义基因转化甜瓜品种河套蜜瓜的研究

将从甜瓜品种河套蜜瓜中克隆的ACC氧化酶基因cDNA片段反向构建到植物表达载体pROK II中,获得重组质粒pRACO 1,用三亲融合法将其导入根癌农杆菌LBA 4404中,转化河套蜜瓜子叶外植体,在芽诱导培养基M S IAA 0.8 m g/L BA 1.0 m g/L ABA 0.26 m g/L C ef 500 m g/L K an 75 m g/L中诱导生芽,待芽长到2cm左右转入M S IBA 0.5 m g/L C ef 300 m g/L K an 50 m g/L的培养基中诱导生根,1~2周后可诱导产生大量的根,形成完整的转化小植株.经PCR检测证明,目的基因已整合到河套蜜瓜的基因组中.     

青花菜组织培养再生体系的研究

采用不同培养基对青花菜（Brassica oleracea var.italica Plenk.)的子叶和下胚轴进行分化培养,结果表明：青花菜不同的外植体的组织培养效果不同,当采用MS基本培养基附加BA0.5mg/L、NAA0.1mg/L和Sucrose5%的处理时下胚轴的不定芽分化频率最高,可达50%;而当培养基中添加BA0.5mg/L、NAA0.1mg/L、Sucrose3%和AgNO34mg/L的子叶的不定芽分化频率最高,约为78%左右;同时在分化培养基中添加不同种类和浓度的激素、蔗糖和AgNO3均对其子叶不定芽的再生具有明显的效应。     

大豆胚芽尖再生体系的建立

以'西豆3号'等3个大豆品种为材料,以胚芽尖为外植体,研究种子萌发时间、植物生长调节剂对不定芽分化的影响以及生长调节剂对不定芽生根的影响,建立高效再生体系.结果表明种子在1/2MS培养基上萌发24 h后,将胚芽尖接种在BM+5 mg/L BA培养基上培养24 h,然后转入BM+0.4 mg/L BA+0.4 mg/L IBA培养基诱导不定芽,出芽率达64.91%～68.89%;将长3～5 cm的不定芽在BM+0.5 mg/L BA+1.5 mg/L IBA培养基中培养7 d后,转入BM基本培养基中生根,生根率达22.22%～26.32%.     

桑树遗传转化技术中抗生素的浓度优化研究

调查了抗生素对根癌农杆菌介导的桑品种“新一之濑”遗传转化不同培养阶段外植体生长、分化或生根的影响及其对农杆菌的抑制效果 ,并确定 :在叶盘 (或茎尖 )转化筛选培养阶段 ,Kan (卡那霉素 )和 Cab (羧苄青霉素 )适宜浓度分别为 3 0～ 40 mg/ L和 2 0 0～40 0 mg/ L (或 6 0～ 80 mg/ L和 2 0 0～ 6 0 0 mg/ L ) ,在抗性芽继代 (或生根 )培养阶段 ,Kan和Cab分别为 40～ 5 0 mg/ L和 1 0 0～ 2 0 0 mg/ L (或 5～ 1 0 mg/ L和 5 0～ 1 0 0 mg/ L) .Cef(头孢霉素 )对桑树各种外植体的影响效果与 Cab相似 ,但两者的抑菌效果因农杆菌菌株、外植体类型以及培养阶段的不同而存在差异 ,用含 Kan、Rif(利福平 )和 Str(链霉素 )的 LB培养基浸渍叶盘则出现分化率下降、褐化死亡较严重的现象 .     

小白菜离体培养植株再生方式的组织学研究

对2个小白菜品种的离体培养植株再生方式进行组织学观察，结果表明：在含有AgNO36mg/L及ABA0.5mg/L的培养基（MS BA2mg/L NAA0.5mg/L)中，鸡毛菜在培养6d左右，矮脚黄在培养8d左右出现明显的芽原基，10-12d左右产生肉眼可见的不定芽。不定芽的产生属直接出芽方式，不经过愈伤组织阶段。     

苎麻雄性不育保持系组培再生技术研究

以苎麻雄性不育保持系GS13-X1为实验材料,选用MS培养基附加激素TDZ和2,4-D,研究不同激素浓度组合对种子苗叶片和茎段外植体愈伤诱导与不定芽分化的影响.试验结果表明,GS13-X1再生的最适培养基为MS+0.3 mg/L TDZ+0.05 mg/L 2,4-D+30 g/L蔗糖+7.5 g/L琼脂,叶片和茎段的愈伤诱导率分别为100%和95.24%,出芽分化率分别为11.11%和23.81%.50 mg/L卡那霉素可以明显抑制茎段和叶愈伤诱导与分化.苎麻雄性不育保持系组织培养再生技术是苎麻雄性不育转基因验证的前提条件,也是苎麻遗传工程改良的基础.     

利用农杆菌介导法将抗虫基因导入油菜的研究

以油菜的子叶柄作为转化的受体材料,经农杆菌感染和共培养,在含卡那霉素的筛选培养上诱导产了大量的不定芽,经生根培养,获得了再生植株,通过PCR扩增和基因组Southern杂交分析,证明其中5株为转基因植株,对转基因植株进行抗虫性检测,有2株表现出较好的抗虫性。     

结球甘蓝组织培养再生植株及玻璃苗的防治

将三个甘蓝杂交种无菌苗的子叶和下胚轴培养于ＺＭＳ培养基上诱导愈伤组织，２０天左右继代。分化培养基为ＭＳ＋ＢＡ４ｍｇ／Ｌ＋ＩＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ。通过在培养基中附加不同成份，得出以下结论，（１）高比例的琼脂低分化率；（２）聚乙烯醇在一定程度上能够控制玻璃苗的发生；（３）ＡｇＮＯ３能够增加分化率，但抑制芽的进一步发育；（４）多效唑能够使再生苗矮化，叶色加深，但不能提高分化率；（５）继代次数越多，分化率     

两种不同花色矮牵牛快繁体系的建立

为了建立紫红花和紫花矮牵牛诱导不定芽途径,以这两种矮牵牛为材料,在MS基本培养基基础上,添加不同浓度的6-BA和IBA激素,共设计了9种培养基组合,对两种花色矮牵牛叶片进行快繁研究．试验结果表明：不同品种矮牵牛快繁的激素组合是有差异的,紫红花矮牵牛叶片诱导不定芽的最适培养基为MS4-1．0mg／L6-BA4-0．2mg／LIBA,紫花矮牵牛叶片诱导不定芽最适培养基为MS＋2．0mg／L6-BA＋0．5mg／LIBA．为今后以紫红花和紫花矮牵牛为受体进行遗传转化获得转基因植株的无性快繁建立有效再生体系．