沙葱总RNA的提取与质量分析

以沙葱种子和沙葱幼叶为材料,分别用RNAiso Plus试剂法、RNAiso Plus醋酸钠改进法、CTAB-异丙醇法、CTAB-LiCl法4种不同的方法提取沙葱总RNA,经琼脂糖凝胶电泳,采用紫外分光光度法测定总RNA纯度并进行RT-PCR检测.结果表明,沙葱不同组织总RNA提取的最优方法有所不同.采用CTAB-LiCl法能有效地提取出沙葱种子高质量、完整性好而且无胶状不溶物的RNA,没有明显的蛋白和基因组DNA的污染.采用RNAiso Plus醋酸钠改进法能有效地去除沙葱幼叶中多糖的干扰,所提取的RNA条带清晰,完整性好,是沙葱幼叶总RNA提取的有效方法.     

葡萄总DNA提取方法的比较研究

以葡萄幼叶为材料，分别采用溴化十六烷基三甲基铵(CTAB)法、高盐低pH法、简易法、高盐沉淀法和改良十二烷基硫酸钠(SDS)法5种方法提取总DNA，通过A260／A280值、琼脂糖凝胶电泳和RAPD对5种方法所得DNA溶液进行定量、定性分析和综合比较。结果显示高盐低pH法、高盐沉淀法综合效果较好，改良SDS法所得DNA纯度最佳。因此，在实际工作中还应根据实验目的选取最适合的方法。     

水稻幼叶及幼穗cDNA文库的构建及初步分析

为了克隆水稻第6染色体上S5位点的基因及包括广亲和基因在内的重要功能基因,以水稻Oryza sativa L.广亲和品种Cpslo17为材料,以λTriplex2TM为载体利用SMART技术构建了幼叶和幼穗2种器官的cDNA噬菌体文库.幼叶和幼穗原始文库的克隆数目为别为1.5×105 pfu和2.45×105 pfu,插入片段的大小均在500～3 000 bp之间,文库的阳性克隆子的为别比例为97.0%和98.7%.此文库的建立为克隆广亲和基因和其它重要全长功能基因奠定了基础.     

4种提取水稻基因级DNA方法的比较

对于含有大量硅质及多糖如酚、酯、萜等其它次生代谢产物的水稻,要从其组织中提取高质量的基因组DNA,一般比较困难,作者以水稻叶片为材料,分别采取了简易提取法,CTAB法,QIAGEN公司Dneasy Plant Mini Kits法,Shanghai Sangon公司Genomic DNA Isolation Kits法4种方法提取水稻基因组DNA;并通过质量分数为0．8％琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增的方法所提取的DNA样品进行检测,将它们在DNA的产量、质量和耗费等方面进行简要比较,并根据分子生物学研究工作的实际特点,确定了CTAB沉淀法为最佳方法。     

微量苔藓样品DNA提取实验方案改良

苔藓植物个体微小，为得到一种适于苔藓微量样品使用的DNA提取方案，首先对前人提取植物DNA的方法进行了筛选；其次对所选择的3种适于提取苔藓样品DNA的方法——CTAB法、尿素法和磁珠法进行了改良；最后通过使用上述3种改良方法对牛角藓Cratoneuron filicinum植物样品总DNA进行提取，并比较了提取效果、提取时间和费用.结果显示：3种改良方法均可从2 mg干燥牛角藓材料中提取总DNA并得到阳性PCR结果.其中，改良磁珠法提取的DNA浓度较高，提取过程时间短，但成本高于其他2种方法.改良CTAB法提取的DNA浓度低于磁珠法，且实验耗时长，但DNA纯度较高，且实验成本仅为磁珠法的5%.PCR实验显示改良磁珠法与改良CTAB法的扩增成功率均为100%,而改良尿素法的扩增成功率仅为75%.认为改良磁珠法与改良CTAB法均可作为微量苔藓样品DNA提取的优选方案.     

水稻细胞核DNA含量和倍性的流式细胞术测定

以3种不同细胞核分离缓冲液制备了水稻幼叶样品,通过流式细胞术比较了其DNA分辨率效果.结果发现:利用Otto buffer制备细胞核悬浮液的效果最好,不仅变异系数较低,碎片少,还对多倍性细胞核的完整性具有很好的稳定作用.该法可用于对水稻根和种子的快速准确的DNA含量测定和倍性鉴定.     

太白红杉总DNA的快速提取方法

对太白红杉总DNA提取方法进行了探讨，并对其不同部位和器官、不同处理方式材料进行了提取实验研究．通过琼脂糖凝胶电泳、限制性内切酶处理等方法对所提取的DNA样品进行检测．结果表明，改良后的CTAB法，对于太白红杉总DNA的提取是一种良好的简单易行的方法，无论是烘干后的材料还是新鲜材料提取的总DNA中基本没有蛋白质及酚类污染．该方法可在短时间内获得大量的DNA样品，并可根据需要对样品进行适当操作．     

4种石山植物DNA提取方法筛选

以石山木本植物掌叶木（Handeliodendron bodinieri）、东京桐（Deutzianthus tonkinensis）、伊桐（Itoa orientalis）和肥牛树（Cephalomappa sinensis）为材料,在常用CTAB法的基础上改良,开发出适合这4种木本植物总DNA提取的3种方法,并将提取出的DNA样品进行ISSR分析,确定出提取这4种石山木本植物的总DNA最佳方法,为研究石山木本植物的遗传多样性奠定基础.     

黑木相思基因组DNA的快速提取

用SDS高盐介质法和1.5×CTAB法提取黑木相思幼叶及叶状柄基因组DNA,将其与2×CTAB法、3×CTAB法、改进的CTAB法进行比较,并用紫外光谱吸收、凝胶电泳、限制性内切酶消化、RAPD(Radomly Amplified Polymorphic DNA)和ISSR(Inter-Simple Sequence Repeat)等方法进行鉴定.结果表明,叶状柄多糖的质量分数较幼叶少,更易于基因组DNA的提取;SDS高盐介质法与1.5×CTAB法提取叶状柄的基因组DNA得率为180.0～697.5 μg·g-1,分子质量为48 kb,D(260)/D(280)=1.750～1.955,无需经Rnase 处理,可直接用于限制性酶切和RAPD及ISSR分析;1.5×CTAB法所提的基因组DNA的纯度优于SDS高盐介质法.综合考虑认为,1.5×CTAB法可作为黑木相思基因组DNA快速提取的简便方法.     

不同气干时间大叶榉木材DNA提取及ISSR-PCR扩增方法研究

大叶榉是我国历史悠久的家具用材.为了找出适用于不同气干时间大叶榉(Zelkova schneideriana)木材的DNA提取方法,用6种不同的提取方法对不同气干时间的大叶榉木材进行了DNA提取,并检测了DNA的数量和质量,而后进行ISSR-PCR的扩增.结果表明:CTAB-SDS法或CTAB法提取浓度最高,试剂盒法提取浓度最低;4a内气干时间的大叶榉木材使用CTAB-SDS法就可获得合格的DNA,长期气干的需用PTB法;引物836对大叶榉木材DNA分子片段扩增效果最好,对长期气干大叶榉标本可扩增出5条条带,长度达到1 500bp;CTAB-SDS法和PTB法适合进行大叶榉气干材DNA的提取.     

甘薯幼苗叶片基因组DNA提取方法的比较研究

以甘薯幼苗叶片为材料,分别采用CTAB法和SDS法对DNA的提取方法进行研究。结果表明,CTAB法更适合甘薯幼苗叶片基因组DNA的提取,所得DNA质量好,纯度高。     

Effects of crown ether on some physiological properties and economic characteristics of spikes of wheat and panicles of rice

The seeds of wheat and the young roots of rice were treated with SU15-C-5 and B15-C-5. The effects of crown ether on economic characters of the spike and some physiological properties in both crops were studied. The results showed that crown ethers could promote the growth of wheat seedling, improve the contents of chlorophyll(a+b), reduce the ratio of chlorophyll a to b in the leaves of rice, thus bring about good effects of economic characters of the spike. Especially, it suggests that SU15-C-5 showed better physiological effects than B15-C-5. Wengjing: born in Feb. 1936, Associated Professor     

植物组织DNA的提取及纯化方法的研究

以小麦的幼芽和子房为材料,采用高等植物ＤＮＡ 简易快速提取法,对小麦组织ＤＮＡ提取及纯化中的若干问题做了探讨。研究表明：小麦幼芽是提取ＤＮＡ 的较为理想的材料;粗提ＤＮＡ 用ＲＮＡ 酶法进行纯化,其纯化效果较好;纯化的幼芽ＤＮＡ 稀释８ 倍即符合导入要求。     

岩陀DNA提取方法研究

以岩陀植物嫩叶为材料,用不同方法对岩陀叶片DNA进行提取,比较提取的质量差异,寻找适合岩陀叶片总DNA的提取方法,以满足多基原民族药岩陀DNA条形码识别系统构建的研究需要。采用十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)法、改良的CTAB法、十二烷基硫酸钠(SDS)法及碱裂解法提取岩陀叶片总DNA,利用琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度法及PCR扩增效果检查DNA提取的质量。结果显示四种方法均能从岩陀植物叶片中提取到基因组DNA,改良CTAB法提取的DNA纯度和完整性明显好于其他方法,且采用此法进行PCR扩增获得的目标条带明亮单一,扩增效率达到100%。改良的CTAB法是岩陀叶片总DNA的提取中最为合适的提取方法,能够满足后续DNA条形码的研究需要。     

源库处理对两种不同穗型水稻品种籽粒灌浆的影响

选用直立穗型水稻品种辽粳454和弯曲穗品种辽开79在相同栽培条件下，通过剪叶、疏花处理改变源库关系，比较源库处理对两种不同穗型水稻品种籽粒灌浆的影响．结果表明：正常情况下，直立穗品种源的供应能力强，能够充分满足籽粒灌浆的需要，与直立穗品种比较，弯曲穗品种源的供应能力较弱．减源时，二者的强、弱颖花的灌浆都会受到不同程度的影响，其中直立穗品种弱势颖花所受影响大，而弯曲穗品种甚至强势颖花也受到了影响．疏花处理对辽粳454的强势籽粒影响不大，却使其弱势籽粒的灌浆得到很大改善；对辽开79的强、弱势粒都有很大影响．源库处理对两品种的强势粒籽粒重影响不大，但对弱势粒籽粒重影响较大．     

毛白杨成熟叶片基因组DNA提取方法的比较研究

比较了4种毛白杨成熟叶片DNA的提取方法,结果表明,SDS法的提取效果优于CTAB法.其中,SDS-II法步骤较少,操作简便,不易造成实验误差,OD260/280值为1.87,提取的DNA片段长度在20kb左右,提取得率为42μg/g,为4种方法中最高.ISSR-PCR实验的效果表明,SDS-II法提取的DNA可以做为ISSR分子标记的模板DNA.     

“丰宝”植物生长促进剂在农业生产中应用效果研究

“丰宝”植物生长促进剂处理小麦、水稻、玉米种子，可以提高幼苗绝对干重。大田拌种、浸种、叶面喷施，可促进植株粒数、数重、千粒重增加，平均亩增产１５％左右。     

不同穗型的两个水稻品种株型的研究

以不同穗型水稻品种为试材,研究不同穗型水稻的株型.结果表明：与弯曲穗型水稻相比,直立穗型水稻品种在灌浆过程中,穗子基本保持直立,叶片尤其是上三叶叶片夹角小,从而使得在水稻的生育后期冠层光分布合理,群体中下部受光条件好,有利于CO2的扩散,有利于籽粒灌浆;而弯曲穗型品种随着灌浆的进行,穗子逐渐弯曲,对茎秆的作用力增大,易倒伏.在水稻的开花期和乳熟期群体饲喂CO2,发现稻穗的光合量仅占单株总光合量的5.4%,即稻穗由弯曲变直立后,穗本身功能并未增强.