金钗石斛试管苗生根研究

在基本培养基MS上分别添加不同浓度和配比的α-奈乙酸(NAA)和6-苄氨基嘌呤(6-BA)、吲哚丁酸(IBA)和6-BA,不同浓度的多效唑(PP333);在MS 6-BA 0.2mg·L-1 NAA 1.0mg·L-1 活性炭0.1%培养基上分别添加10%的香蕉汁、马铃薯汁、椰子汁、番茄汁和胡萝卜汁5种天然成分对金钗石斛(Dendrobium nobile)试管苗进行生根研究.结果表明:NAA和IBA分别与6-BA配合使用均能抑制试管苗根的分化及生长,但单独使用对促进试管苗根的分化及生长有显著的效果,NAA的浓度为0.5～1.0 mg·L-1时,试管苗生根效果较佳,当IBA浓度为0.2mg·L-1时,试管苗生根率达100%,且根数多而粗壮,NAA和IBA均可单独作为促进金钗石斛试管苗生根培养的理想的植物激素;PP333 2～4 mg·L-1可促进再生植株根的形成,但抑制根的伸长生长,建议与其他激素配合使用;5种天然成分均对试管苗根的分化、长度和粗壮度有明显的促进作用,其中附加10%香蕉汁对试管苗的生根效果最好.     

不同激素配比对直立型扁蓿豆愈伤组织诱导及分化的影响

通过L25(53)正交试验设计,在MS基本培养基上添加不同浓度的2,4-D、6-BA、NAA三种激素.试验分别用直立型扁蓿豆的下胚轴和子叶作为外植体,探讨三种激素对直立型扁蓿豆愈伤组织诱导及分化的影响以及适合直立型扁蓿豆愈伤组织诱导和分化成苗的培养基.结果表明:6-BA对愈伤组织的形成有很大的影响;2,4-D,NAA对诱导愈伤的形成没有明显的作用.直立型扁蓿豆愈伤组织诱导的较优培养基组合是MS+2,4-D 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+NAA 1.0 mg/L.同时,2,4-D对直立型扁蓿豆分化成苗的影响是最明显的,其次是6-BA,变化不明显的是NAA.愈伤组织分化成苗的较佳培养基组合是MS+6-BA 1.0 mg/L.     

甘蔗离体快速繁殖的研究

用甘蔗幼叶作外植体进行离体培养,比较不同外源激素对愈伤组织的诱导和再生植株分化的影响.结果表明:同一浓度的2,4-D较NAA的诱导率高,6-BA的浓度为1.0mg.L-1有利于再生植株的分化,所形成试管苗移栽成活率较高.     

益母草愈伤组织分化及无性系建立的研究

以益母草根颈为材料,进行了愈伤组织诱导、增殖与分化,分化芽生根,试管苗移栽、定植的研究.结果表明：MS＋6-BA 0.5mg·L-1＋NAA 0.6mg·L-1＋2,4-D1.2mg·L-1是愈伤组织诱导培养的理想培养基;MS＋6-BA0.5mg·L-1＋NAA0.1mg·L-1＋2,4-D 1.5mg·L-1是愈伤组织继代增殖培养的理想培养基;1/2MS＋6-BA 0.2mg·L-1＋NAA 0.1mg·L-1是愈伤组织分化培养和分化芽继代分化增殖培养的理想培养基;N6＋IAA0.2mg·L-1培养基是益母草分化芽生根培养的理想培养基.移栽成活率为94.4%;定植成活率为99.1%;定植成活的试管苗保持野生益母草的所有植物学性状.     

东方百合的器官发生与体胚发生研究

以东方百合栽培品种'Sorbonne'、'Siberia'、'Tiber'的试管苗鳞片和叶片为外植体,研究了6-BA(0.3～2.0 mg/L)、KT(0.5～2.0 mg/L)、NAA(0.1～2.0 mg/L)、2,4-D(0.5～2.0 mg/L)、ZT(0.1～0.5 mg/L)对器官发生的影响;以‘Tiber'的愈伤组织为外植体探讨了6-BA(0.2～1.5 mg/L)、2,4-D(0.5～2.0 mg/L)对体胚发生的影响.结果表明:高浓度的激素有利于叶片分化不定芽,6-BA能提高鳞片上不定芽的分化频率,2,4-D能诱导'Tiber'的愈伤组织形成体细胞胚.     

不同激素对蜡梅Chimonanthus praecox愈伤组织诱导的影响

本实验研究了6-BA、2,4-D、IAA、NAA、IBA、KT对蜡梅Chimonanthus praecox愈伤组织诱导的影响,以及探索愈伤组织诱导的最适培养基配方.激素筛选实验结果表明2,4-D能诱导蜡梅分化出愈伤组织.在2,4-D浓度梯度实验中,设计了0、0.1、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L 7个浓度,结果表明浓度为0.25~1.0 mg/L的2,4-D诱导愈伤组织的效果最好.在6-BA浓度梯度实验中,也设计了0、0.1、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0 mg/L 7个浓度,均未诱导出愈伤组织,表明6-BA不能单独诱导出蜡梅愈伤组织.以葡萄糖、6-BA和2,4-D三因素组合正交实验共设置了25个组合,得到诱导蜡梅愈伤组织的最适培养基配方为:1%葡萄糖+0.25 mg/L2,4-D+1.5 mg/L6-BA.     

激素对油菜子叶再生及转基因瞬间表达的影响

以甘蓝型油菜“湘油15”子叶为外植体,以MS为基本培养基,采用正交试验设计,研究了预培养基2,4-D和6-BA浓度、分化/共培养基NAA和6-BA浓度对子叶芽再生频率和转GUS基因瞬间表达率的影响.结果表明,激素对芽再生频率和转基因瞬间表达率都有重要影响,但激素对芽再生和转基因瞬间表达的影响效应具有不一致性.激素对芽分化的影响程度从大到小依次为再生培养基NAA、预培养基6-BA、预培养基2,4-D、再生培养基6-BA,推导的对于芽再生的最佳激素组合方案为预培养基2,4-D 1.0 mg/L和6-BA1.0 mg/L、再生分化培养基NAA0.2 mg/L和6-BA3.0 mg/L;激素对GUS基因瞬间表达的影响程度从大到小依次为共培养基NAA、共培养基6-BA、预培养基6-BA、预培养基2,4-D,推导的对于瞬间表达的最佳激素组合方案为预培养基2,4-D 0mg/L和6-BA0.2 mg/L,共培养基NAA0.05 mg/L和6-BA3.0 mg/L.推导的对于芽再生频率×GUS基因瞬间表达率的最佳激素组合方案为预培养基2,4-D 1.0 mg/L和6-BA1.0 mg/L,共/分化培养基NAA0.05 mg/L和6-BA3.0 mg/L.     

新台糖25号组织培养及快速繁殖研究

本研究采用新台糖25号蔗株茎尖培养出绿苗和茎梢嫩叶诱导出愈伤组织,再分化出绿苗的方法,快速成功培育出了大批量绿苗.试验表明茎尖培养用MS 6-BA2.0mg·L-1 NAA0.3mg·L-1附加活性炭0.05%;MS 2,4-D1.0～3.0mg·L-1对诱导愈伤组织效果较佳,MS 6-BA1.0mg·L-1 KT1.0mg·L-1 NAA0.3mg·L-1对分化绿苗及其增殖效果最好;生根培养基选用1/2MS IBA1.0mg·L-1 NAA1.0mg·L-1,附加活性炭0.05%效果好.     

正交设计在欧洲菘蓝组织培养中的应用

以欧洲菘蓝下胚轴和子叶为外植体,应用正交设计方法,对愈伤组织的诱导和分化培养基进行了优化筛选.分析结果表明,6-BA和2,4-D的交互作用对下胚轴愈伤组织的诱导有显著影响,结合直观分析确定下胚轴的愈伤组织最佳诱导培养基为MS 6-BA 0.5 mg.L-1(后同) 2,4-D 0.5;6-BA和NAA的交互作用对子叶愈伤组织诱导有极显著影响,结合直观分析确定子叶最佳诱导培养基为MS 6-BA 0.5 NAA 0.2.在不同培养基对欧洲菘蓝愈伤组织分化能力的影响试验中,各种因子在所试浓度范围内的作用均不显著,有待进一步试验.根据直观分析我们认为MS 6-BA 2 NAA 1诱导的愈伤组织更有利于分化.不定芽在转移到MS NAA 0.5一个月后80%以上都能长出很好的根系.生根后的组培苗经过3天炼苗后移栽至花盆后80%以上可以存活.     

黄槐叶片组织培养及植株再生的研究

以黄槐(Cassia surattensis Burm.f)幼嫩叶片为材料,分别接种于附加NAA1ppm.2,4-D 1ppm、6-BA 2ppm的不同基本培养基MS、B_5、Nitsch、Blaydes、SS-B-8、PC-L_2诱导愈伤组织,结果表明,MS+NAA1ppm+2,4-D1ppm+6-BA2ppm诱导愈伤组织效果最好。将愈伤组织转移到MS+NAA1ppm+6-BA2ppm的分化培养基上,培养30天后,即可形成大量的芽苗丛。蔗糖浓度的高低影响芽的分化和苗的正常生长,以2%的蔗糖浓度较适宜,切取幼苗转移到MS(无机盐减半)+IBA2ppm的生根培养基上,培养10天后,在幼苗茎基部长根而形成完整植株。愈伤组织经过多次继代培养仍保留增殖和器官分化的能力。     

叶子花的组织培养

以叶子花茎尖、带节茎段和叶片为外植体，MS为基本培养基，通过对不同剂量外源激素6-BA，IBA，NAA及2，4-D的配比，筛选出了适合叶子花成苗的培养基A1：MS 6-BA2．0 NAA0．5，D5：MS 6-BA0．5 IBA0．1，G2：1／2MS NAA0．3．     

金钗石斛兰组培苗的生根培养和移栽

以1/2MS为基本培养基,添加不同浓度的NAA、IBA和6-BA,配置16种培养基进行试验,筛选最适宜于金钗石斛兰生根的培养基.结果显示:1/2MS+0.2 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L IBA及1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.2 mg/L IBA培养基最适宜于金钗石斛兰生根,生根率达100%,而且根系生长健壮.将金钗石斛兰生根组培苗移栽于6种不同的基质中,结果表明,以棕榈外壳作为移栽基质最佳,移栽成活率达100%,且幼苗生长良好.     

红叶李组织培养快繁技术

通过培养红叶李的不同外植体，建立适宜的组织培养条件和快繁技术，为红叶李的组培繁殖提供技术参考。采用MS为基本培养基，添加不同浓度的激素，以茎尖、腋芽、茎段和叶片作为外植体进行培养。结果表明：茎尖和腋芽既能诱导芽的生长又能诱导愈伤组织，且诱导效果较好，而茎段仅能诱导产生愈伤组织，叶片的诱导效果不明显。BA1．0mg／L 2，4-D0．5～2．0mg／L组合的诱导效果最佳，单芽在BA1．0mg／L IBA0．5～2．0mg／L培养基中继代培养都能诱导产生丛芽，诱导率达70％。     

蔓茎堇菜愈伤组织分化再生植株

研究了蔓茎堇菜植株再生的培养条件。通过L9（3^4）正交试验筛选出诱导蔓茎堇菜愈伤组织的适合培养基为MS＋2,4－D1．5＋ZT1．0;4个激素组合即ZT2．0＋NAA0．5、ZT2．0＋IBA0．5、6－BA2．0和6－BA2．0＋NAA0．5可诱导出蔓茎堇菜芽;诱导根分化与植株培养的适宜培养基为MS＋NAA2．0＋6－BA（或ZT）0．25或MS＋（IBA＋IAA）1．0＋6－BA（或ZT）0．25。     

安祖花的组织培养及快速繁殖研究

以安祖花的叶、叶柄和茎段为外植体在不同培养基上进行诱导愈伤组织和不定芽的发生．筛选出了诱导愈伤组织培养基MS 6—BA1．0mg／L 2，4—D0．5mg／L，不定芽分化及增殖培养基MS 6-BA1．0mg／L IBA0.1mg／L，不断的继代培养，增殖及分化率都很高，将产生的不定芽切割下来转接到1／2MS NAA0．5mg／L的培养基中生根壮苗，生根良好的试管苗移栽后，经过精心的管理。2个月后统计结果。成活率高达96％。     

金钗石斛转基因体系的建立

以金钗石斛种子为外植体建立组织培养体系,在含1.5 mg/L 6-BA MS培养基中添加0.5 mg/L NAA和2%蔗糖有效地诱导原球茎,诱导率达91.67%;添加0.25 mg/L NAA和3%蔗糖则更适于原球茎分化形成不定芽;添加0.1 mg/L NAA和2%蔗糖适宜于不定根的诱导. 同时建立了根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)转化金钗石斛的方法和体系:使用根癌农杆菌EHA105侵染30 min,共培养3 d时,金钗石斛根段、根尖和组培幼苗的转化率最高,而含腋芽的茎节则需要共培养5 d. 本文所建立的组培体系与转基因体系将为探讨金钗石斛的基因功能和调控机制等生物学问题,及建立稳定转化的再生植株提供技术手段.     

多因子正交试验对长春花离体培养条件的筛选

应用正交设计法考察了植物生长物质、蔗糖对长春花愈伤组织诱导、丛生芽诱导和生根培养的影响。最佳愈伤组织诱导培养基为MS＋2，4－D0.8mg/L NAA 1mg/L ZT 0.2mg/L。丛生芽诱导最佳培养基为MS＋6－BA0.2mg L NAA 0.3mg/L＋蔗糖30g/L，最佳生根培养基为1／2MS＋NAA 0.2mg/L IBA 0.2mg/L 蔗糖30mg/L。     

不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响

本实验以美味猕猴桃试管苗为材料，外植体选用离体茎段，研究了不同浓度的激素组合对猕猴桃愈伤组织诱导及芽分化的影响．试验结果表明，MS培养基中附加激素2，4-D1．0mg／L＋6-BA0．5mg／L有利于愈伤组织诱导，诱导率达86．1％；Ms培养基中附加激素组合NAA0．1mg／L＋6-BA1．0mg／L有利于芽分化，芽分化率为75．2％．     

红掌叶片愈伤组织的诱导与植株再生

报道了红掌叶片愈伤组织诱导和植株再生的研究结果 ,试验表明 :诱导愈伤组织频率最高的培养基是MS BA 0 .5mg/L 2 ,4 D 0 .8mg/L ;较适于愈伤组织分化不定芽的基本培养基是N6 ,激素配比以BA 2 .5mg/L 2 ,4 D 0 .1mg/L和ZT 2 .5mg/L 2 ,4 D 0 .1mg/L为好 ;红掌试管苗生根较易 ;使用质量浓度为 0 .5mg/L的NAA ,2 ,4 D和IBA都能很好地诱导不定芽生根 ;富含有机质的疏松表土是理想的移栽基质 ,移栽成活率为 92 .3% .     

苦豆子愈伤组织的诱导与继代培养的去褐化研究

利用苦豆子的子叶进行愈伤组织的诱导与继代,筛选出诱导愈伤组织及继代时的最佳培养基．实验发现各种培养基均能诱导出愈伤组织,0．5—1．0mg／L的2,4-D和0．5—2．0mg／L的细胞分裂素6-BA或与Zt共同添加,诱导的愈伤组织状态较好,且当NAA（浓度为0．5mg／L）存在时可改善愈伤组织的状态;浓度为2．0mg／L的Kt和1．0mg／L以下的2,4-D、NAA分别或同时使用时同样可得状态较好的愈伤组织．低浓度的2,4-D、6-BA混合使用或添加1．0mg／L以下的NAA是愈伤组织继代时较好的激素组合,同时观察到0．5mg／L2,4-D和0．5mg／L Kt以及0．5mg／L2,4-D、0．2m-g／LNAA和0．2mg／LTDZ两种组合也能较好的继代愈伤组织．愈伤组织的去褐化除调节激素的浓度与配比外,还采取了其他的去褐化措施,发现添加0．1％活性炭的条件下快速继代（2d继代一次）以及调整基本培养基是较好的去褐化措施．