康氏木霉木聚糖酶的分离纯化及特性

使用硫酸铵分级沉淀、Sephadex G-25凝胶色谱脱盐和Sephadex G-100凝胶色谱等分离纯化技术，从康氏木霉（Trichoderma Koningii）发酵液中分离出木聚糖酶，纯化后的木聚糖酶经十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺（SDS-PAGE）凝胶电泳鉴定为单一组分，其相对分子质量为55208．所得的木聚糖酶的最适反应温度为65℃，pH值为6．0．该酶稳定性较好，在30—60℃下放置2h能保持83％以上的酶活；在3．0-10．0的pH值范围内能保持85％以上的酶活．研究表明：金属离子Ba^2＋，Pb^2＋，Fe^2＋，Fe^2＋，Al^3＋和高浓度（12mmol/L）的Cu^2＋对木聚糖酶的活性有抑制作用，而Ca^2＋，Zn^2＋和4mmol／L的Cu^2＋对该酶反应有促进作用．该木聚糖酶作用于Birchwood木聚糖的米氏常数为5．37g/L，最大反应速率为0．94μmol／min．     

有机溶剂对南美白对虾N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

研究了几种有机溶剂对南美白对虾（Penaeus vannamei）N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）活力的影响．结果表明：甲醇、乙醇、正丙醇、正丁醇、乙二醇和丙三醇对NAGase的作用均表现为低浓度时对酶有激活作用，随着浓度的升高，激活作用减弱并速转为抑制作用；二甲亚砜和二氧六环对酶的抑制作用呈现明显的浓度效应，随浓度增大酶活力迅速下降．进一步研究二甲亚砜的抑制作用动力学，结果表明：二甲亚砜对酶的抑制作用是一种可逆过程，抑制机理表现为混合型抑制类型，抑制常数K1=0．27mol／L，KB=2．05mol／L．     

几种效应物对黑曲霉果胶酶活力的影响

研究了几种效应物对黑曲霉果胶酶活力的影响。结果表明：变性剂脲与SDS对果胶酶活力的抑制作用呈现出浓度效应，0．5mmol／L SDS能使酶活力下降95．9％，5mol／L的脲能使果胶酶活力下降95．6％；三种伯醇和丙酮对果胶酶活力具有抑制作用，15％的甲醇、乙醇、正丙醇和丙酮可分别使果胶酶活力下降18．8％、25．5％、36．1％和84．4％；而乙二醇和丙三醇对酶活力的影响表现为激活效应，15％的乙二醇和丙三醇可分别使酶活性提高22．9％和6．9％；Cu^2＋和Fe^3＋对果胶酶活力的抑制作用呈浓度梯度效应，EDTA对酶活力没有影响，说明果胶酶为非金属酶类。     

蜂房芽孢杆菌木聚糖酶的活性

实验研究了温度、pH值和Al^3 、Zn^2 、K^ 、Ca^2 、Mg^2 、Mn^2 、Fe^3 及Cu^2 等几种常见金属离子对蜂房芽孢杆菌木聚糖酶活性的影响，结果表明该酶最适温度为40℃，最适pH为6．0，在低温及pH7．0—9．0条件下，该酶活性稳定；Ca^2 、Mg^2 、Mn^2 对木聚糖酶有激活作用，Cu^2 、Al^3 、Zn^2 和Fe^3 对木聚糖酶有抑制作用，Cu^2 的抑制作用最强。     

熊果甙作为化妆品添加剂对酪氨酸酶抑制作用

熊果甙(Arbutin)作为化妆品添加剂具有增白效果，主要是由于它对皮肤酪氨酸酶有抑制作用．本文研究了熊果甙对酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力的抑制效应．结果表明．熊果甙对酪氨酸酶活性的抑制作用表现为可逆抑制效应．熊果甙对酪氨酸酶的单酚酶的效应主要表现于迟滞时间有明显的延长．但对稳态酶活力的影响不显著．160mmol／L熊果甙使得单酚酶的迟滞时间从82s延长到430s，增大4．24倍．稳态酶活力仅下降16％．熊果甙对二酚酶的抑制作用显示浓度关系．测定导致酶活力下降50％的抑制剂浓度(IC50)为5．30mmol／L．其抑制作用为竞争性类型，抑制常数K1为2．98mmol／L．本文通过研究熊果甙对酪氨酸酶的抑制作用机理．阐明了熊果甙作为化妆品添加剂的增白作用机理．     

草鱼碱性磷酸酶的分离纯化与部分性质研究

用Tris—HCl缓冲液抽提，硫酸铵分级沉淀，DEAE-纤维素和葡聚糖凝胶层析，从草鱼肠中提取出碱性磷酸酶（ALP）．提取倍数为6．74，比活为684U／mg蛋白．酶液经PAGE呈现单一带，该酶催化对硝基苯磷酸二钠（pNPP）水解反应的最适pH值为10．41，最适温度为27℃，Km值为1．01mmol／L，酶的热稳定性与pH稳定性研究表明：该酶在pH6．6～11．5区间和在温度低于45℃下稳定．研究金属离子对酶活力影响的结果表明：一价金属离子Li^＋、Na^＋和K^＋对酶活力没有影响；二价金属离子Mg^2＋、Mn^2＋和Co^2＋对酶有不同程度的激活作用；Zn^2＋对酶有抑制作用．     

香草醛对酪氨酸酶活性的抑制

在25℃，pH=6．8的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲体系中，采用酶动力学方法研究了香草醛对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性的抑制效应．实验结果表明：香草醛对酪氨酸酶单酚酶和二酚酶活性均有抑制作用，其半数抑制浓度（IC50）约分别为2．7和4．1mmol／L；香草醛能明显延长单酚酶的迟滞时间，4mmol／L香草醛能使迟滞时间由1．1min延长至3min；Lineweaver-Burk图显示香草醛对二酚酶的抑制作用表现为混合性抑制，对游离酶的抑制常数和对酶-底物络合物的抑制常数分别为3．48和15．1mmol／L．     

没食子酸衍生物对蘑菇酪氨酸酶的抑制机理

蘑菇褐变过程主要是由于其酪氨酸酶的催化作用引起的，寻找该酶抑制剂在食品保鲜和储藏中的应用具有重要的意义．作者在实验中，发现没食子酸十二烷基酯和没食子酸香叶酯对蘑菇酪氨酸酶有较强的抑制作用，测定它们抑制蘑菇酪氨酸酶二酚酶的酶活力下降50％的抑制剂浓度（IC50）分别为1．55和0．25mmol／L．显示没食子酸香叶酯的抑制作用强度是没食子酸十二烷基酯的6倍．研究了这两种抑制剂对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用动力学，结果表明：没食子酸十二烷基酯和没食子酸香叶酯对酶的抑制作用均表现为可逆反应，前者为反竞争性，其抑制常数KIS为0．636mmol／L；而后者为混合型，抑制常数KI和KIS分别为0．133和0．453mmol／L．     

Fe3O4／聚（丙烯酸甲酯-二乙烯苯）微球对金属离子的吸附

通过悬浮聚合制备Fe3O4／聚（丙烯酸甲酯-二乙烯苯）磁性微球，考察了微球对金属离子的吸附性能。结果表明，磁性吸附剂粒径35—55μm，Fe3O4质量分数18％，能有效吸附金属离子。由Langmuir模型得到的饱和吸附容量为别为：Hg2＋2．3mmol／g,Cu^2＋2mmol／g，Ni^2＋ 1．1mmol／g。由Lagergrent方程计算的吸附速率常数分别为：Hg^2＋0．023min^-1，Cu^2＋0．034min^-1，Ni^2＋0．036min^-1。吸附剂可用1mol／LH2SO4再生。     

Cu~(2+)、Zn~(2+)对罗氏沼虾鳃中SOD同工酶的影响

采用生态学单因子梯度试验方法,研究了水环境中添加0．01mg／L,0．08mg／L,0．64mg／L,5．12mg／L的Cu^2＋,Zn^2＋对罗氏沼虾鳃中超氧化物歧化酶（SOD）同工酶活力和酶谱的影响．结果显示：随着Cu^2＋,Zn^2＋浓度的增加鳃中SOD酶活力均呈先增加后减少的变化趋势,分别在0．64mg／L Cu^2＋和0．08mg／L Zn^2＋时SOD酶活力达到最大（73．57±0．12U／mg和53．63±0．17U／mg）,且均与对照组有显著差异（P〈0．05）;低浓度Cu^2＋处理组SOD同工酶酶谱出现SOD酶带变宽、颜色加深现象,并在O．08mg／L和0．64mg／L浓度组中新增一条酶带（SOD2）,而高浓度组（5．12mg／L）明显抑制SOD酶带活性,新增的条带也缺失;同样低浓度的Zn^2＋使得SOD酶谱的条带变宽,颜色加深,但没有出现新增酶带,而高浓度（5．12mg／L）Zn^2＋使得条带变窄,颜色变淡．结果表明：这两种金属离子对罗氏沼虾鳃中SOD同工酶活力及酶谱的影响与浓度有关,Cu^2＋对SOD的影响明显大于Zn^2＋,SOD同工酶活力和酶谱的变化可以灵敏地反映Cu^2＋的胁迫程度和毒性．     

金属离子对荧光单假胞菌P13生长及抗真菌素合成的影响

以油菜菌核病菌为供试病原菌，探讨11种金属离子对荧光假单胞菌P13的生长及拮抗能力的影响．结果表明，金属离子均对P13的生物量以及抗生素的合成产生一定的影响．与对照相比，金属离子在0．002mol／L的浓度下，Ag^＋，Cr^3＋，Ni^＋能强烈抑制该菌的生长；Ca^2＋，Ti^3＋，Fe^3＋有微弱的促生作用；Al^3＋能强烈抑制P13抗生素的合成，Ca^2＋和Fe^3＋则明显促进抗生素的合成．在不同浓度的Ca^2＋和Fe^3＋下，0．003mol／L的Ca^2＋促进P13的相对效价提高到267％．0．003mol／L的Ca^2＋与0．001mol／L Fe^3＋共同使用时P13的效价增加到291％，说明Ca^2＋和Fe^3＋对P13抗真菌素合成有协同作用．     

金属离子对鲍鱼碱性磷酸酶活力的影响

碱性磷酸酶(ALP,EC3.1.3.1)是一种金属酶,其结构的维持和酶活性的表现均需金属离子.本文研究了几种金属离子分别对鲍鱼ALP活力的影响.结果表明,Li ,Na 和K 等正一价碱金属离子对酶活力没有任何效应;碱土金属离子Mg2 ,Ca2 和Ba2 对酶有激活作用,其激活程度依次为:Mg2 >Ca2 >Ba2 ,而且Mg2 在5.0mmol/L时可以使酶活力提高267%;在过渡金属离子中,Zn2 ,Mn2 ,Co2 和Cu2 对酶的效应不同,Zn2 、Cu2 为抑制作用,而Co2 、Mn2 表现为激活作用;重金属离子Hg2 、Pb2 、Ag 和Cd2 对酶有抑制作用,其中Hg2 的抑制效应最强,1.0mmol/LHg2 可使酶活力抑制94%.研究Mn2 和Cu2 的抑制类型表明,Mn2 为混合型激活作用,而Cu2 对酶的抑制类型为非竞争性抑制作用,其抑制常数(KI)为0.316mmol/L.     

水杨酸的抑酶与抑菌作用

以水杨酸为效应物，研究其酶学效应和微生物效应．实验结果表明：水杨酸对马铃薯多酚氧化酶有明显的抑制作用，半抑制率（IC50）为2．05mmol／L，抑制作用表现为非竞争性的可逆过程，其抑制常数为2．00mmol／L．水杨酸对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌3种细菌和白色假丝酵母、黑曲霉两种真菌均有明显的抑制作用，其最小抑菌浓度（MIC）分别为0．75、0．5、0．5、0．25和0．75mg／mL，最小杀菌浓度（MBC）分别为0．75、1．0、0．5、0．25和0．75mg／mL．本研究为水杨酸在果蔬保鲜中的应用提供实验理论依据．     

对醛基苯甲酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

酪氨酸酶是一种同时具有单酚酶和二酚酶活力的酶．对醛基苯甲酸(ABA)对蘑菇酪氨酸酶活力的影响研究结果表明：ABA只对蘑菇酪氨酸酶的二酚酶活性有抑制作用．而对单酚酶没抑制作用．ABA对二酚酶的抑制作用显示浓度关系，测定导致酶活力下降50％的抑制剂浓度(IC50)为0．98mmol／L．ABA对二酚酶的效应为可逆的非竞争性的抑制．抑制常数K1为0．94mmol／L．本得到的结果与苯甲酸和苯甲醛的效应进行了比较．     

无花果曲霉植酸酶发酵及酶动力学

目的：研究野生型无花果曲霉植酸酶的动力学性质。方法：通过限制培养基中的无机磷,无花果曲霉发酵获得植酸酶。纯化后,对酶的动力学性质进行了研究。结果：该酶作用底物植酸钠的Km值为64．7μmol/L,对于植酸钠,植酸酶的最适反应pH为5．5温度为50℃。结论：无花果曲霉植酸酶在pH3.5－8．040℃以下比较稳定;不同的金属离子螯合剂对酶活性影响不一样,Ca^2 对酶活力有轻微的激活作用,Al^3 几乎无影响,Mg^2 、Fe^2 、Cu^2 对酶活力有抑制作用,Co^2 、Hg^2 、EDTA有较强的抑制作用。     

鞣酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

酪氨酸酶是一种同时具有单酚酶和二酚酶活力的氧化酶．研究鞣酸对蘑菇酪氨酸酶活力的影响，结果表明鞣酸对蘑菇酪氮酸酶的单酚酶和二酚酶活性都有抑制作用．鞣酸对单酚酶活力的影响主要表现于它能显著延长酶作用的迟滞时间．而对稳态活力的影响不大．2．0μmol／L鞣酸可以使单酚酶的迟滞时间从104．7s延长到333．6s．增大2倍以上．而酶的稳态活力仅下降19．8％．鞣酸对二酚酶的抑制作用显示浓度效应．测定导致酶活力下降50％的抑制剂浓度（IC50）为65μmol／L．鞣酸对二酚酶的效应为可逆的竞争性的抑制．抑制常数K1为36．3μmol／L．     

5-甲氧基水杨醛对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

酪氨酸酶是生物体合成黑色素的关键酶.实验发现:5-甲氧基水杨醛对酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力均有抑制作用;5-甲氧基水杨醛对酪氨酸酶单酚酶活力的影响表现为对酶稳态活力的抑制作用,和对迟滞时间的延长作用,2.0mmol/L的5-甲氧基水杨醛使得单酚酶的稳态酶活力下降68%,并使迟滞时间从107 s延长到160 s;对二酚酶的抑制作用为可逆效应,半抑制率(IC50)为2.45 mmol/L,抑制类型表现为混合型机理,其抑制常数KI和KIS分别为1.426和7.766 mmol/L.通过研究5-甲氧基水杨醛对酪氨酸酶的抑制作用机理,为进一步研究设计新型酪氨酸酶抑制剂奠定基础.     

Klebsilla pneumoniae XJ-Li甘油脱水酶的催化反应特性

以自主筛选的Klebsilla pneumoniae XJ-Li为甘油脱水酶酶源,研究了其催化反应特性和稳定性。结果表明,甘油脱水酶的最适催化反应温度和pH分别为40℃和8．0。温度在40℃以下,pH处于6．0～8．0之间时酶的稳定性较好。在常见金属离子中,Mg2＋和Mn2＋对甘油脱水酶的催化反应具有一定促进作用,而Ca2＋、Co2＋、Fe3＋、Zn2＋和Cu2＋对其活性均有抑制作用。此酶对甘油的最高耐受反应浓度在0．15mol／L左右,对1,2一丙二醇的饱和浓度在0．3mol／L左右,以甘油和1,2-丙二醇为底物时的反应动力学常数Km值分别5．57mmol／L和8．16mmol／L。     

几种枳壳乙醇提取物对酪氨酸酶抑制作用比较

研究了6种中药枳壳乙醇提取物对酪氨酸酶活力的影响．结果表明：6种中药枳壳乙醇提取物对酪氨酸酶活力均有显的抑制作用，除了绿衣枳壳外，其它5种中药枳壳的提取物随着含量的增大，酶活力呈指数下降．测定导致酶活力下降50％的6种中药枳壳提取物含量(JC50)分别为：0．92mg／mL(绿衣枳壳)、0．96mg／mL(陕西枳壳)、1．30mg／mL(红河橙枳壳)、0．44mg／mL(湖南枳壳)、0．41mg／mL(四川枳壳)、和0．70mg／mL(江西枳壳)，上述6种中药枳壳提取物对酪氨酸酶的抑制作用表现为可逆过程．抑制类型均为混合型，分别测定各种枳壳提取物对游离酶抑制抑制常数(K1)和酶-底物络合物抑制常数(Kis)，并加以比较。     

甘醇酸对蘑菇酪氨酸酶的抑制作用

在蘑菇酪氨酸酶抑制剂的筛选实验中,发现甘醇酸对蘑菇酪氨酸酶有明显的抑制作用,可以导致酪氨酸酶的单酚酶活力和二酚酶活力下降,实验结果表明,甘醇酸抑制蘑菇酪氨酸酶的单酚酶和二酚酶活力下降50%的抑制剂浓度(IC50)分别为29.74和1.80 mmol/L.对单酚酶活力的迟滞时间也有明显的延迟效应,30 mmol/L的甘醇酸可以使迟滞时间延长了250%.甘醇酸对二酚酶的抑制作用是可逆过程,抑制类型为混合型.通过动力学分析,测得甘醇酸对游离酶(E)和酶-底物络合物(ES)的抑制常数分别为0.72和5.05 mmol/L,通过研究甘醇酸对酪氨酸酶的抑制作用机理,为进一步研究设计新型酪氨酸酶抑制剂奠定基础.