Chelex~100提取果蝇非新鲜标本核基因组方法的建立

引言从大量材料中提取ＤＮＡ的经典方法包括分离和纯化的过程，繁琐的操作步骤会引起提取物的污染。Ｃｈｅｌｅｘ○Ｒ１００是一种弱的阳离子螯合树脂，可以螯合一些被认为在高温、低离子强度下催化ＤＮＡ降解的金属离子［１］，在提取ＤＮＡ过程中防止ＤＮＡ的降解。此外...     

分离纯化豌豆核DNA的有效方法

通过改进豌豆核ＤＮＡ的分离纯化方法,简化了分离纯化豌豆核ＤＮＡ的操作程序;纯化了的Ｇ２ 豌豆核ＤＮＡ 的紫外吸收值Ａ２６０／ Ａ２８０ ＝ １ ．９２ ,Ａｌａｓｋａ 豌豆核ＤＮＡ的紫外吸收Ａ２６０／ Ａ２８０ ＝ １ ．８８, 表明该方法提取的豌豆核ＤＮＡ是高纯度的ＤＮＡ,根据光吸收值测定产量收率,从每克豌豆幼苗中可获得约１３０ μｇ 核ＤＮＡ,这为豌豆核ＤＮＡ 的有关分子生物学研究提供了简便、经济、有效的分离纯化方法．     

酵母菌呼吸缺陷型和野生型线粒体DNA比较

以酒精酵母，ＩＦＦＩ１３００ 材料，建立了以”蜗牛酶＋机械振荡“复俣自理破碎细胞的方法；先提取并纯化线粒体，后从线粒体中提取线粒体ＤＮＡ的方法，得到了紫外吸收Ａ２６０／２８０为１．８２３，琼脂糖电泳为一条带且分子量大λＤＮＡ的线粒体ＤＮＡ。     

从针叶树营养体组织中提取高纯度DNA的方法

ＤＮＡ提取质量是影响ＤＮＡ分析实验结果的关键因素之一,保持不同样本间ＤＮＡ质量的一致性对实验结果的可靠性至关重要,这要求在材料选择和提取方法两个方面都要加以考虑。介绍了从针叶树营养体组织中提取高纯度ＤＮＡ的方法,提取的关键是选择合适的材料,不同于通常采用针叶进行ＤＮＡ提取,本实验选用尚未木质化的针叶树嫩梢进行ＤＮＡ提取,可以在较为简单的实验条件和实验程序下提取高质量ＤＮＡ。按照作者提供的提取方法,     

用生物磁粒分离纯化小麦种胚中DNA的研究

用表面修饰有羧基的生物磁粒对小麦种胚提取液中ＤＮＡ的纯化做了系统的研究,得到提取纯化的最佳条件。结果表明,在提取温度５０￣５５℃,提取时间１ｈ,磁粒用量２０μＬ条件下,处理１５ｍｇ样品可得到纯度很高的ＤＮＡ约４３μｇ。此法可直接在离心管中操作,具有不离心,不接触氯仿,酚等有机萃取剂等特点。     

葡萄DNA提取与纯化方法的比较研究

以巨峰葡萄叶片为试材,在ＣＴＡＢ法,ＳＤＳ法及高盐低ｐＨ法基础上加以改进,应用５种方法对葡萄ＤＮＡ提取,纯化方法进行了比较研究。结果表明,高盐低ｐＨ法和区室化提取法是２种适合于葡萄属植物ＤＮＡ提取的方法。     

胎盘绒毛细胞的培养及其基因组DNA的分离纯化

从采集到的微量胎盘绒毛，经过组织细胞培养，获得了大量的绒毛细胞，对其进行了基因组ＤＮＡ的分离纯化，提取到足够量的ＤＮＡ。经过０．８％琼脂糖凝胶电泳，结果显示出完整的绒毛细胞ＤＮＡ带，得到了典型的大分子ＤＮＡ电泳图谱。     

12种作物种子DNA的提取与纯化

采用黄化苗,按氯仿—异戊醇—ＲＮＡ酶法获得ＤＮＡ粗制品,后经酚—氯仿—乙戊醇纯化得１２种作物新品种的ＰＣＲ反应模板ＤＮＡ。结果测量获得的数据和曲线表明：采用本实验的提取方法,可得到具有一定纯度和数量的ＤＮＡ,完全可以满足ＰＣＲ反应所需。     

一种上膜虫线粒体DNA提取的新方法

本文根据四膜虫线粒体ＤＮＡ（ｍＤＮＡ）对碱稳定这一特性，建立了一种更为简便的，能直接提取四膜虫线粒体ＤＮＡ的方法。该方法快速简便，重复性好，可用于游离细胞材料ｍｔＤＮＡ的提取。     

一种简单,快速植物RAPD分析DNA提取方法

随机引物扩增多态性ＤＮＡ(ＲＡＰＤ)分析实验中的植物总ＤＮＡ提取方法已有很多文献进行过详细阐述和讨论[1～ 5] ,同时 ,邹喻萍等[6] 对于濒危植物ＲＡＰＤ分析 ,尤其是植物ＤＮＡ难于提取的种类如银杉、矮壮丹、南川剑麻的总ＤＮＡ提取鉴定进行了较理想的改进 .但以往的ＤＮＡ提取一般费时较长、工序繁琐 .本实验采用普遍使用的ＣＴＡＢ法提取曼陀罗ＤＮＡ ,根据在实验中的摸索 ,对植物总ＤＮＡ的提取条件作了较大改进 .用此方法提取的ＤＮＡ能直接用于ＲＡＰＤ ,ＰＣＲ ,ＲＦＬＰ等分子生物学实验 .1　材料与方法1 .1　材料　曼陀罗 (Ｄ…     

一种改良的水稻总DNA提取方法

在植物DNA提取“SDS法”基础上,提出了一种改良的DNA提取方法,称“剪切法”.采用“剪切法”、“液氮法”和“钢珠法”3种方法提取水稻幼叶总DNA并进行了电泳分析和PCR检测,同时首次选择了以幼穗为提取材料,用“剪切法”分别提取水稻幼穗、幼叶和老叶的总DNA并进行比较,结果表明:“剪切法”是一种简易、经济、高质的DNA提取方法,对于以F2极端分离群体作为基因定位群体,取幼穗为提取水稻总DNA的材料是一种经济便捷的途径.     

玫瑰花渣中色素的研究

本文以研究玫瑰花提取挥发油后废渣的应用为目的,介绍了废渣中有色物质二氢黄酮的鉴定方法,萃取与纯化色素的主要过程,重点研究了水、乙醇、酸度、光和温度对色素稳定性影响.说明了从玫瑰花渣中提取的色素是以二氢黄酮为主体的混合色素,是一种稳定的天然色素,有广泛的应用价值。     

葡萄花色甙优化提取和纯化工艺研究

本文用正交实验对经发酵的玫瑰香葡萄皮渣的总色素、食用色素的优化提取工艺进行了研究，同时对粗色素的纯化工艺进行了探索。     

麻疯树适生区域土壤DNA提取及多重PCR验证

比较了4种土壤总DNA提取方法应用于四川西昌去南元谋和海南海口三地麻疯树适生区土壤样品的DNA提取效果,发现改进后的方法1和方法4提取效果显著好于方法2和方法3.不仅如此,采用多重PCR扩增方法证明方法1和方法4扩增的真菌DNA产量所占比例增加,说明所得DNA更具有代表性.然而仅有方法4能成功提取海南及云南两地麻疯树适生地区的土壤总DNA,但提取的DNA纯度和产量过低,说明还需进一步进行优化.     

乌麦萌发前后抗氧化酶的研究

较系统地研究了乌麦萌发前后过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等几种抗氧化酶活性的变化，同时利用聚丙烯酰胺凝胶电泳对几种抗氧化酶进行了同工酶分析，结果显示：乌麦萌发前后，几种抗氧化酶活性均有显变化，且与对照小麦有明显差异，乌麦萌发前后POD同工酶谱的变化显，且与对照小麦的差异性大，SOD同工酶谱的变化及与对照小麦的差异性不明显。     

小麦(Triticum aestiviumL.)成熟胚与其他外植体再生能力的研究

六个品种小麦成熟胚等外植体再生能力的研究表明,不同外植体的再生能力按根尖、幼叶、茎节、幼穗、成熟胚的顺序递增。成熟胚再生能力强,愈伤组织诱导率达90%以上,出苗率可达44%,并且具有材料来源广泛、操作方便、不受季节和发育时期限制等优点,因此是小麦体细胞组织培养的适宜外植休来源。本文对不同外植体再生能力差异产生的原因也进行了分析和讨论。组织学观察表明,本实验所获得的再生植株属于器官发生的类型     

RAPD技术在甜高粱品种基因组分析上的应用

以7050B保持系(抗病)、TX622B保持系(感病)杂交的F2抗性个体和甜高粱丝黑穗病8113(抗病)、甜高粱丝黑穗病8101(感病)为试材,应用RAPD筛选技术对甜高粱丝黑穗病感、抗病基因组进行分子标记的初步分析.实验过程中采用CTAB法提取高粱、甜高粱基因组总DNA,应用琼脂糖凝胶电泳法对RAPD扩增结果进行检测,通过比较琼脂糖凝胶电泳电压的不同,进一步优化了琼脂糖电泳电压,以7050B保持系(抗病)、TX622B保持系(感病)杂交的子一代抗性个体为试材筛选了90个引物,其中29引物扩增出了多态性谱带,应用20个具有多态性扩增谱带的引物对甜高粱丝黑穗病8113(抗病)、甜高粱丝黑穗病8101(感病)进行了RAPD分析,结果表明共有9个引物扩增出了差异谱带,引物分别为S83,S-84,S-88,S-89,S-90,S-92,S-96,S-97,S-98.     

葡萄籽中原花青素提取、分离纯化研究进展

综述了近十年来葡萄籽中原花青素的提取、分离纯化方法和工艺的研究进展.提取方法主要包括传统的溶剂提取法、微波法、超临界CO2萃取法;分离纯化方法包括大孔树脂吸附法、超过滤法.这些方法为提取纯化葡萄籽中的原花青素,进一步分离得到单体提供有用的参考.     

不同方法提取水溞基因组DNA的比较

为获取抽提水溞基因组DNA的最适方法,本研究采用酚-氯仿法,CTAB法和试剂盒法3种方法提取水溞基因组DNA,并用琼脂糖凝胶电泳检测DNA提取的效果.结果表明3种DNA提取方法均获得较好的DNA,其中试剂盒方法提取的DNA最为理想,完全可满足后续分子生物学实验.     

人B淋巴细胞刺激因子的真核表达以及表达条件的筛选

采用基因克隆、重组等方法，将人B淋巴细胞刺激因子（hsBLyS）基因从人胎盘cDNA文库中克隆出来，测序鉴定后得组构建成真核表达载体pcDNA3．1( )hsBLyS，然后用磷酸钙法和脂质体法分别转染真核宿主细胞COS－7，并在其中表达48h、36h、72h、96h；表达细胞经超声处理后离心，上清进行SDS－PAGE鉴定，结果表明：对于hsBLyS来说，磷酸钙法比脂质体法转染效果好，而且对于磷酸钙法，表达量是72h达到最高。