具有蔗糖转化酶活力的酵母细胞的固定化

用明胶包埋、戊二醛交联制备的固定化酵母细胞,菌体包埋量大,活力回收高,机械性能好。酵母细胞固定化后,表观米氏常数有明显增大,热稳定性有所提高。固定化细胞装柱后用于蔗糖的转化,连续使用15天,酶活力保持不变。     

固定化葡萄糖异构酶的研究

本文报道了链霉菌菌体经热处理、明胶包埋、戊二醛交联制备固定化葡萄糖异构酶的力法。经反复实验,筛选出了明胶包埋配比和戊二醛最佳交联条件,从而为工业化生产果葡糖浆开辟了一个新途径。     

四氧化三铁吸附包埋固定辣根过氧化物酶及其应用

建立了Fe₃O₄吸附包埋固定辣根过氧化物酶,并与明胶、开孔明胶、海藻酸钠3种不同的固定化方法载体进行了比较,发现该固定化方法具有较高的固定效率。对固定化酶与自由酶的稳定性进行了比较,发现Fe₃O₄吸附包埋固定化HRP的稳定性高于其他固定化HRP和自由酶。此外,测定了不同戊二醛浓度、交联时间、给酶量、Fe₃O₄使用量及明胶浓度对 辣根过氧化物酶固定效果的影响。结果表明,固定化反应的最佳条件如下：最佳给酶量与Fe₃O₄用量比例约为95u HRP/g Fe₃O₄,最佳Fe₃O₄用量与凝胶比例为1.0g Fe₃O₄/10mL 10％～20％,最适戊二醛浓度和交联时间分别为0.5％和30min。在此条件下制备的辣根过氧化物酶 活性约为1.1u/g,酶活固定率约为15％。该固定化酶重复应用于PCP催化去除反应,可获得稳定的PCP去除率。     

明胶—戊二醛固定化双酶体系的研究

采用明胶包埋、戊二醛交联相结合的方法制备固定化葡萄糖淀粉酶—葡萄糖异构酶双酶体系.该酶制备的最适条件是温度50℃pH值6.5.该酶反应的最适温度为50℃,最适pH为5.4,最适底物浓度为15％,热稳定性在50℃以下.     

固定化谷氨酸棒杆菌T6-13细胞生产L-谷氨酸

本文比较了海藻酸钙、明胶-戊二醛、聚丙烯酰胺和琼脂包埋法制备固定化细胞的方法。前者较后几种有较大的优越性,是一种较为理想的固定化方法.分析了海藻酸钙法国定化细胞各主要因素对酶活性的影响,确定出制备固定化细胞的最佳条件.观察凝胶珠中细胞及酶活性的变化表明,细胞在凝胶珠中生长良好,有利于谷氨酸生产.固定化细胞发酵谷氨酸的最适 pH 为7. 0～7. 5,最适温度32℃,最适转速140rpm.每批发酵96小时,糖利用率为98%,产酸量达20g/L,比常规游离细胞增加15%.     

固定化茁芽丝孢酵母菌122降解苯酚的特性

用海藻胶和明胶混合包埋茁芽丝孢酵母菌122细胞制成凝胶珠,再用戊二醛交联,制得固定化细胞,试验比较了固定化细胞与游离细胞降解苯酚的最适pH、最适温度、pH和热稳定性、对CN~-、S~(2-)和金属离子的耐受性以及细胞的稳定性等,测定了细胞的K_m和V_m值,探讨了固定化细胞流化床反应器连续处理苯酚的特性。     

胰蛋白酶固定化技术研究

以脱乙酰壳聚糖为载体,明胶包埋,戊二醛为交联剂,对胰蛋白酶的固定化条件和固定化胰蛋白酶的性质进行研究。文章报道的新工艺是一种制备固定化胰蛋酶的理想方法,它兼有絮凝法迅速方便、包埋法成型容易和交联法强度大等优点。研究中就交联剂用量、明胶用量、ｐＨ 值以及载体与酶的比例对固定化胰蛋白酶的影响进行比较,在所选择的固定化条件下,固定化酶的活性回收率可达５８．２％ 以上。固定化酶的最适温度为６８ ℃,最适ｐＨ 值为７．９, Ｋｍ 值升高,热稳定性、ｐＨ 值贮存稳定性以及在乙醇溶液中的抗变性亦明显高于可溶性胰蛋白酶。在柱式反应器内,当以２．５％ 酪蛋白为底物时,其操作半衰期为４７ ｄ 左右。     

固定化米曲霉氨基酰化酶拆分DL-茶氨酸

研究固定化米曲霉Aspergillus oryzae AS3.381氨基酰化酶细胞拆分DL-茶氨酸制备L-茶氨酸的最佳工艺条件.将DL-茶氨酸乙酰化为N-乙酰-DL-茶氨酸,利用固定化米曲霉细胞立体专一性去乙酰化,可以获得L-茶氨酸,并分析固定化条件对比酶活的影响.结果显示:最适固定化条件为戊二醛浓度0.5%、交联时间2 h、温度55℃、pH8.0、底物0.2 mol/L、菌液比12 g菌体/100 mL戊二醛溶液,此时拆分率可达98%以上.菌体重复操作7批次,固定化细胞仍保留最高酶活的75%.与直接利用游离菌体转化相比,本法具有反应温度高、酶活高且稳定、能反复利用、酶活损失少等优点.     

卡拉胶固定化Nocardia sp.生产L(+)酒石酸

采用卡拉胶包埋具有环氧琥珀酸水解酶活性的诺卡氏菌菌体用于生产酒石酸。固定化的最适卡拉胶浓度为20 g/L,菌体浓度为200 g/L,交联剂戊二醛浓度为5 g/L,固定化后的酶活回收率可以达到70%。高浓度的环氧琥珀酸对水解反应产生抑制作用,游离细胞的米氏常数(Km)为0.234 m o l/L,抑制常数(KI)为0.22 m o l/L,固定化细胞则分别为0.31 m o l/L和0.21 m o l/L。游离细胞和固定化细胞反应的最适pH分别为8.0和8.5。细胞固定化以后,耐热稳定性增强。30°C 0.2m o l/L的底物浓度下,摇瓶中连续转化25批,L( )酒石酸的转化率接近100%。     

胰蛋白酶固定化新工艺研究

我们以脱乙酰壳聚精为载体，明胶包埋，戊二醛为交联剂，对胰蛋白酶的固定化条件和固定化胰蛋白酶的性质进行了研究．本文报道的新工艺，是一种制备固定化胰蛋酶的理想方法．它兼有絮凝法迅速方便，包埋法成型容易和交联法强度大等优点．本文还就交联剂用量、明胶用量、ＰＨ值以及载体与酶的比例对固定化胰蛋白酶的影响进行了比较．在所选择的固定化条件下，固定化酶的活性回收率可达５６％以上．固定化酶的最适温度为６８℃，最适ＰＨ７．９，Ｋｍ值升高，热稳定性、ＰＨ贮存稳定性以及在乙醇溶液中的抗变性亦明显高于可溶性胰蛋白酶．在柱式反应器内，以２．５％酪蛋白为底物时操作半衰期为４６天左右。     

Hydrogen Production with High Evolution Rate and High Yield by Immobilized Cells of Hydrogen-producing Bacteria Strain B49 in a Column Reactor

To improve the hydrogen evolution rate in continuous hydrogen production of a novel fermentative hydrogen-producing bacteria strain B49 (AF481148 in EMBL), 4 % immobilized cells by polyvinyl alcohol-boric acid method, with the addition of a small amount of calcium alginate in a column reactor obtain hydrogen yield of 2.31 mol H2/mol glucose and hydrogen evolution rate of 1435.4 ml/L culture*h respectively at medium retention time of 2.0 h with a medium containing 10g glucose/L. Moreover, as the cell density in gel beads is increased to 8%, hydrogen yield and hydrogen evolution rate for 10g glucose/L are 2.34 mol H2/mol glucose and 2912.4 ml/L culture*h respectively at medium retention time of 1.0 h, and for molasses wastewater COD of 7505.9 mg/L hydrogen production potential of 205.6 ml/g COD and hydrogen evolution rate of 2057.7 ml/L culture*h at hydraulic retention time of 0.75 h are observed. In the continuous culture pH value keeps around 3.9 by self-regulating.     

高稳定性便于再生的苯酚微生物传感器

这种传感器的细胞固定化是左氢电极膜表面紧贴一层包埋着茁芽丝孢酵母的海藻胶层,再在凝胶层上覆盖一片透析膜,该传感器的基本特性除类似或略优于透析膜包装的传感器外,还具有两个很重要的特点:稳定性高,可反复使用3个月以上;便于培养处理,使因热或化学因子而失活的传感器获得再生。     

薄荷固定化细胞培养产生薄荷醇

薄荷叶片外植体经诱导形成了颗粒状愈伤组织。愈伤组织转人附加８ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ的ＭＳ液体培养基以后，逐步成为小而分散的悬浮状态。将悬浮细胞和小愈伤组织用３％海藻酸酸钠固定，然后培养在附加０．５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ的ＭＳ培养液中。     

磁性微球的改性及其固定化铁还原菌的性能

以油酸、聚乙二醇、柠檬酸钠和3-氨丙基三乙氧基硅烷(APTES)为改性剂,采用化学共沉淀法制备4种改性磁性微球.通过粒度测定(PSD)、X射线衍射分析(XRD)、傅里叶红外光谱分析(FTIR)、热重分析(TGA)、磁强度测定(VSM)对各种磁性微球进行表征,并对比各微球固定化铁还原菌后还原Fe(Ⅲ)EDTA的性能,最终确定最佳的磁性微球改性条件.结果表明:APTES改性的Fe₃O₄磁性微球固定化铁还原菌效果优于其他改性微球,其最佳条件为APTES投加量8 mL,1 mg铁还原菌需1.5 g磁性微球进行固定化;APTES-Fe₃O₄固定化铁还原菌后连续使用5次,其Fe(Ⅲ)EDTA还原效率仍可保持在90%以上.     

固定化乙酰胆碱脂酶的研究

以戊二醛为交联剂,将乙酰胆碱脂酶交联固定到硅胶载体上,研究了影响固定化酶的主要因素．通过酶活力的测定,确定了最佳戊二醛浓度、pH值、固定化时间、酶用量、固定化酶的最适作用温度、pH值、酶的稳定性及其回收率．结果表明：戊二醛浓度为0．5％,pH值为8．0,固定3．0h,酶与载体比例为30mg／g可制备良好的功能化载体．固定化乙酰胆碱脂酶最适作用温度和pH范围分别为40℃和6．0～9．0．重复使用10次固定化酶,回收率约为70％．     

固定化增殖酵母糖蜜酒精连续发酵的研究

本研究采用海藻酸钙胶为载体,将糖蜜酒精酵母P396驯化株固定于2.5公升维型筛板生比反应器中,以甘蔗糖蜜为基质进行快速酒精连续发酵试验。证明该反应器能较好地解决CO_2滞留及CO_2与酒精对酵母发酵的抑制问题;探讨了该反应器连续发酵的动力学模型及发酵条件。发酵连续操作85天,平均产酒8.1×10~(-2)kg/L,平均生产能力1.5×10~(-2)kg/L·hr比游离细胞分批发酵效率提高17.4倍。     

气味沙雷氏菌蛋白组分分离及其体外抗癌活性

用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ对经超声波处理的气味沙雷氏菌全菌体进行分离，切胶分别洗脱，经丙酮沉淀、脱盐处理后得到九个蛋白组分，将九个组分分别用Ｌ９２９，ＱＧＹ肿瘤细胞为靶细胞进行细胞毒性试验（ＭＴＴ），经初步鉴定从此且分具有抗癌细胞活性，组分Ｆ６相对分子质量范围为２８０００－３３０００，其抑制５０％细胞生长的蛋白浓度（ＩＣ５０）；对Ｌ９２９细胞为０．０４６ｍｇ／ｍｌ对ＱＧＹ细胞为０．０１２５０ｍｇ／ｍｌ，活     

多胺化壳聚糖载体固定化漆酶及其性质研究

以多胺化壳聚糖为载体,戊二醛为交联剂固定化白毒鹅膏菌漆酶,研究了最佳固定化条件及固定化酶的部分性质.结果表明,戊二醛浓度2％,交联时间14h,固定化时间6h,给酶最70mg/g载体时同定化效果最佳,酶活力可达64.3 U/g.此固定化漆酶的Km为8.73mmol· L-1;最适pH值4.2,较自由漆酶向酸性偏移;最适反...     

地衣芽孢杆菌海水生化需氧量传感器研究

用经海水驯化的地衣芽孢杆菌作响应菌株,采用夹层膜法制作固定化微生物膜,以氧电极为换能器制成BOD生物传感器;以空白海水为底液,传感器在BOD质量浓度为0～27mg/L范围内线性相关系数r=0.99978,对BOD质量浓度为4.31mg/L的GGA溶液连续平行测定7次,相对标准偏差为2.56%。     

共混胶高温堵剂实验室研究

钠粘土与AM单体共混,在130℃下与引发剂和交联剂反应生成了共混胶。该共混胶体系中含钠土6%,单体AM 6%～7%,引发剂Y 100～200mg/L,交联剂J 1%～1.5%。钠土的加入,延缓了成胶时间,提高了热稳定性。该共混胶强度高,封堵能力强,高温堵水应用前景良好。