单宁微球固定化酶的应用性能

以单宁微球为载体制备固定α-淀粉酶.探讨了温度、pH值、淀粉初始质量浓度、淀粉种类等对单宁微球固定化α-淀粉酶催化淀粉水解性能的影响.结果表明,固定α-淀粉酶在25,60,90℃催化水解淀粉17h后,淀粉的水解百分率均达到95%以上,说明温度对固定α-淀粉酶的催化性能影响不大;pH对固定α-淀粉酶的催化性能影响大,最佳pH值为8;固定α-淀粉酶对可溶性淀粉、番薯淀粉、芭蕉芋淀粉的催化水解率均大于96%;固定α-淀粉酶重复5次后仍具有较好的催化效果.     

PEG胁迫对甘薯不同器官的愈伤组织淀粉酶活性的影响

淀粉酶是水解淀粉的酶类,根据其分解淀粉的不同,可以分为α-淀粉酶和β-淀粉酶,α-淀粉酶可将淀粉水解为葡萄糖,而β-淀粉酶则只能从淀粉的非还原末端将淀粉水解为麦芽糖和限制型糊精,又称淀粉-1,4-麦芽糖苷酶,被广泛应用于饴糖、啤酒和高麦芽糖的生产,大麦、小麦、大豆和甘薯等植物中的β-淀粉酶含量高,中国主要以大麦芽作为β-淀粉酶源,每年需消耗大量粮食来生产β-淀粉酶制剂。     

淀粉酶的分类及应用研究进展

淀粉酶是催化水解淀粉分子内糖苷键的一类酶的总称,因其氨基酸序列多样、来源广泛以及性质差异大,分类方法也有多种方式,比较主流的是以淀粉水解产物异头碳的构型来划分为α-淀粉酶和β-淀粉酶。目前已有多种淀粉酶被成功商业化,广泛应用于各行业中,本文对淀粉酶的一些分类方法及其应用进行综述。     

白芸豆α-淀粉酶抑制剂在低GI方便粥中的应用

以淀粉水解率为指标,分析白芸豆α-淀粉酶抑制剂对淀粉水解的抑制作用,并进一步对白芸豆α-淀粉酶抑制剂对不同方便粥血糖生成指数(GI值)的影响进行研究.结果表明:随着大米粥中白芸豆α-淀粉酶抑制剂添加量由0%升到5.0%,大米粥的淀粉水解率不断下降,且其GI值由86.63降至32.03;进而将白芸豆α-淀粉酶抑制剂按3.0%的添加量添加到方便粥(燕麦粥、青稞粥和莲子粥)中,方便粥的GI值均降低至55以下,属于低GI食品范畴.     

双酶法制糖实验设计

根据学校的现有条件设计了一个以淀粉为原料,用α-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶水解制取葡萄糖的实验装置,并取得了良好的效果.     

解淀粉芽孢杆菌α—淀粉酶基因的分子克隆及其在大肠杆菌中表达的初步研究

以大肠杆菌噬菌体λEMBL_3为载体克隆了解淀粉芽孢杆菌的α—淀粉酶基因。被克隆的α—淀粉酶基因能够稳定存在,并可以在E.Coli中表达。携有α—淀粉酶基因的重组体噬菌体λPAmy~(13)其高效价裂解酶活力可达14.0u/ml。在大肠杆菌中产生的α—淀粉酶与兔抗解淀粉芽孢杆菌α—淀粉酶血清有交叉免疫反应。但与解淀粉芽孢杆菌本身所产生的α—淀粉相比,其免疫反应的程度下降。     

用蕉芋淀粉酶法制造果葡糖浆

本文研究了以蕉芋淀粉为原料,用淀粉酶和固定化葡萄糖异构酶生产果葡糖浆的各种最适条件,包括pH、酶浓度、底物浓度、金属离子、温度、时间等因素。结果表明,α-淀粉酶和葡萄糖淀粉酶水解蕉芋淀粉的葡萄糖值可达95一99%。固定化葡萄糖异构酶转化葡萄糖为果糖的转化率可达45-54%,其甜度超过同浓度的蔗糖。通过与木薯、甘薯淀粉比较实验表明,蕉芋淀粉是制造果糖的良好原料,而且,它在长江以南均可普遍栽培。     

温度和光照对心里美萝卜生殖生长期α-淀粉酶表达的影响

为了研究温度和光照在生殖生长期,对心里美萝卜α-淀粉酶活性和同工酶谱带的影响,对萝卜进行了不同种植时间以及不同过冬方式的处理,并在生殖生长期的不同时间对萝卜肉质根和叶片中的α-淀粉酶活性进行了测定,同时采用非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳方法对不同时期各个器官中的α-淀粉酶同工酶谱进行了分析.研究结果表明,低温和光照增加α-淀粉酶活性,α-淀粉酶同工酶谱带存在器官表达差异和时间表达差异,并与光照和温度有关.由此结论萝卜生殖生长期α-淀粉酶的表达受温度和光照影响.     

γ射线辐照辅助制备多孔淀粉

以玉米淀粉为原料,以不同剂量γ射线辐照,然后用α-淀粉酶和糖化酶在酸性环境中、糊化温度以下酶解制备多孔淀粉.探讨了反应时间、辐照剂量等因素对淀粉水解率和吸油率的影响,同时也用电镜观察了产物的形态.结果表明,电镜下多孔淀粉形态与其水解率和吸油率相吻合,γ射线辐照能有效提高淀粉的酶解效率,可以大幅度提高多孔淀粉的吸油率.     

玉米多孔淀粉的制备

以玉米淀粉为原料,研究了玉米多孔淀粉制备过程中各种因素对产物成孔效果的影响,探讨了酶解成孔的机理,并对制备工艺进行了初步优化.在糖化酶和耐高温α-淀粉酶混合成的复合酶作用下,玉米淀粉水解制备玉米多孔淀粉的最佳工艺为:加酶量为按照理论水解55%淀粉的30倍加入量,糖化酶与耐高温α-淀粉酶的配比7:1,反应体系pH值5.6,酶解温度60℃,淀粉浓度60%,反应时间20h.反应后玉米淀粉的吸油率由16.15%提高到了47.59%.     

分光光度法测定α-淀粉酶活性

碘-淀粉复合物的吸光度A_(580nm)与淀粉浓度呈直线关系。淀粉经α-淀粉酶37℃降解10min后,用氯化铜/盐酸混合液中止反应。测定碘-淀粉复合物在580nm处的吸光度并根据公式及=(5/B)(1-A_x/A_s)来计算α-淀粉酶活性。     

荧光光谱法研究乙基麦芽酚与胰α-淀粉酶相互作用特征

研究了乙基麦芽酚对胰α-淀粉酶活性的影响,以及二者相互作用的荧光猝灭光谱、同步荧光光谱和三维荧光光谱特征.证实了乙基麦芽酚对胰α-淀粉酶活性具有激活作用.证实了乙基麦芽酚与胰α-淀粉酶间的相互作用为静态猝灭,求出了猝灭常数以及乙基麦芽酚与胰α-淀粉酶的结合常数K和结合位点数n.由求得的热力学参数,根据Ross 判断生物大分子和小分子结合力性质的规律推测,乙基麦芽酚与胰α-淀粉酶之间的作用力主要为疏水作用力.用同步荧光光谱和三维荧光光谱技术探讨了乙基麦芽酚对胰α-淀粉酶蛋白构象的影响.     

荧光光谱法研究乙基麦芽酚与胰α-淀粉酶相互作用特征

研究了乙基麦芽酚对胰α-淀粉酶活性的影响,以及二者相互作用的荧光猝灭光谱、同步荧光光谱和三维荧光光谱特征．证实了乙基麦芽酚对胰α-淀粉酶活性具有激活作用．证实了乙基麦芽酚与胰α-淀粉酶间的相互作用为静态猝灭,求出了猝灭常数以及乙基麦芽酚与胰α-淀粉酶的结合常数K和结合位点数n．由求得的热力学参数,根据Ross 判断生物大分子和小分子结合力性质的规律推测,乙基麦芽酚与胰α-淀粉酶之间的作用力主要为疏水作用力．用同步荧光光谱和三维荧光光谱技术探讨了乙基麦芽酚对胰α-淀粉酶蛋白构象的影响．     

外源植酸酶对杂交水稻种子萌发的影响

以杂交水稻两优288为材料,用外源植酸酶处理种子,测定萌发后种子中α-淀粉酶活性、可溶性糖含量、植酸酶活性.结果表明,种子由休眠转入萌发状态的过程中,经过植酸酶处理后的种子较对照组,α-淀粉酶活性增强,可溶性糖含量剧增,新陈代谢活跃,但随着萌发时间的延续,α-淀粉酶活性减弱,可溶性糖含量有所降低,而外源植酸酶处理过的种子α-淀粉酶活性、可溶性糖含量以及内源植酸酶活性高峰期较对照的早,且持续时间长.说明植酸酶在杂交水稻种子萌发过程中起着重要作用.     

地衣芽胞杆菌麦芽糖α-淀粉酶产麦芽糖特性研究

为了开发新的生产麦芽糖浆的淀粉酶,在大肠杆菌中表达了一个地衣芽胞杆菌(Bacillus lichen form is)麦芽糖α-淀粉酶,并对该酶产麦芽糖的特性进行研究.结果显示,重组酶分子大小为65 kDa,以淀粉为底物的最适温度为45℃,最适pH值为6.5.以浓度为20％的可溶性淀粉为底物,加入106U/g淀粉的地衣芽胞杆菌麦芽糖α-淀粉酶,反应48h,采用HPLC检测产物,产物中只有葡萄糖和麦芽糖,其中麦芽糖含量为52.21％,还原糖得率为72.1％;当加入1U/g淀粉的普鲁兰酶协同作用进行反应时,产物中麦芽糖的含量增加到57.16％,还原糖得率增加到92.5％.该酶在麦芽糖浆的工业生产上有较大的潜在应用价值.     

α-淀粉酶在疏水作用色谱中保留的热力学研究

研究了经不同浓度盐酸胍变性的α-淀粉酶(α-Amylase)在疏水作用色谱(HIC) 中的保留行为.结果表明,天然及经盐酸胍变性的α-淀粉酶在HIC中的保留行为都很好地遵循非线性Van′t Hoff方程,且由所计算出的α-淀粉酶在HIC中保留的热力学参数发现,在实验温度范围内,α-淀粉酶的保留为熵驱动,焓变(ΔH0)、熵变(ΔS0)和热容量变(ΔCP 0)3个热力学参数都分别与绝对温度及其倒数之间存在线性关系. 同时,对部分胍变α-淀粉酶的折叠自由能ΔΔGF进行了测定,发现变性α-淀粉酶在HIC固定相表面的折叠自由能远比在溶液中的高,且对于相同浓度盐酸胍变性的α-淀粉酶,均以298K时的折叠自由能为最大.     

铅对小麦萌发率和α-淀粉酶活力的影响

采用溶液培养的方法,研究了铅(Pb)对小麦(Triticum aestivum L)萌发率和α-淀粉酶活力的影响.结果表明,低浓度(250-500mg/L)铅处理使小麦种子萌发率与α-淀粉酶活性受到促进,而高浓度(1000-2000mg/L)铅处理使萌发率和α-淀粉酶活性受到抑制,并且浓度越高抑制作用越强;铅可能通过影响α-淀粉酶的活性来影响萌发率;铅(250-2000mg/L)处理不影响萌发的小麦种子α-淀粉酶活性在萌发前期随萌发天数的增加而逐渐升高的趋势.     

淀粉酶法提高马铃薯渣不溶性膳食纤维质量分数

以马铃薯渣为主要原料,采用淀粉酶酶解去除马铃薯渣中可酶解碳水化合物,提高马铃薯渣不溶性膳食纤维的质量分数.通过单因素和响应曲面优化试验,以不溶性膳食纤维质量分数为指标,确定了耐热α-淀粉酶去除马铃薯不溶性膳食纤维中淀粉的最佳条件.结果表明,耐热α-淀粉酶解最佳条件为底物百分含量2.3%,酶添加量26.1 U/g,酶解时间70 min、酶解温度90℃、pH=6,在此条件下不溶性膳食纤维质量分数可达53.29%.     

抗消化淀粉体外的评价方法

采用体外模拟方法，研究了胃蛋白酶处理条件、α-淀粉酶消化条件等对抗消化淀粉含量测定的影响，结果表明，用2%胃蛋白酶在30℃条件下对淀粉样品处理70min，可有效除去淀粉中的蛋白质组分，当淀粉酶处于最高活性条件下，pH值为6.3～7，作用时间为20min,可以模拟体内淀粉酶对淀粉的消化过程，基本上除去了可消化淀粉部分，剩余部分即为抗消化淀粉。     

小麦α-淀粉酶及其同工酶的热稳定性研究

小麦α-淀粉酶的研究,已有一些报道,但对α-粉酶稳定性的研究较少。Bertoft等研究大麦α-淀粉酶时,麦芽浆经70℃处理却得到一种热敏感的同工酶。笔者认为这预示着麦芽浆中存在着α-淀粉酶的的重要稳定因子,经多方面对照研究表明,淀粉是其中一个重要的稳定因子。