Idaho Rapidcycler PCR仪上用薄壁管进行RAPD扩增的程序优化

以地桉ＤＮＡ为材料,对Idaho Rapidcycler扩增仪上用薄壁管进行ＲＡＰＤ扩增的程序进行了优化研究,通过逐步对退火、延伸和变性的温度和时间及总的循环次数设置不同梯度和亚梯度,比较不同梯度和亚梯度的扩增结果,确定优化程序为：９３℃预变性１min;再４０次循环：９３℃变性２０s,38℃退火２１s, 7２℃延伸７min。该程序的扩增时间较短,具有较好的特异性和重复性。另外,薄壁管反应架在反应室的内位比同时扩增的外位效果差,扩增时只能利用外位。     

尾叶桉和细叶桉无性系的RAPD指纹图谱构建

利用ＲＡＰＤ分子标记技术对来自９个起源地点的尾叶桉（ＥｕｃａｌｙｐｔｕｓｕｒｏｐｈｌａＳ．Ｔ．Ｂｌａｋｅ）和细叶桉（Ｅ．ｔｅｒｅｔｉｃｏｒｎｉｓＳｍｉｔｈ）共２２个无性系的研究表明,１３个引物共扩增出１１０个位点,多态性位点９１个,在起源地点间差异显著的多态性位点２５个,各无性系有其特异的ＲＡＰＤ扩增谱带。利用多态性位点的数据矩阵,计算了各无性系间的遗传距离,并构建了无性系间的遗传关系聚类图。     

Idaho Rapidcycler PCR仪上用薄壁管进行RAPD扩增的程序优化

以尾叶桉DNA为材料,对IdahoRapidcycler扩增仪上用薄壁管进行RAPD扩增的程序进行了优化研究。通过逐步对退火、延伸和变性的温度和时间及总的循环次数设置不同梯度和亚梯度,比较不同梯度和亚梯度的扩增结果,确定优化程序为:93℃预变性1min;再40次循环:93℃变性20s,38℃退火21s,72℃延伸1min;最后72℃延伸7min。该程序的扩增时间较短,具有较好的特异性和重复性。另外,薄壁管反应架在反应室的内位比同时扩增的外位效果差,扩增时只能利用外位。     

尾叶桉二代种子园家系选择及遗传评估

对尾叶桉二代种子园22、29个月生的32个家系进行性状分析与遗传评估。结果表明:尾叶桉树高、胸径和材积生长量在家系、区组间均存在极显著差异;保存率、干形、分枝及开花量在家系间存在显著差异;经性状综合评定认为,第21,11,1,26,27,40,18和10号家系是该种子园内综合表现最好的家系,测试结果可为二代种子园实施良种分类定向供种和间伐强度提供依据;在25%入选率条件下,种子园材积遗传增益为12.96%~13.67%。     

桉树多树种无性系综合选择

对20个桉树无性系的生长性状、形质性状进行差异分析和综合评价，结果表明：各性状在无性系问差异均极显著，各性状的无性系重复力为61．46％～93．84％，在较大程度上保持着年度间的持续稳定。各生长性状间均呈紧密的表型、遗传和环境正相关关系，形质性状中仅分枝与生长性状呈紧密的负相关关系。5．5年生最优无性系TH9113单株材积达0．09208m^3，是最差无性系CP01的407．80％，是所有无性系均值的196．29％；无性系TH9510形质性状表现最优。应用主成分分类方法将参试无性系分成4类，速生类材积是慢生类的264．99％，增产效果十分显著。     

4种石山植物DNA提取方法筛选

以石山木本植物掌叶木（Handeliodendron bodinieri）、东京桐（Deutzianthus tonkinensis）、伊桐（Itoa orientalis）和肥牛树（Cephalomappa sinensis）为材料,在常用CTAB法的基础上改良,开发出适合这4种木本植物总DNA提取的3种方法,并将提取出的DNA样品进行ISSR分析,确定出提取这4种石山木本植物的总DNA最佳方法,为研究石山木本植物的遗传多样性奠定基础.