蛋白酶水解骨素的对比及其优化研究

选取木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶分别对骨素进行酶解,对比了几种酶解液的苦味和水解度.结果表明:风味蛋白酶最适合酶解骨蛋白,其水解产物鲜味明显,无明显苦味;木瓜蛋白酶水解骨蛋白效果最差,其水解产物苦味最为明显;中性蛋白酶水解效果介于风味蛋白酶和木瓜蛋白酶之间.风味蛋白酶水解骨蛋白的最佳酶解条件为:温度50℃,加酶量6 000 U/g底物蛋白,p H值为7.0,酶解时间2 h,料液比1∶5(g/m L),在此条件下其水解度可达34.80%.     

海参水解方法和化学成分研究

研究了海参在蒸馏水、盐酸和硫酸中的3种水解方法,并测定了海参不同部位化学成分的含量.结果表明,盐酸水解方法优于硫酸和蒸馏水水解方法,且盐酸浓度在4-6 mol/L范围内其水解效果最佳.测得海参蛋白质含量高达665mg/g,氨基酸为59.762 mg/g.铁、锌、钙、镉、磷和铜在海参本体和内脏中的含量不同,内脏中的铁、锌、钙、镉和磷含量分别是参本体的9.4、3.7、1.05、1.3和1.4倍,而参本体中铜的含量是内脏的1.3倍.     

碱性蛋白酶水解豆粕制备ACE抑制肽水解条件的优化

为了寻求高效的血管紧张素转换酶(ACE)抑制肽制备方法,在实验室条件下利用碱性蛋白酶水解豆粕生产ACE抑制肽,并采用单因素和多因素实验相结合的方法对酶解条件进行优化.结果发现,适当延长碱性蛋白酶的水解时间和提高p H,可大幅度提高ACE抑制肽的抑制活性.单因素和多因素实验综合结果显示,碱性蛋白酶水解豆粕产生ACE抑制肽的适宜水解条件为:p H为9.0,水解温度为50℃,水解时间为4 h,蛋白酶质量分数(酶质量/底物质量)为2.0%,底物质量浓度为40 g/L,在此条件下制备的ACE抑制肽的抑制率可达到97.97%.     

Alcalase酶解蛋清粉制备抗凝血肽的工艺优化

采用Alcalase碱性蛋白酶酶解蛋清粉制备食源性抗凝血肽。结果表明:底物浓度过大会抑制水解度的增长,底物质量分数为1%时蛋白质完全水解后的产物抗凝血活性最佳;高温和低温均对水解度有影响,低温酶解产物的抗凝血活性较好;pH值对水解度的影响与Alcalase的最适pH值有关;pH值为7时,抗凝血活性最好;酶/底物浓度增大,但底物不变的情况下,对水解度的提高不明显,酶/底物浓度过大,导致抗凝血活性降低。考虑交互作用经试验优化设计确定的酶解最佳工艺参数为:底物质量分数为1%,酶解温度为50 ℃,酶/底物质量分数为5%,酶解pH为8。在该条件下水解2 h,凝血抑制率达到68.92%。     

花生分离蛋白复合酶水解工艺优化研究

探讨了超声波辅助前处理对花生分离蛋白复合酶解的影响,比较了碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶、中性蛋白酶、风味蛋白酶等六种蛋白酶解物清除DPPH自由基的效果,确定碱性蛋白酶和胰蛋白酶较佳的复合比例为8∶2.在此基础上,开展响应面优化试验,以DPPH自由基清除率和水解度为指标,探讨复合酶与风味蛋白酶酶解的较佳工艺参数,并分析DPPH清除率和水解度相关性.实验结果表明,复合蛋白酶制备花生分离蛋白抗氧化肽的较佳酶解工艺为pH 8.5,温度49.36℃,酶添加量(E/S,质量分数m/m)3.40%,酶解时间203.59 min.     

海参加工废液中海参皂苷提取工艺的研究

目的:研完和优化从海参加工废液中提取海参皂苷的工艺,为海参皂苷的规模化生产创造条件.方法:本文利用AB-8大孔树脂从海参加工度弃液中提取分离海参皂苷,并采用正交设计进行了提取工艺条件的优化.结果:经研究和优化确定了海参毫苷的最佳提取条件:海参废弃液pH值为10,上样速率为2倍柱体积(BY)/h、洗脱用乙醇激度为70%、洗脱体积为6倍柱体积.性质鉴定结果显示,海参皂苷在Molish反应、泡沫实验、沉淀实验和Libermann-Burchard反应中均呈阳性,表明所得提取物确为皂苷;结论:本文确定了利用AB-8型大孔树脂提取海参皂苷的最佳工艺,为海参皂苷的规模化生产奠定了基础.     

超声波辅助酶解制备东海海参胶原蛋白低聚肽及其活性的研究

以东海海参胶原蛋白为原料,采用超声波辅助酶解制备低聚肽(分子量小于1 kDa),并对其抗氧化性进行了研究。研究结果表明,超声波辅助对胃蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶酶解东海海参胶原蛋白均有显著促进效果,低聚肽含量和收率均有大幅提高。当超声波功率为100 W时,中性蛋白酶酶解的低聚肽含量最高,达70.5%。采用单因素试验,对超声波辅助下中性蛋白酶酶解工艺进行优化,确定最佳酶解工艺为:超声波功率100 W,酶解温度60℃,酶解pH 7.0,酶添加量5%(w/w),酶解时间20 min。在最佳工艺条件下,低聚肽含量和收率最大达75.4%和52.9%。抗氧化试验表明,该低聚肽对DPPH和ABTS清除的效果均随低聚肽浓度的增加而增强。该低聚肽对ABTS的清除快速高效,对DPPH的清除则随着处理时间的延长而缓慢增加。当低聚肽浓度为8 mg/mL,处理时间为30 min时,DPPH和ABTS的清除率分别为19.0%和87.2%。     

文蛤蛋白水解制备抗氧化活性肽的研究

以文蛤蛋白为原料,通过蛋白酶水解制备抗氧化活性肽.利用体外清除DPPH活性评价酶解产物的抗氧化活性,采用超滤、葡聚糖凝胶柱层析和HPLC对相应的活性肽进行分离纯化,通过HPLC-MS进行结构鉴定.结果表明:木瓜蛋白酶水解产物的DPPH清除活性明显高于碱性蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶和复合蛋白酶,产物质量浓度为1 mg·mL-1时,DPPH清除率为55.74%;以DPPH清除率为筛选指标,对木瓜蛋白酶酶解产物进行逐级分离,得到4个具有抗氧化活性的目的肽段,氨基酸序列分别为LNFNLEKSR(1120.3 u)、SWLRPR(814.4 u)、RIGNIISQY(1063.3 u)和LNFNLEK(877.2 u).     

碱性蛋白酶水解海洋鱼鳞工艺改进

鱼鳞中含有丰富的蛋白质资源,如何充分利用该资源越来越受到关注.利用碱性蛋白酶水解海洋鱼鳞蛋白制备鱼鳞蛋白多肽.通过考察温度、时间、酶量、底物浓度等单一因素对水解鱼鳞蛋白的影响,确定并设计了L9(34)正交试验因素和水平,最终获得了碱性蛋白酶水解海洋鱼鳞蛋白优化工艺条件,即温度60℃,时间1.5h,酶量3%(质量分数),底物质量分数10%.在此条件下,酶解所得水解度为32.38%.与其他方法比较,该工艺条件下水解时间大大缩短.检测了该条件所得蛋白肽段的分子质量分布,结果表明酶解产物主要集中在1～6ku.由此可见,该优化条件适合规模化生产,所得蛋白肽可以满足食品、化妆品行业的需求.     

文冠果降血压肽的制备及其活性研究

以文冠果蛋白为研究对象,采用酶解法制备文冠果蛋白酶解肽,并对其体外抗高血压活性进行研究。以水解度为指标确定酶解条件。蛋白水解物经超滤得到分子量为1k Da,1~5 k Da和5 k Da 3个区段的多肽组分,测定其对血管紧张素转化酶(Angiotensin Converting Enzyme,ACE)的抑制率。最佳酶解条件为:底物质量浓度40g/L,加酶量8%(质量分数)(碱性蛋白酶),酶解时间175 min,酶解温度55℃和酶解p H 9.0,此条件下水解度最高为22.97%;3种多肽组分中1k Da的ACE抑制率最高为83.43%,其半抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)为0.394 mg/m L。文冠果蛋白酶解多肽具有显著的体外抗ACE活性,可作为降血压肽的开发原料。     

海参提取物对网球运动后乳酸及血气指标影响研究

观察海参提取物对网球运动后血乳酸及酸碱代谢的影响.随机挑选辽宁师范大学体育学院运动系学生20名,随机分为运动组(n=10)和对照组(n=10).实验组服用海参提取物,每日1次,每日35克,持续2周.对照组服用等量的安慰剂.运动方案为一次训练比赛.结果显示,与对照组相比,运动组在运动后血乳酸上升幅度及BE、HCO3-的下降幅度明显减小(P＜0.05).本实验提示,海参提取物对网球运动后血乳酸及酸碱代谢产生明显的影响,对延缓运动性疲劳的发生具有重要的意义.     

酒石酸亚铁法测定黄瓜中多酚含量

采用浸取法以乙醇为提取剂从黄瓜中提取多酚类物质,利用酒石酸亚铁对多酚的显色反应表征提取物中抗氧化物质的含量,通过正交试验对黄瓜中多酚的提取条件进行优化.结果表明:黄瓜中多酚的最佳提取条件为95%乙醇作溶剂,提取温度50℃,提取时间为90 min,所得黄瓜中多酚类化合物的提取量为15.29mg/g.     

海参寡肽:免疫调节作用及机制研究

 为研究海参寡肽对小鼠的免疫调节作用及机制,试验选取250只SPF级雌性BALB/c小鼠,随机分为5组:空白对照组,乳清蛋白组(0.30 g/kg),0.15、0.30、0.60 g/kg海参寡肽组。连续灌胃30 d后,通过测定ConA诱导的小鼠淋巴细胞转化实验、迟发型变态反应、抗体生成细胞、血清溶血素水平、小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验、自然杀伤(NK)细胞活性,观察海参寡肽对小鼠细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬和NK细胞活性的影响,并通过流式细胞术对脾脏T淋巴细胞亚群进行分析。结果表明:海参寡肽显著提高了小鼠细胞免疫、体液免疫、单核-巨噬细胞吞噬功能及NK细胞活性(P<0.05),且效果优于乳清蛋白。通过T淋巴细胞亚群分析表明,海参寡肽显著提高了脾脏CD3⁺百分比和CD4⁺百分比(P<0.05)。由此可知,海参寡肽可能通过增加T淋巴细胞数和Th细胞比例,介导细胞免疫、体液免疫功能、单核-巨噬细胞吞噬能力和NK细胞活性的增强作用,起到增强免疫功能的效果。     

烯效唑对黄瓜品质的影响

为确定有效促进黄瓜果皮着色,提高果品品质的最佳烯效唑（S3307）处理浓度,在黄瓜初花期分别用质量浓度为0,50,100,150,200,250mg·L^-1的S3307喷施黄瓜果实。结果表明,50mg·L^-1的S3307对黄瓜有良好的着色作用,喷施后,延缓株高、茎粗、单株产量增长,果皮着色效果明显,有机酸含量下降,...     

用响应面法优化酶水解法制备葵花盘小分子肽

为提取并利用葵花盘中具有降尿酸和溶解痛风石作用的小分子肽, 以小分子肽得率为指标, 通过酶水解法优化提取条件, 确定碱性蛋白酶为最理想的酶. 通过单因素实验考察料液比、 时间、 温度、 pH值和加酶量对小分子肽得率的影响, 利用响应面Box-Behnken实验, 优化酶水解法提取葵花盘小分子肽的工艺, 得到其最佳工艺条件为： 加入碱性蛋白酶, m(料)∶V(液)=1∶15, 酶的用量为2%, pH=9.0, 温度为55 ℃, 时间为2 h, 葵花盘小分子肽的得率最高为(42.41±0.01)%.     

仿刺参真空冷冻干燥工艺的研究

以仿刺参为试材,对其真空冷冻干燥工艺进行了研究。结果表明:海参采用速冻进行预冻结,真空冻干过程中,真空度在10 Pa以下恒定0.5 h后,开始加热,50℃加热升华3 h,然后升温至70℃直至冻干。在以上条件下得到的冻干海参外观形态饱满美观。     

用响应面法优化酶水解法制备葵花盘小分子肽

为提取并利用葵花盘中具有降尿酸和溶解痛风石作用的小分子肽, 以小分子肽得率为指标, 通过酶水解法优化提取条件, 确定碱性蛋白酶为最理想的酶. 通过单因素实验考察料液比、 时间、 温度、 pH值和加酶量对小分子肽得率的影响, 利用响应面Box-Behnken实验, 优化酶水解法提取葵花盘小分子肽的工艺, 得到其最佳工艺条件为： 加入碱性蛋白酶, m(料)∶V(液)=1∶15, 酶的用量为2%, pH=9.0, 温度为55 ℃, 时间为2 h, 葵花盘小分子肽的得率最高为(42.41±0.01)%.     

低温对黄瓜几种内源激素含量的影响

为明确黄瓜的耐低温性及脱落酸(ABA)、生长素(IAA)、赤霉素(GA3)、腐胺(Put)、亚精胺(Spd)、精胺(Spm)含量对其生长的影响变化规律,选取耐低温性不同的6份材料9504,9506,9507,9511,9514,9517,进行低温处理,白天12℃,晚上8℃,每天光照处理7.5 h,强度为30μmol(m2.s)-1,约合2 000 lx,共处理14 d。结果表明,在常温下各内源激素含量差异不显著,经低温处理的含量均上升,差异均显著。相关分析表明,耐寒指数与处理后的全部激素含量的偏相关均呈正相关,但均未达显著水平。说明低温使黄瓜幼苗的生长受到一定程度的抑制,但能够通过调节自身的内源激素来减轻低温的伤害,维持植物体的正常生长及生理代谢功能,从而表现出一定的耐低温潜力。     

低温与弱光对黄瓜色素含量的影响

选取耐低温性不同的6份黄瓜材料9504,9506,9507,9511,9514,9517,进行低温处理,白天12℃,晚上8℃,每天光照处理7.5 h,强度为30μmol.(m2.s)-1,约合2 000 lx,共处理14 d,调查其耐低温性及叶绿素、叶绿素a、叶绿素b、胡萝卜素、类胡萝卜素含量。结果表明,在常温下上述色素含量各材料之间差异不显著,经低温处理所有色素的含量均下降,且差异显著。相关分析表明,耐寒性与处理后的全部色素含量的偏相关均呈正相关,只与叶绿素a含量达显著水平,叶绿素含量与叶绿素a含量、类胡萝卜素含量、胡萝卜素含量呈显著正相关。说明低温使黄瓜幼苗的生长受到一定程度的抑制,但能够通过调节自身的色素含量来减轻低温的伤害,维持植物体的正常生长及生理代谢功能,从而表现出一定的耐低温潜力。