锯缘青蟹(Scylla serrata)凝集素的分布及部分性质研究

采用生化方法对锯缘青蟹(Scylla serrata)凝集素进行了初步研究．结果表明．在锯缘青蟹体内具有血球凝集活性的凝集素．凝集素不仅分布于肌肉组织，同时分布于血清中．且两者在热稳定性、pH适应性、对金属离子的依赖性等方面都存在着差异．分别向肌肉提取液和血清加入50％的固体硫酸铵使凝集素沉淀．用不同饱和度的硫酸铵溶液依次对两沉淀物进行抽提．抽提物的比活力分别提高了约2．25倍和1．27倍．总活力回收分别为33．36％和16．70％．     

锯缘青蟹抗菌肽Scygonadin基因的转录表达特性研究

Scygonadin是从锯缘青蟹生殖系统分离获得的一种抗菌肽,我们用Dot-blot检测了该基因在锯缘青蟹幼体(溞状幼体和大眼幼体)和成体锯缘青蟹(雄性和雌性)的鳃、甲壳、眼、血细胞、肝胰脏、心脏、肌肉、甲壳下皮层、胃和生殖系统等10个不同组织器官中的转录表达情况.结果显示,该基因仅在雄性生殖系统中转录表达.进一步分析该基因在性成熟雄性锯缘青蟹和远洋梭子蟹生殖系统中不同部位(精巢、输精管、贮精囊和射精管)的转录表达情况,结果显示,Scygonadin基因主要在性成熟锯缘青蟹的射精管中转录表达.     

锯缘青蟹对病原菌感染的急性反应功能蛋白质组

为研究锯缘青蟹对常见重要病原菌的急性反应蛋白质组．将锯缘青蟹随机分为四组．分别注射生理盐水、副溶血弧菌、鳗弧菌和嗜水气单胞菌．继而提取肌肉蛋白进行双向电泳．通过比较各组肌肉蛋白的双向电泳图谱获得三个差异表达的蛋白．对这三个差异蛋白进行肽质量指纹图谱及其生物信息分析．鉴定为Calexeitin、无翅蛋白片断、速激肽相关肽．这些结果对研究锯缘青蟹的抗病蛋白及其机理具有重要意义．     

温度骤降对锯缘青蟹可溶性蛋白与可溶性糖含量的影响

锯缘青蟹是生活在河口海区的一种重要经济甲壳动物,其生活的环境温度经常发生温度的骤然增高或降低.本研究采用生物化学的方法对温度骤降后不同时间锯缘青蟹鳃,肝胰腺和肌肉中可溶性蛋白和可溶性糖含量进行测定.结果显示锯缘青蟹可溶性蛋白和可溶性糖含量在骤降温初期(2 h)升高,骤降温2 h后可溶性蛋白虽然呈现波动性变化,但最后出现明显下降;骤降温2 h后可溶性糖含量在鳃中逐渐下降,而在肝胰腺和肌肉中呈现波动性下降.实验结论为锯缘青蟹骤降温初期可溶性蛋白和可溶性糖增高是机体对寒冷应激的一种积极反应,后期下降是生理反应中物质和能量消耗所致.     

锯缘青蟹感染副溶血弧菌后血淋巴中差异蛋白的初步研究

采用蛋白质组学技术对锯缘青蟹受细菌感染后血淋巴中蛋白表达变化的情况进行初步研究.试验中以未感染锯缘青蟹为对照,用密度为每毫升5.0×107个副溶血弧菌的菌液感染锯缘青蟹,于注射后18 h分别抽取活菌注射组、灭活菌注射组、空白对照组的锯缘青蟹的血淋巴,进行蛋白差异分析.结果发现,与对照相比,锯缘青蟹感染细菌后,血淋巴中出现1条明显差异条带.肽质量指纹图谱及生物信息分析表明,该蛋白为cryptocyanin,是血蓝蛋白基因家族中的重要成员,提示cryptocyanin与免疫反应有关.     

锯缘青蟹大眼幼体与斑节对虾的混养试验

为了寻找锯缘青蟹(Scylla serrata Forskal)养殖种苗的新方法，于2003年4～9月在广西合浦山口虾场进行锯缘青蟹大眼幼体与斑节对虾的混养试验。试验池塘2口，大小相等，面积共2．6hm62，水深1．2～1．5m。试验结果是，总产虾蟹3775．6kg，其中锯缘青蟹947．6kg，对虾2828．0kg。锯缘青蟹大眼幼体养到成体时的成活率最高可达12．8％。     

锯缘青蟹可溶性蛋白与可溶性糖的季节变化

锯缘青蟹(Scylla serrata)是生活在河口海区的一种经济甲壳动物,环境温度对其生化组成具有重要影响,而其环境温度是随季节变化而不断变化.本研究采用生物化学方法对锯缘青蟹鳃、肝胰腺和肌肉等3种器官组织中可溶性蛋白和可溶性糖含量的季节变化进行研究.结果显示锯缘青蟹3种不同器官、组织中可溶性蛋白含量,均是夏季最低,冬季最高,春秋季介于2者之间.3者的变化趋势一致,春季后降低,夏季降至最低,然后秋季和冬季依次升高.3种不同器官、组织中可溶性糖含量均是春季最高,夏季最低,秋冬季介于2者之间.其变化趋势是春季后降低,夏季降至最低,然后秋季和冬季升高(肝胰腺)或依次升高(鳃和肌肉).本实验结论为锯缘青蟹鳃、肝胰腺和肌肉中可溶性蛋白的季节变化基本一致;不同器官组织中可溶性糖的季节变化也较为一致.但可溶性蛋白和可溶性糖之间的季节变化有差异,说明不同器官组织中同一生化成分的季节变化较为相似;不同生化成分的变化规律各异.     

不同温度和盐度对锯缘青蟹抱卵的影响

1999～2004年分别在浙江温岭、三门和江苏通州等地进行锯缘青蟹生产性育苗，并结合生产实践，开展了不同温度、盐度等对锯缘青蟹抱卵的效果试验，结果表明：青蟹培育池水温15℃时，青蟹可以抱卵，25℃时抱卵情况最佳；盐度20．2时青蟹可抱卵，但优质抱卵率低，盐度升高会改善抱卵质量，25～30是青蟹抱卵的理想盐度。     

锯缘青蟹越冬温室的热环境试验研究

在冬季寒潮来临时,对锯缘青蟹越冬温室内外的气温、相对湿度、水温等与热环境相关联的因子进行昼夜连续测试,分析了它们的变化规律,旨在为锯缘青蟹越冬温室的管理提供科学依据.     

锯缘青蟹一种球状病毒的分离和组织病理观察

从患病锯缘青蟹组织中分离出一种无囊膜球状病毒,直径50~60 nm.通过病理切片观察,病蟹肝胰腺、肌肉、心脏、肠和鳃等多处组织器官受到感染,该病毒分布在细胞浆中,呈晶格状排列,不形成包涵体;这种病毒会导致细胞瓦解,细胞核肿大变形,核质聚缩,核膜破损,肌丝断裂,线粒体坏死等症状.     

人工感染呼肠孤病毒对拟穴青蟹部分免疫因子的影响

采用注射和浸泡的方式人工感染拟穴青蟹呼肠孤病毒,研究了其对拟穴青蟹血细胞密度以及血清中酚氧化酶(PO)、超氧化物歧化酶(SOD)和碱性磷酸酶(AKP)活力的影响.结果表明:注射(第Ⅱ组)和浸泡(第Ⅳ组)方式均能感染健康青蟹,病发死亡时间为7～9 d,死亡率达100%,血细胞平均密度在试验36～72 h间迅速上升并达最高值,其血细胞密度最高值分别为1.4008×107cells/mL与1.8243×107cells/mL;感染病毒的青蟹PO活性均大致呈现下降的趋势,其中,第Ⅳ组感染12 h青蟹PO活性相对对照组显著升高(P<0.05),其值为(6.90±1.54),达实验所测PO活性最高值;各实验组血清SOD活性呈无规律的变化;AKP活性感染组与对照组表现不同.表明测定血细胞密度以及PO和AKP活性可用来辅助诊断青蟹疾病,而SOD活性变化不能很好地表征青蟹受病毒感染的状况.     

拟穴青蟹β-肌动蛋白基因的克隆与分析

β-肌动蛋白广泛存在于真核生物中,在维持细胞结构、细胞运动和细胞分裂等生理活动中发挥着重要作用.运用RACE技术克隆了拟穴青蟹(Scylla paramamosain)β-肌动蛋白基因,并用RT-PCR方法检测该基因在成体各组织中的表达情况.拟穴青蟹β-肌动蛋白cDNA全长1 337 bp,5′端非编码区为67 bp,3′端非编码区为139 bp,开放阅读框1 131 bp编码376个氨基酸.拟穴青蟹β-肌动蛋白与其他节肢动物β-肌动蛋白氨基酸序列的相似性高达98％～99％.系统进化树显示拟穴青蟹β-肌动蛋白基因的分子进化地位与其生物学分类地位一致.半定量RT-PCR分析结果表明,β-肌动蛋白基因在拟穴青蟹视神经节、脑神经节、胸神经节、性腺、鳃、心、胃、肌肉、肝胰腺共9个组织器官中的表达基本一致,具有良好的稳定性.     

南通沿海文蛤暴发性疾病的组织病理学研究

采用常规石腊切片法、以正常样品作对照,对2003年5月南通沿海发生暴发性疾病的文蛤不同组织进行了组织病理学观察。结果表明,患病文蛤各组织都发生了不同程度的病理变化,主要表现为:外套膜、鳃、消化管、足等上皮细胞肿胀、变性、破裂或脱落,结缔组织增生、变性或溶解,血淋巴细胞增多,肌纤维结构松散、断裂,组织中嗜碱性细胞增多;鳃组织发生坏死崩解;消化盲囊腺泡广泛受损,导管上皮及结缔组织发生溶解。文蛤的这些组织发生了严重病变,使其功能遭到破坏,是导致文蛤发病死亡的病理学基础。     

锯缘青蟹不同器官组织中4种类型ATPase活性比较研究

本实验采用生化方法研究了锯缘青蟹的鳃、肝胰腺和肌肉等不同器官组织中4种类型ATPase活性.结果表明,不同器官组织中同类型ATPase活性各异,Na K ATPase活性由强至弱为鳃>肝胰腺>肌肉.Ca2 ATPase活性为肌肉>肝胰腺>鳃.Mg2 ATPase活性为鳃>肌肉>肝胰腺.Ca2 Mg2 ATPase活性则为肌肉>鳃>肝胰腺.同一器官组织中不同类型ATPase活性也有较大的差异,鳃中Na K ATPase活性最大,其余的依次为Mg2 AT Pase,Ca2 Mg2 ATPase,Ca2 ATPase;肝胰腺中Na K ATPase活性最强,其余的依次为Ca2 Mg2 ATPase,Mg2 ATPase,Ca2 ATPase;肌肉中Ca2 Mg2 ATPase活性最大,其余的依次为Ca2 ATPase,Na K ATPase,Mg2 ATPase.此外,锯缘青蟹同一器官组织中同类型ATPase在不同个体间也存在一定差异.不同器官组织中4种类型ATPase活性各异主要与其所执行的生理功能密切相关.     

蟹糊贮藏过程品质变化的动力学模型研究

研究蟹糊在不同温度下储藏过程中菌落总数和挥发性盐基氮的变化规律,并建立动力学模型,为预测蟹糊在流通领域中品质变化提供参考。结果表明:蟹糊的菌落总数和挥发性盐基氮值随着贮藏时间延长而增加,随着贮藏温度增高而上升;建立的菌落总数和挥发性盐基氮随时间和温度变化的回归方程,验证得出的方程回归系数均>0.9,具有较高的拟和精度。建立的动力学方程中微生物生长活化能(En)为112.4KJ/mol、微生物生长速率常数(kn)为1.049×1020e-112413.6/RT;挥发性盐基氮活化能(Et)为119.1kJ/mol、挥发性盐基氮速率常数(kt)6.1×1020e-119106.3/RT,经验证在温度0～25℃内,所建数学模型能较好地反映蟹糊贮藏期间的品质变化的过程。     

锯缘青蟹精氨酸激酶基因的克隆与表达

通过分子生物学方法,克隆得到锯缘青蟹（Scylla serrata）精氨酸激酶（Arginine Kinase,AK）开放阅读框基因序列.测序结果显示：该开放阅读框基因的序列长度为1 071 bp,编码356个氨基酸残基;该序列登录Genbank（GQ：851626）,序列比对结果显示,锯缘青蟹精氨酸激酶与凡纳滨对虾（...     

仔兔白肌病病理学

摘要: 目的观察仔兔白肌病病理改变。方法对发病仔兔进行病原微生物分离培养,大体剖检,选取骨骼肌、心 肌、脊椎等脏器,用10% 中性福尔马林固定,常规病理制片,HE 及钙染色并进行病理组织学观察。结果全身骨骼 肌广泛对称性肌营养不良,心肌及平滑肌也不同程度受累,其中有4 只仔兔的皮下组织、骨骼肌及脊椎管内可见出 血,2只合并球虫性肠炎。结论确诊仔兔所患疾病为白肌病,病理改变主要特征是全身骨骼肌广泛变性、凝固性 坏死、间质结缔组织增生。