微量苔藓样品DNA提取实验方案改良 |
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引用本文: | 赵晓彤,梁文达,沈风娇,王玉婷,赵建成,李琳,石硕.微量苔藓样品DNA提取实验方案改良[J].河北师范大学学报(自然科学版),2023(5):515-521. |
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作者姓名: | 赵晓彤 梁文达 沈风娇 王玉婷 赵建成 李琳 石硕 |
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作者单位: | 1. 河北师范大学生命科学学院;2. 石家庄润德学校 |
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基金项目: | 国家自然科学基金(31900205);;河北省自然科学基金(C2019205175);;河北省高等学校科学技术研究项目资助(QN2019116);;石家庄市科技计划项目(221490222A); |
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摘 要: | 苔藓植物个体微小,为得到一种适于苔藓微量样品使用的DNA提取方案,首先对前人提取植物DNA的方法进行了筛选;其次对所选择的3种适于提取苔藓样品DNA的方法——CTAB法、尿素法和磁珠法进行了改良;最后通过使用上述3种改良方法对牛角藓Cratoneuron filicinum植物样品总DNA进行提取,并比较了提取效果、提取时间和费用.结果显示:3种改良方法均可从2 mg干燥牛角藓材料中提取总DNA并得到阳性PCR结果.其中,改良磁珠法提取的DNA浓度较高,提取过程时间短,但成本高于其他2种方法.改良CTAB法提取的DNA浓度低于磁珠法,且实验耗时长,但DNA纯度较高,且实验成本仅为磁珠法的5%.PCR实验显示改良磁珠法与改良CTAB法的扩增成功率均为100%,而改良尿素法的扩增成功率仅为75%.认为改良磁珠法与改良CTAB法均可作为微量苔藓样品DNA提取的优选方案.
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关 键 词: | 苔藓植物 CTAB法 尿素法 磁珠法 DNA提取 |
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