流加培养对球等鞭金藻生长和生化成分的影响

采用恒速和变速流加培养技术,研究了氮和磷等营养条件对球等鞭金藻生长和生化成分的影响．结果表明：在恒速流加培养奈件下,细胞密度、细胞干重、胞内蛋白质和叶绿素含量达到了0．870×10^7mL^-1、0．17g/L、0．14g/g和0．60mg/g的水平,分别比对照组高3．0倍、2．7倍、2．1倍和11．5倍;采用变速流加技术细胞密度、细胞干重、胞内蛋白质和叶绿素含量进一步提高到1．400×10^7mL^-1、0．24g／L、0．16g／g和0．70mg／g的水平,分别比对照组高4．9倍、3．9倍、2、5倍和13．3倍．可见,流加培养尤其是变速流加培养能有效地促进球等鞭金藻的生长．在此基础上,通过数学模型控制对变速流加的培养奈件进行了优化,获得了最适的流加条件．结果表明,当流加因子K=0．100时,球等鞭金藻的细胞密度、细胞干重、蛋白质和叶绿素含量分别达到了2．220×10^7mL^-1、0．44g／L、0．17g／g和0．70mg/g的更高水平,比对照组高6．9倍、7．7倍、2、6倍和14．1倍．     

密蒙花(Buddlija officinalis)基因转化受体系统的建立

以密蒙花(Buddlija officinalis Maxim)芽、叶、茎段为外植体，在B5，MS，White培养基上获得愈伤组织。结果表明：芽、幼叶脱分化能力差异不大；不同时期的叶片差异较大，以幼叶诱导为佳；作者筛选出的愈伤组织最佳培养基为B5 6-BA0．5mg／L 2，4-D0．5mg／L。在继代培养阶段，B5比MS和White更适合细胞的快速生长和繁殖；并且以叶片的愈伤组织生长较快，芽、茎段次之，最佳继代培养基为B5 6-BA0．5mg／L NAA0．5mg／L，继代的愈伤组织可在B5 6．BAlmg／L NAA0．1mg／L GA0．1mg／L培养基中分化出幼苗，在生根培养基1／2MS NAA0．2mg／L或1／2MS NAA0．6mg／L中分化出根且获得再生植株，将长4～6cm的再生小苗练苗3d后移植，幼苗成活率达100％，并于当年开花。     

菠萝蜜的组织培养

选取经资源调查及品质分析后获得的优良植株的顶芽和腋芽为材料，诱导腋芽的萌发和不定芽增殖生根．结果表明：从3月下旬到5月上旬是菠萝蜜组织培养大田取材的最佳时间，该时期接种材料污染率（〈50％）及褐变率（〈5％）均较低；启动培养的培养基最佳组合是MS＋6-BA2．0mg／L＋KT1．0mg／L＋GA。0．5mg／L＋蔗糖20g／L，腋芽诱导率为44．6％，KT含量较高（1．0mg／L）有利于腋芽的诱导，诱导率平均为（40％）；不定芽增殖培养的培养基最佳组合是MS＋6-BA1．5mg／L＋KT0．1mg／L＋GA。0．5mg／L＋蔗糖40g／L，增殖率为2．61，蔗糖含量较高（40g／L）有利于不定芽的增殖，增殖率平均为2．34；生根培养以1／2MS＋IBA1．5mg／L＋NAA0．2mg／L最好，接种8d开始生根，生根率15．8％，15d根长3～4cm，平均根数3～4条．     

耐盐能源植物海滨锦葵(Kostelezkya virginica)再生体系的建立

对海滨锦葵组织培养再生体系进行了研究，结果表明：1．海滨锦葵茎段外植体较好的愈伤组织诱导培养基组合为MS＋KT1．5mg／L＋IAA2．0mg／L或MS＋6-BA4．0mg／L＋IBA0．2mg／L＋Inositol50mg／L．2．海滨锦葵愈伤诱导不定芽的较好培养基组合为MS＋NAA2．0mg／L＋2iP5．0mg／L和MS＋NAA0．5mg／L＋2iP5．0mg／L．3．海滨锦葵腋芽分化不定芽的较好培养基组合为改良MS（含2倍有机营养）＋KT0．4mg／L＋IAA1．0mg／L．MS基本培养基中适当提高有机营养的含量对腋芽的增殖有促进作用，实验中以有机营养的含量为基本培养基2倍时效果较好．4．不定芽在1／ZMS的培养基中附加IBA1．0mg／L牛根最好．     

诺丽(Morinda citrifolia L.)离体快速繁殖研究

以诺丽（Morinda citrifolia L．）种子为试材．诺丽子叶和下胚轴均能单独由细胞分裂素BA0．7～2．0mg／L谤导不定芽发生，不定芽可直接从外植体发生，也可从愈伤组织发生，添加生长素NAA0．05～0．1mg／L则完全抑制不定芽发生，同时强烈促进愈伤组织和不定根发生．茎段在BA0．5～5．0mg／L或ZT 1．5mg／L或KN 1．5mg／L时均能通过腋芽萌发和不定芽发生而增殖．芽梢在NAA 0．1mg／L、IBA 0．1mg／L或IAA 0．1mg／L均有根群发生，但NAA 0．1mg／L诱导生根时切口愈伤组织较多，部分不定根由愈伤组织发生，而IAA 0．1mg／L诱导生根时根群欠发达，以IBA 0．1mg／L为最佳．试管苗移植到泥炭上10d后即可在全光照下生长．     

新几内亚凤仙离体快速繁殖技术研究

取新几内亚凤仙具有顶芽或腋芽的新生茎段为外植体，诱导芽体萌发，进行繁殖培养．通过大量试验，筛选出各阶段适宜的培养基组成．萌芽诱导阶段培养在MS 6-BA2．0mg／L NAA0．2mg／L中，顶芽萌发早，生长快；在继代和增殖培养中以MS 6-BA1．5mg／L NAA0．2mg／L培养基效果最好．1／2MS NAA0．2mg／L诱导生根，生根率可达100％．根质量较好；适宜条件下炼苗移栽．试管苗成活率缺95％以上。     

甜樱桃矮化砧木Gisela的离体快繁

以甜樱桃矮化砧木Gisela5和Gisela6作为试材，研究优化了其离体快繁的条件,结果表明：提高基本培养基中氮素含量可提高增殖系数，含有NH4NO33300mg／L和KNO33800mg／L的MS基本培养基中添加BA0．5mg／L和IBA0．1mg／L的培养基，为Gisela5和Gisela6的最适增殖培养基，其增殖系数可达7—8,在1／2MS IBA0．3mg／L的生根培养基上，生根率达89．3％，每个外植体可生出3—4条根,生根苗移栽容易成活。     

多效唑对水仙生长和光合特性的影响

用0．01mg／L、0．05mg／L和0．10mg／L多效唑处理水仙，观察多效唑对水仙生长和光合特性的影响．结果表明：0.05mg／L多效唑可使开花期水仙植株的根、叶生长较对照组降低62．8％和33．8％，叶绿素含量增加23．0％，光合速率、光合／呼吸比率提高216．8％和234．7％，比叶鲜质量降低18．7％，显抑制植株的徒长．此外，电镜观察结果表明，在开花期和凋花期适宜浓度的多效唑使叶片叶绿体结构更为完整清晰，提高其稳定性，可能与光合效率提高有关．     

非洲紫罗兰的组织培养和植株再生

对非洲紫罗兰的组织培养研究表明,外植体消毒以0．1％的升汞溶液浸泡7～8min为宜;不同激素浓度对其芽丛的形成、分化及根的形成有不同的影响;生长素与细胞分裂素的比例决定着芽丛的形成;小苗在1／2MS培养基上生根最好,6-BA对其生根有抑制作用．各培养阶段的最适培养基分别为,芽诱导培养基MS 2mg／L 6-BA 0．2mg／L NAA,芽分化培养基MS 1mg／L 6-BA 0．1mg／L NAA,壮苗培养基MS 0．1 mg／L NAA,生根培养基1／2MS 0．2mg／L IBA。     

何首乌茎段离体培养的研究

用何首乌种子经表面消毒后进行无菌发芽并建立了无菌材料，以无菌实生苗茎段作外植体进行离体快繁研究。试验了不同基本培养基(MS，H，1／2MS，B5和N6)，不同种类外源激素(IBA、NAA、KT)和不同浓度梯度的外源激素(0．0mg／L，0．1mg／L，0．Smg／L，1．0mg／L，2．0mg／L和4．0mg／L)以及不同蔗糖浓度(0．0％，1．0％，2．0％，4．0％，8．0％，16．0％)对茎段离体培养的影响。结果表明：MS基本培养基，0．5mg／L IBA(或0．5mg／LNAA)及3％的蔗糖比较适合于何首乌的茎段离体快繁。推荐用于何首乌茎段离体快繁的最佳培养基配方为：MS 肌醇100mg/L^ 盐酸硫胺素1．0mg／L 盐酸吡哆素0．5mg／L 甘氨酸2．0mg／L IBA0．5mg／L(或NAA0．5mg／L) 蔗糖3．0％ 琼脂0．75％，pH5．9。用该培养基对何首乌进行茎段离体快繁，每次继代培养可增殖4～5倍。     

生巴戟天与盐巴戟天改善三氯化铝诱导的老年痴呆小鼠学习记忆能力的研究

目的比较生巴戟天与盐巴戟天对老年痴呆模型小鼠脑组织去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)、5-羟色胺(5-HT)、超氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MAD)的影响.方法将50只小鼠随机分为对照组、模型组、阳性对照组、生巴戟天组和盐巴戟天组.除对照组外,其余各组通过灌胃给予AlCl3(200mg·kg-1)建立老年痴呆模型,连续50d.生巴戟天组、盐巴戟天组小鼠分别灌胃给予6g·kg-1的生巴戟天、盐巴戟天水提物,阳性对照组小鼠灌胃给予32mg·mL-1吡拉西坦,对照组与模型组分别灌胃给予等体积的生理盐水.采用Morris水迷宫法评价学习记忆能力,采用高效液相色谱-电化学法检测小鼠脑组织中NE,DA和5-HT含量,采用考马斯亮蓝测定法测定小鼠脑组织中SOD和MAD活性.结果与对照组比较,模型组小鼠逃避潜伏期显著增加(P<0.05),穿越次数显著减少(P<0.05),脑组织NE,DA,5-HT含量与SOD活性显著下降(P<0.05),MAD活性显著升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组、生巴戟天组、盐巴戟天组小鼠的逃避潜伏期显著减少(P<0.05),穿越次数显著增加(P<0.05);脑组织NE,DA,5-HT含量与SOD活性显著增高(P<0.05),MAD活性显著降低(P<0.05);盐巴戟天组小鼠脑组织NE,DA,5-HT含量与SOD活性明显高于生巴戟天组(P<0.05),MAD活性明显低于生巴戟天组(P<0.05).结论生巴戟天与盐巴戟天水提物均能提高抗氧化能力,提高单胺类神经递质含量,起到改善老年痴呆小鼠学习记忆能力.盐巴戟天对老年痴呆小鼠学习记忆能力能改善作用显著优于生巴戟天.     

Ri质粒转化牛膝及其发状根的培养

用发根农杆菌的Ｒｉ质粒转化药用植物牛膝，诱导出了抗卡那霉素的发状根。将诱导的发状根进行固体平板培养和液体悬浮培养。在附加Ｋｍ３０ｍｇ／Ｌ的ＭＳｏ和１／２ＭＳｏ培养基上，发状根生长良好，而未经转化的对照组则死亡，表现出生激素自主性。在附中外源激素ＩＢＡ０．１ｍｇ／Ｌ和ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ时，能促进发状根的成活，侧根的形成以及提高增殖倍数。表明适量的外源激素能促进发状根的生长。     

甜叶菊叶片离体培养及试管无性系的建立

研究了离体条件下甜叶菊（Stiuia rebaudiana Bertoni)叶片愈伤组织诱导和植株再生技术,离体培养以MS为基本培养基并附加300mg/L水解酪蛋白,离体叶片在BA 0．5mg/L和NAA 0．5mg/L的培养基上诱导形成愈伤组织,在BA 0．5mg/L和NAA0．05mg/L的培养基上可诱导愈伤组织分化不定芽,分化频率为100％,不定芽在White基本培养基并附 加NAA0．01mg/L的培养基上诱导生根,生根率可达100％,炼苗后移栽,成活率达95％以上。     

悬浮培养及培养条件对灵菊七细胞中可溶性多糖合成的影响

以灵菊七叶片诱导的愈伤组织为材料进行悬浮培养,研究培养条件对愈伤细胞、细胞内可溶性多糖合成的影响。结果表明,在培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA中悬浮细胞表现出对数生长期最长、可溶性多糖含量最高的特点;离子交换层析纯化结果显示,悬浮细胞中可溶性多糖分了与植株中含有相同的3种主要多糖。培养基MS+0.5 mg/L BA+0.5 mg/L NAA+1.0 mg/L GA,促进可溶性多糖的生物合成,最适于灵菊七愈伤细胞的悬浮培养。本研究初步建立了灵菊七愈伤细胞悬浮培养快速获取可溶多糖的方法,为深入研究灵菊七多糖药理活性奠定了基础。     

红豆杉细胞在反应器中培养动力学的研究

应用气升式生物反应器及搅拌式生物反应器悬浮培养红豆杉细胞,得到细胞生长和紫杉醇合成动力学曲线.经过反应器动力学的比较,结果表明红豆杉细胞较适于在机械搅拌式反应器中培养.     

两种植物生长调节剂对木槿插穗生根的影响

【目的】了解木槿扦插生根机制,探索植物生长调节剂萘乙酸(NAA)和吲哚丁酸(IBA)对木槿嫩枝扦插的影响,筛选提高木槿扦插成活的配方,为木槿扦插繁殖提供参考。【方法】以木槿1年生嫩枝为试验材料,采用3种质量浓度(100、300、600 mg/L)的NAA和IBA溶液处理插穗,以清水为对照(CK)进行完全随机区组扦插试验,对插穗解剖结构、生根性状和叶片生理指标进行观测,测定了插穗的生根率(RR)、根鲜质量(RFW)、根系TTC还原强度(RA)、TTC还原总量(TTC_RA)、平均根长(ARL)、根平均直径(RAD)、根表面积(SA)、根体积(RV)、根尖数(RT)、根长密度(RLD)、比根长(SRL)、叶绿素含量(Chl)和净光合速率(P_n)等。【结果】①显微观察发现,木槿不定根原基最先由位于插穗形成层和髓射线结合点处钝圆锥形的薄壁细胞群分裂分化而成,不定根发生后通过皮孔向外伸出;②与CK相比,300 mg/L的IBA处理下,木槿插穗的生根性状和生理指标中RR、RFW、RA、TTC_RA、ARL、RAD、SA、RV、RT和RLD分别增加了554%、527%、58%、892%、198%、50%、282%、457%、126%、198%,而SRL、Chl和P_n分别降低了52%、51%和82%;③相关性分析发现,木槿插穗叶片Chl、P_n与大部分根系指标呈负相关;④通过隶属函数法对各处理生根能力评价可知,IBA处理下插穗生根能力比NAA处理的高,300 mg/L的 IBA处理下生根能力最强。【结论】木槿插穗以皮部生根为主;木槿插穗生根过程中地上部分生长与地下部分生根存在竞争关系,两种植物生长调节剂能够促进木槿插穗地下部分生根,抑制地上部分生理性状;植物生长调节剂具有浓度阈值效应,300 mg/L IBA处理是促进木槿扦插生根最适宜的配方。     

发酵罐葡萄糖流加大规模异养培养小球藻

应用流加工艺在5,50,200,800,4000L机械搅拌发酵罐中大规模异养培养小球藻,与间歇异养或光照自养相比,流加培养大大地提高了细胞密度和生产率,最高细胞质量浓度达到43.31g/L,比生长速率达到0．069h^-1,细胞生产率达到0．62g/(L.h),结果表明,利用传统的机械搅拌发酵罐大规模生产小球有良好的商业化前景。     

生物量对黄花蒿悬浮培养细胞生长的影响

黄花蒿细胞悬浮培养过程中，分别以１０、３０、６０、８０ｇ／Ｌ的接种量进行细胞生长的对比实验．在所述培养条件下的最适起始细胞浓度为鲜重６０ｇ／Ｌ培养基．起始培养的细胞浓度直接影响细胞的生长周期增殖倍数．起始浓度越高，细胞生长周期越短，但细胞的增殖倍数越小．起始细胞浓度对黄花蒿悬浮培养细胞对数生长期的比生长速率影响不大．     

李砧木硬枝扦插繁育技术研究

以Mirabolano29C硬枝为扦插材料,采用正交和完全随机试验方法,研究基质、生长调节剂种类和生长调节剂处理方式等对硬枝插穗生根的影响。结果表明:将插穗基部放在质量浓度为100 mg/L的IBA溶液中浸泡6 h,扦插于珍珠岩基质中,生根率高达84.62%,平均生根条数为10.87,平均根长达3.84 cm;将插穗基部放在质量浓度为1 000 mg/L的IBA溶液中蘸30 s,扦插于珍珠岩基质中,生根率高达89.1%。     

金钗石斛转基因体系的建立

以金钗石斛种子为外植体建立组织培养体系,在含1.5 mg/L 6-BA MS培养基中添加0.5 mg/L NAA和2%蔗糖有效地诱导原球茎,诱导率达91.67%;添加0.25 mg/L NAA和3%蔗糖则更适于原球茎分化形成不定芽;添加0.1 mg/L NAA和2%蔗糖适宜于不定根的诱导. 同时建立了根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)转化金钗石斛的方法和体系:使用根癌农杆菌EHA105侵染30 min,共培养3 d时,金钗石斛根段、根尖和组培幼苗的转化率最高,而含腋芽的茎节则需要共培养5 d. 本文所建立的组培体系与转基因体系将为探讨金钗石斛的基因功能和调控机制等生物学问题,及建立稳定转化的再生植株提供技术手段.