香菇和桃红平菇属间原生质体融合及子实体形成

广香（ＬｅｎｔｉｎｕｓｅｄｏｄｅｓｏｆＧｕａｎｄｇｄｏｎｇ）４产桃红平菇（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｒｈｏｄｏｐｈｙｌｌｕｓ）为出发菌株，以它们的突变株为直接亲本，用溶壁酶Ｌｙｗｅｌｌｚｙｍｅ分离原生质体，用ＰＥＧ作融合剂进行生质体融合，获得若干株融合体，其中有些融合体已形成子实体，融合体形成子实体的培养时间长（５－９个月）出菇温度广（１３－３０℃），形成的子实体有的象香菇，有的类似平菇；子实体产生的担孢     

广西红菇子实体及分离株的rDNA ITS序列分析

为了研究广西食用红菇rDNA ITS片段遗传多样性,鉴别红菇组织分离株的真伪,用一对通用引物对采自广西浦北县、容县和上思县的18个红菇子实体样本及3个组织分离株的rDNA ITS片段进行PCR扩增,扩增产物纯化后测序,运用相关序列分析软件对ITS区全序列进行分析,并和GenBank／EMBL／DDBJ三大核酸序列数据库进行同源性检索。结果获得12个红菇子实体和3个分离株的ITS和5．8S rDNA区段的完整序列,3个分离株的ITs序列全长明显小于子实体样本的ITS序列全长;3个组织分离株与红菇属真菌的遗传距离大;除2个采自浦北龙门的子实体与其它子实体的同源性小于0．95外,来自不同区域的其余子实体样本间rDNA ITS序列同源性都达到0．98以上;12个子实体的ITS区段与GenBank中已知的红菇属真菌的相似率都不大于0．90。由此推断3个组织分离株均不是红菇的分离株而可能是子实体的寄生菌或污染菌;广西浦北县、容县和上思的食用红菇样本没有地理类群差异,但在浦北产区可能存在多种食用红菇共同生长。     

河南的红菇科真菌资源研究(Ⅰ)

红菇科（Ｒｕｓｓｕｌａｃｅａｅ）是担子菌亚门的（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔｉｎａ）一个自然类群,在河南山区分布的种类隶属乳菇属（Ｌａｃｔａｒｉｕｓ）和红菇属（Ｒｕｓｓｕｌａ）。本文依据采集的标本,鉴定、整理出乳菇属的种类有１４种,其中食用菌８种、药用菌３种、毒菌５种。此外,它们多是菌根菌,与林业有着密切的关系;还有不少种类的子实体中含有抗癌物质,具有抑制肿瘤的作用。     

竹材真菌的研究

对发霉变色竹材上的真菌进行了分离培养和鉴定。结果表明用组织分离得到了３个真菌分离物；用孢子分离得到了６个真菌分离物；而用子实体直接鉴定的有４个种。它们隶属于半知菌亚门的两个纲，３个目，１１个属的真菌。在竹材上最常见的真菌是葡萄生交链孢（Ａｌｔｅｒｎａｒｉａｖｉｔｉｃｏｌａ），局限曲霉（Ａｓｐｅｒｇｉｌｌｕｓｒｅｓｔｒｉｃｔｕｓ），多主枝孢霉（Ｃｌａｄｏｓｐｏｒｉｕｍｈｅｒｂａｒｕｍ）和青霉（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍｓｐ．）。     

河南的红菇科真菌资源的研究（Ⅱ）

红菇属（Ｒｕｓｓｕｌａ）是红菇科（Ｒｕｓｓｕｌａｃｅａｅ）的一个重要的属。本文依据在河南山区采集的标本,鉴定、整理出红菇属的种类有３１种,其中食用菌２４种、药用菌４种、毒菌５种。此外,它们多是菌根菌,与林业有着密切的关系,还有不少种类的子实体中含有抗癌物质,具有抑制肿瘤的作用。     

真菌纤维二糖水解酶基因的克隆与表达研究

采用能够转化细菌和真菌的双功能质粒ｐＤＬ１，与部分酶切的糙皮侧耳（Ｐｌｅｕｒｏｔｕｓｏｓｔｒｅａｔｕｓ）基因组ＤＮＡ片段进行体外重组。再用重组质粒ＤＮＡ转化玉米黑粉菌（Ｕｓｔｉｌａｇｏ，ｍａｙｄｉｓ）的原生质体，在平皿上筛选抗新霉素的转化子，转化率达８００转化子／μｇＤＮＡ，由此在玉米黑粉菌中建立了糙皮侧耳的基因文库。随机选出１５个转化子提取其ＤＮＡ，以３２Ｐ标记的ｎｅｕｒ基因酶切片段作为探针进行打点杂交，全部显示阳性，证明抗性菌落不是来源于敏感细胞的回复突变。以李氏木霉（Ｔｒｉｃｈｏｄｅｒｍａｒｅｅｓｅｉ）的纤维二糖水解酶（Ｃｅｌｌｏｂｉｏｈｙｄｒａｓｅｓ，简称ＣＢＨ）ＣＢＨⅡ基因末端片段为探针，从阳性克隆菌株中提取ＤＮＡ进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ转移并杂交，结果证明本研究已成功地克隆了糙皮侧耳纤维二糖水解酶ＣＢＨⅡ基因。基因的表达检测证明，克隆菌株具有纤维二糖水解酶活力。     

翘嘴鳜肝肾坏死症病原菌的分离及初步鉴定

从主要呈现肝肾坏死症的翘嘴鳜病灶部位分离到９个菌株,其中３个菌株能通过人工感染在正常翘嘴鳜上复制出与自然发病相同的症状。用直接荧光抗体法对致病菌株的鉴定结果表明,本研究中分离的３个菌株均不同于过去从患病翘嘴鳜上已经分离到的柱状嗜纤维菌（Ｃｙｔｏｐｈａｇａ ｃｏｌｕｍｎａｒｉｓ）和嗜水气单胞菌（Ａｅｒｏｍｏｎａｓ ｈｙｄｒｏｐｈｉｌａ）。     

灵芝主要营养成分的测定分析

分析了灵芝（ＧａｎｏｄｅｒｍａＬｕｃｉｄｕｍ,ｅｘｆｒ．）及紫芝（ＧａｎｏｄｅｒｍａｊａｐｏｎｉｃｕｍＦｒ．Ｌｉｏｇｄ）的子实体、菌丝体中所含的主要营养成分的种类及其相对含量．结果表明,（１）菌丝体中蛋白质的净含量和总糖含量都高于子实体;（２）３种子实体均含有１８种氨基酸,其中人体必需氨基酸的相对含量高于５０％,比一般食用菌约高１０％;（３）子实体中还含有Ｍｎ,Ｃｒ,Ｃｕ,Ｆｅ,Ｃａ,Ｍｇ,Ｚｎ,Ｓｅ,Ｇｅ等多种微量元素．     

可可茶种群分化及其与近缘种的亲缘关系

利用随机多态性ＤＮＡ（ＲＡＰＤ）技术对茶Ｃａｍｅｌｉａｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ）ＯＫｔｚｅ、普洱茶Ｃａｓａｍｉｃａ（Ｍａｓｔ）Ｃｈａｎｇ和可可茶ＣｐｔｉｌｏｐｈｙｌａＣｈａｎｇ含不同类型嘌呤生物碱（含可可碱、含可可碱＋咖啡碱、含咖啡碱）的３个类群进行了分析．选用１６个引物（１０ｂｐ）扩增出４０１个ＤＮＡ片段,用于遗传相似性分析,构建树系图．分析结果表明：①可可茶种群可分为含可可碱和含可可碱＋咖啡碱两个类群,而含咖啡碱性状的类群应归并到茶Ｃｓｉｎｅｎｓｉｓ（Ｌ）ＯＫｔｚｅ类;②可可茶含可可碱和含可可碱＋咖啡碱两个类群之间亲缘关系较近,来自同一起源,后者可能是由于可可茶与近缘种杂交所致;③可可茶与近缘种茶、普洱茶之间的亲缘关系较远,支持将可可茶划分为一个独立种的观点     

低温环境中放线菌的研究

从云南省德钦白芒雪山及中甸保护区土壤样品中分离到许多耐低温放线菌，从中选出６０株代表菌，用ＡＴＣＣ和ＣＣＣＣＭ的１０株链霉菌典型菌株做标准菌，选用８２项原始特征进行形态、生理、生化等实验．运用微生物数值分类程序计算菌株间的相似性（Ｓｓｍ），用不加权连锁法（ＵＰＧＭＡ）进行聚类分群，在６７％的相似性上，可将这些实验菌株分为２个大群，５个亚群．同时将它们与７０株高温放线菌进行比较，两者除生长温度明显不同外，在形态特征和生理生化特性上差异显著     

粤北山区9株香菇菌株酯酶和过氧化物同工酶的研究

利用聚丙烯酰胺凝胶垂直板电泳技术对粤北地区的9个香菇菌株的酯酶和过氧化物同工酶进行了研究。在9个菌株的酯酶同工酶电泳图谱中,2个野生菌株与7个栽培菌株间的酶带数量、浓淡宽窄差异较大：进一步用UP-GMA平均链锁程序进行聚类分析发现,相似系数为0.3时野生菌株与栽培菌株才能归为一大类。相似系数为0.6时栽培菌株可归为一大类,相似系数为0.72时9个菌株可以分为5大类9个菌株过氧化物同工酶酶带均为1条。酶带浓淡和宽窄有差异,野生香菇的酶带最浓最宽。结果表明：粤北香菇资源丰富,遗传差异较大,特别是野生香菇菌株具有较大的开发利用价值;且酯醯和过氧化物同工酶对香菇菌株的分类、鉴定和遗传标记等方面都具有参考价值。     

川西北高原野生垂穗披碱草遗传多样性的ISSR分析

采用ISSR分子标记技术对25份来自川西北高原的野生垂穗披碱草(Elymus nutans Griseb.)种质进行遗传多样性研究.研究结果如下:(1)筛选出10条ISSR引物对25份材料共扩增出120条清晰的条带,其中多态性条带85条,多态性条带比率为70.8%;每条引物扩增条带数变化为9-17条,平均每条引物总扩增的带数为12条,其中多态性的条带数变幅为3-16条,平均每条引物的多态性条带数为8.5条.(2)供试的25份垂穗披碱草种质间的遗传相似系数变幅为0.703-0.974,平均值为0.828,供试材料间表现出了丰富的遗传多样性.(3)基于遗传相似系数对供试材料进行了聚类分析和主成分分析,聚类分析结果可以将供试的野生垂穗披碱草种质资源分明显分成3类,聚类分析结果与材料的地理来源间具有一定的相关性.     

西藏石榴野生群体的SSR遗传多样性分析

【目的】调查西藏地区野生石榴种质资源,分析西藏野生石榴群体的遗传多样性和遗传结构,为野生石榴资源的保护和利用提供理论依据。【方法】使用13对SSR引物对3个自然群体共42份西藏地区野生石榴种质资源材料DNA进行PCR扩增,毛细管电泳检测扩增片段长度,使用GenAlEx和Arlequin等软件对SSR数据进行分析。【结果】13对引物共检测到44个等位基因,平均3.385个,引物的平均有效等位基因数(N_e)、香农信息指数(I)、期望杂合度(H_e)和多态信息量(PIC)分别为1.971、0.771、0.481和0.393。3个野生群体的平均有效等位基因数(N_e)、平均香农信息指数(I)和平均期望杂合度(H_e)分别为1.867、0.646和0.421,林芝b(LZb)群体的遗传多样性水平高于其他2个群体。AMOVA分析表明,群体内遗传变异高达88.43%,3个群体间的遗传分化系数(F_st)为0.116。种质聚类分析将供试种质划分为3个亚群,结果与种质地理来源具有一定关联性。遗传结构分析显示西藏野生石榴有4个可能的基因库来源。【结论】13对SSR引物可用于西藏野生石榴种质的遗传多样性等研究。西藏野生石榴种质的遗传变异主要存在于群体内;林芝b(LZb)群体遗传多样性最高,遗传结构复杂,且含有最多的野生种质采样点,可予以优先保护。     

2株甲型肝炎病毒蛋白酶2A核苷酸序列的测定与比较

从甲型肝炎病毒２个不同株感染的ＫＭＢ１７细胞中提取总ＲＮＡ,经ＲＴ－ＰＣＲ特异性扩增出此２毒株病毒蛋白２Ａ基因,将２个２Ａ基因克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ载体上,经ＤＮＡ序列测定,得到２个２Ａ基因的核心苷酸序列,序列比较发现它们及与ＨＡＶ野毒株相对应序列有突变存在,Ｈ２株与ＨＭ１７５相比有一个点突变,同源性为９９．７２％;与ＨＭ１７５比较,Ｈ２株和Ｌ８株第３１９７位核苷酸均由Ａ突变为Ｇ,相应的氨基酸由丝氨酸     

中国香菇野生菌株的DNA多态性研究

采用20个不同来源的野生香菇菌株，用RAPD方法对这些香菇菌株的多态性进行了研究．结果发现，有11个引物表现清晰的RAPD谱带并呈显著多态性，同时发现香菇菌株的亲缘关系与生态地理有一定的关系，但没有必然的联系．     

老芒麦野生种质资源遗传多样性的SSR分析

采用SSR标记技术,对来源于内蒙古5个盟市的7个样点的35份老芒麦（Elymus sibiricus）野生种质资源进行了遗传多样性分析．从筛选出多态性强、重复性好的20对引物中,检测出326个等位位点,平均每对引物产生12．55个多态位点;多态位点百分率为76．99％,遗传距离的变化范围在O．0000—0．3079之间,说明供试材料问亲缘关系较近;35份老芒麦种质的Nei’S遗传多样性指数（h）为0．2223,Shannon指数（I）为0．3288,意味着供试的35份材料间的遗传多样性相对丰富．在O．71水平处,测试材料大致分为两大类,来源于内蒙古东部、中部和西部区的材料交叉明显,表现出地理非同源性．本研究为探讨老芒麦遗传变异与环境的关系及老芒麦野生种质资源的保护提供了理论依据．     

RAPD analysis of genetic variability among Stylosanthes guianenesis accessions of resistant and susceptible to the stylo anthracnose

Stylosanthes guianenesis Sw. is an important tropical forage legume grown and utilized in the tropics and the subtropics of South China. Anthracnose, caused by Colletotrichum gloeosporioides (Penz.) Sacc., is a major constraint to the extensive use of Stylosanthes. Forty-five accessions of S. guianensis were assessed with RAPD for genetic diversity and for resistance to anthracnose. RAPD analysis was performed using twenty primers screened from 200 arbitrary oligonucleotides, and a 71.5% level of polymorphism was found. The dendrogram obtained with unweighted pair group method of averages (UPGMA) based on the RAPD data showed genetic similarity from 50% to 94% among all stylo accessions, and fourteen clusters were defined at 66.5% genetic similarity. Two strains of C. gloeosporioides from stylo in China were used for anthracnose resistance screening. All plant accessions showed variation in the reaction to two strains and the correlation of resistance had a value of 0.904. Multiple correspondence analysis displayed a random distribution of the resistance or susceptibility response with respect to the genetic diversity measured by RAPD analysis except one group. Mean distance was also calculated to determine the diversity within clusters. From our results, the RAPD analysis is an effective and efficient technique of providing quantitative estimates of genetic similarity among stylo accessions.     

Pseudomonas brassicacearum的数量分布差异及生物防治小麦全蚀病和油菜根腐病

通过3种PCR技术测定基因特征和测定3种生化特征,对来自南澳洲两块对比小麦田土壤中的Pseudomonas brassicacearum种群的菌株进行了分析研究.结果显示,两种不同土壤和两种不同根部区域(根表和根际),该种群具有高度多样性,其基因型和基因组也具有显著差异(P<0.05).所分离到的菌株中,四分之三具有独特的基因组,90%以上的基因组是其原种群所独具有的.所有菌株的基因组的平均同源性比较低(22%),聚类分析不能证明来自不同小麦田和不同根部区域的菌株具有亲缘性.聚类分析显示,种群内的基因流动是受到限制的,菌株基因组的差异是由于基因的随机漂流引起的,由根表得到的基因型是与所采集的对比土壤相关联的.有三分之一的菌株检测到了2,4-二乙酰基均苯三酚(PhlD)生物合成基因,这些菌株形成了一相关联的组群(同源性为60%).4株产生PhlD的菌株(两种野生型,表型不同)对小麦全蚀病和腐霉引起的油菜根腐病具有显著的防治效果,展现出了对这类病原菌引起的根部病害的防治潜能.     

不同品种香菇交配型基因的鉴定

利用原生质法单核体亲本交配型极性标记法,成功地鉴定出香菇－栽培株（Ｓ）与２野生株 （Ｑ＆Ｈ）的 ４种孢子单核体标准交配型基因,并以具有交配型基因的香菇栽培株的 ４种孢子单核体 与香菇２野生株４种孢子单核体轮配,而鉴定出香菇２野生株的４种孢子单核体相对交配型基因, 为香菇的遗传研究提供了可靠的遗传标记．结果显示栽培株Ｓ的４种孢子单核体的交配型分别为 Ａ１Ｂ１、 Ａ２Ｂ２、 Ａ１Ｂ２与 Ａ２Ｂ１,野生株 Ｑ的 ４种孢子单核体的交配型为 Ａ３Ｂ３、 Ａ４Ｂ４、 Ａ３Ｂ４与 Ａ４Ｂ３,野生株 Ｈ４４种孢子单核体的交配型为Ａ５Ｂ５、Ａ６Ｂ６、Ａ５Ｂ６与Ａ６Ｂ５．