半乳糖亚急性致衰老模型的研究

以６～８周龄雄性ＢＡＬＢ／Ｃ小鼠为实验对象，研究半乳糖亚急性致衰老动物模型，并观察其对免疫功能的影响，皮下注射半乳糖１００ｍｇ／ｋｇ·ｄ，４０ｄ后发现，致衰组与对照组相比，脑ＭＡＯ－Ｂ活性升高５７．９％（Ｐ＜０．０１）；肝ＳＯＤ活性下降１７．２％（Ｐ＜０．０５）；心肌脂褐素含量增高４８．３％（Ｐ＜０．０１），而且各项指标均与老年组（１７月龄）非常接近（Ｐ＞０．０５）．致衰组与对照组相比，对巨噬细胞吞噬功能，迟发型过敏反应，溶血素的产生，免疫器官的重量均无显著影响（Ｐ＞０．０５）．表明这种亚急性致衰老模型可以用作筛选抗衰老药物和食品的生化指标的研究，而不能作为研究免疫功能的亚急性致衰老模型。     

抗－DNA免疫复合物性质的研究

用聚乙二醇（ＰＥＧ）和硫酸铵从系统性红斑狼疮（ＳＬＥ）患者血清中分离出免疫复合物（ＩＣ）和血浆核酸（ＰＮＡ）。分析结果表明，ＰＮＡ的主要成分是ＲＮＡ，仅有少量ＤＮＡ存在，并且ＰＮＡ中ＤＮＡ的ｄＧ＋ｄＣ含量（５５％）明显高于正常值（４２％）。一旦经过ＲＮａｓｅ处理，ＰＮＡ抑制抗－ＤＮＡ抗体结合ＤＮＡ的能力降低，说明抗－ＤＮＡ抗体和ＲＮＡ有交叉反应。动力学研究观察到，抗－ＤＮＡ免疫复合物中抗原抗体的分子比是１：１，结合能为３７ｋＪ／ｍｏｌ。这提示，除ＤＮＡ／抗－ＤＮＡ外，其他抗－ＤＮＡ免疫复合物也可能同ＳＬＥ患者的组织损伤有关。     

甲亢患者双特异性免疫复合物的研究

采用捕捉法ELISA,检测108例亢患者的抗体／补体类双特异性免疫合（Ig-C3-TCIC）和抗体／抗体类双特异性免疫复合物（Ig/Ig-TCIC),结果发现,甲亢患者除了C3／IgA-tcic含量显著高于健康人,C3／IgM-TCIC与健康人无显著性差异外,IgM/C3-TCIC、IgG/C3-TCIC、IgA/C3-TCIC和C3／IgG－TCIC的含量均显著低于健康人;各类Ig/Ig－含量,除IgA/IgM-TCIC与健康人无显著差异外,其余均显著高于健康人,结果表明,甲亢患者排除“异己”原的能力低下,而免疫调节水平紊乱,从而出现过高的免疫应答,也证明甲亢患者存在整体的和细胞免疫紊乱。     

对3种不同硫化物自组膜免疫传感器的比较研究

在半胱氨酸自组膜上固定抗体（羊抗小鼠IgG）制备免疫传感器，分别与巯基十一酸自组膜和32-巯基-3，6，9，12，15，18，21-七氧杂三十二烷酸（EG6COOH）自组膜免疫传感器比较其性能。结果发现通过半胱氨酸自组膜制备的免疫传感器具有最好的灵敏度。能够在13min内。0．05～5．4μg／L范围对游离IgG灵敏检测，检测下限为0．05μg／L。     

小鼠免疫脾细胞与SP2／0细胞融合的杂交瘤细胞的超微结构…

对ＳＰ２／０骨髓瘤细胞，免疫脾细胞和由二者融合而分泌抗水貂肠炎病毒（ＭｉｎｋＥｎｔｅｒｔｉｔｉｓＶｉｒｕｓ，ＭＥＶ）单克隆抗体的杂交瘤细胞超微结构进行了研究。经ＭＥＶ免疫的动物脾细胞糙面内质网发达，细胞质与细胞核的比例增大，贴壁生长的ＳＰ２／０细胞的表面中央为微线毛集中区，其余部分则遍布皱褶，细胞质中内质网不发达，由ＳＰ２／０细胞和免疫脾细胞融合形成的杂交瘤细胞，表面均匀分布有皱褶，无微绒毛，细胞     

鸡新城疫水－油－水型活性复乳的研制和免疫研究

水－油－水（Ｗ／Ｏ／Ｗ）型活性复乳是将油包水初乳（Ｗ／Ｏ）进一步分散在水相中经过二次乳化，使用时并配以新城疫弱毒疫苗联合制成。采用透析法测定复乳的形成率分别为９５．０％，８９．３％，８８．０％和８４．４％，雏鸡免疫后４ｄＨＩ抗体即明显升高，井持续２个月以上；对育成鸡的加强免疫持续期达１４个月，滴鼻或肌注攻毒全保护，证实新城疫Ｗ／Ｏ／Ｗ活性复乳已达到实用要求。     

鸡新城疫水-油-水型活性复乳的研制和免疫研究

水－油－水（Ｗ／Ｏ／Ｗ）型活性复乳是将油包水初乳（Ｗ／Ｏ）进一步分散在水相中经过二次乳化，使用时并佤以新城疫弱疫苗联合制成，有杉透析法测定复乳的形成率分别为９５．０％，８９．３％，８８．０％和８４．４％，雏鸡免疫后４天ＨＩ抗体即明显升高，并持续２个月以上，对育成鸡的加强免疫持续期达１４个月，滴鼻或肌注攻毒全保护，实新城疫Ｗ／Ｏ／Ｗ活性复乳已达到实用要求。     

几种有机锡化合物对小鼠外周血T和B淋巴细胞的影响

从免疫毒理学角度研究了氯化三丁基锡（ＴＢＴＣｌ）、氯化二丁基锡（ＤＢＴＣｌ）和氯化一丁基锡（ＭＢＴＣｌ）对小鼠免疫系统的影响。采用外周血液淋巴细胞酸性α－醋酸萘脂酶（ＡＮＡＥ）检测法和溶血分光光度测定法，对小鼠腹腔注射０．０１～０．１０μｇ／ｋｇＴＢＴＣＬ可增加Ｔ－淋巴细胞数量和诱导抗体的产生。而高于此剂量范围作用７ｄ，各指标则呈现不同程度的下降趋势，０．０１μｇ／ｋｇＤＢＴＣＬ对小鼠免疫系统无明     

基于聚邻苯二胺和金-普鲁士蓝纳米复合物的电位型免疫传感器

利用电聚合方法制备聚邻苯二胺修饰碳糊电极（CPE／POPD ）,在CPE／POPD上电沉积金‐普鲁士蓝纳米复合材料（Au‐PB）,制得CPE／POPD／Au‐PB修饰电极,将羊抗小鼠IgG（抗体,Ab）通过Au‐NH‐键固定在修饰电极上,从而制得免疫传感器（CPE／POPD／Au‐PB／Ab）．利用CPE／POPD／Au‐PB／Ab对小鼠IgG （抗原,Ag ）进行检测,结果表明,在4×10－4～1．0×104μg／L质量浓度范围内,电极电势与Ag浓度呈现良好线性关系,检测下限达到1．14×10－4μg／L ,响应时间为3 min ,灵敏度为－8．51 mV／dec‐ade ．所制备的免疫传感器具有灵敏度高、响应速度快、检测范围宽、重现性好等优良性能．     

论鸡传染性法氏囊病病毒细胞苗的制造和应用

目前使用的多种疫苗仍未能有效控制鸡传染性法氏囊病（ＩＢＤ）的发生，原因是疫苗质量难以保证和免疫程序或方法不发。解决的办法：病毒培养宜选用无特定病原（ＳＰＦ）鸡胚或非免疫健康鸡群的鸡胚，消化时间控制在１５ｍｉｎ左右，细胞数在１００－１５０万／ｍＬ，接毒量为０．１％－０．２％，小牛血清使用浓度为３－５％；疫苗冻干过程应在不断搅拌病毒培养液的同时控制加入保护剂的速度。免疫程序：无母源抗体或母源抗体不清雏     

密码子优化的H5亚型流感病毒HA基因重组质粒在哺乳动物细胞中的高效表达及其免疫原性的研究

为了提高流感病毒血凝素（HA）基因的表达量及其免疫原性,按照哺乳动物偏爱密码子将A／Goose／HLJ／QFY／04（H5N1）流感病毒的血凝素基因进行优化改造,然后插入到真核表达载体pCI—neo中,构建了真核表达质粒pCI—opti—HA．将此质粒和含野生HA基因的真核表达质粒pCI—wt—HA分别转染Vero或293T细胞,通过免疫过氧化物酶单层细胞试验（IPMA）和蛋白免疫印迹（WB）实验比较HA蛋白的表达量．将两种重组质粒免疫Balb／c小鼠,比较两者诱导的抗体产生水平．三次免疫后两周用强毒攻击,通过体温和体重变化评价两种重组质粒的免疫保护效果．IP—MA和WWWB实验结果表明：密码子优化后,HA蛋白在哺乳动物细胞中的表达水平显著提高．酶联免疫吸附实验（ELISA）结果表明：小鼠免疫后密码子优化的重组质粒诱导的特异性抗体效价较高．攻毒试验结果表明：两种重组质粒均能够提供较好的保护．     

免疫鸡群新城疫病毒检测和分离的研究

以ＳＰＦ鸡抗新城疫病毒（ＮＤＶ）ＩｇＧ为包被抗体（５μｇ／ｍＬ）,兔抗ＮＤＶＶｅｒｏ细胞培养纯化毒ＩｇＧ为第二抗体（１∶２００～６００）,酶标记羊抗兔ＩｇＧ（１∶５０００）为指示抗体建立间接夹心ＥＬＩＳＡ,检测实验免疫鸡、攻毒鸡及现地免疫鸡口腔或泄殖腔外分泌物。结果表明：新城疫无毒力Ｖ４疫苗免疫后２ｄ,口腔内病毒抗原随机检出率为４／１０,第１０天为１０／１０;泄殖腔为０～１／１０,并持续１８ｄ以上。滴鼻攻毒后１ｄ,口腔和泄殖腔内病毒抗原检出率分别是８／１０和６／１０;第１３天,泄殖腔内病毒抗原检出阴性。ＮＤＶ灭活疫苗免疫６０ｄ后攻毒,第２天有７／２０口腔和８／２０泄殖腔检出阳性,并一直到攻毒后第１４天。非免疫对照鸡攻毒后第３天直到死亡时,口腔和泄殖腔均可检出病毒抗原。对各地临床上无任何症状的ＮＤＶ免疫鸡群检测发现,泄殖腔ＮＤＶ抗原阳性率０％～９．３％,分离到８株ＮＤＶ流行毒株,生物学试验证实这些毒株的毒力属中等毒力偏强或强毒。     

反胶束法制备免疫脂质体

报道了反胶束法制备免疫质体的方法，先将水溶性包裹物（如药物等）包入反胶束中；在油／水界面膜上修饰有抗体，使反胶束穿过界面膜自动组装成免疫脂质体，负染电镜照片显示免疫脂质体为单层，直径在５０－４００ｎｍ范围，免疫脂质体溶解实验证明羊抗人ＩｇＧ已组装在脂质体上，该方法制备过程简单，包裹率、修饰率较高。     

胶体金免疫层析技术定量检测人绒毛膜促性腺激素

采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金,用胶体金标记和双抗体夹心免疫层析方法,建立对人绒毛膜促性腺激素的快速定量检测方法．该检测方法可以在15min内完成对HCG的定量检测,灵敏度可达25mIU／mL,线性范围25～10000mIU／mL．与人促黄体生成素（hLH）、人促甲状腺激素（hTSH）、人卵泡刺激素均无交叉反应,所建立的检测人绒毛膜促性腺激素的胶体金免疫层析方法,能快速、灵敏、特异、准确地检测样品中的人绒毛膜促性腺激素,在异位妊娠的早期诊断及过程监控中具有较为广阔的应用前景．     

CpG ODN对初生仔猪外周血CD4+和CD8+T淋巴细胞的影响

以猪伪狂犬病毒为模式病毒，研究了CpG ODN对仔猪外周血中CD4^＋，CD8^＋T淋巴细胞的影响．实验结果表明：疫苗组初生仔猪血液中CD4^＋／CD8^＋T淋巴细胞比例随年龄的增加逐渐降低，而CpG ODN能有效抑制其降低（P〈0．05）；CpG ODN的使用也可以阻止伪狂犬病毒导致的血液中CD4^＋T淋巴细胞比例的降低；联合免疫CpG ODN和猪伪狂犬病毒活疫苗，可以诱导初生仔猪血清中猪伪狂犬病毒特异性抗体迅速产生并达到较高的水平（P〈0．05）；这表明CpG ODN能显著增强动物的免疫应答能力．     

抗—DNA免疫复合物性质的研究

用聚乙二醇和硫酸铵从系统性红斑狼疮患血清中分离出免疫复合物和血浆核酸。分析结果表明，ＰＮＡ的主要成分是ＲＮＡ，仅有少量ＤＮＡ存在，并且ＰＮＡ中ＤＮＡ的ｄＧ＋ｄＣ含量（５５％）明显高于正常值（４２％）。一旦经过ＲＮａｓｅ处理，ＰＮＡ抑制抗－ＤＮＡ抗体结合ＤＮＡ的能力降低，说明抗－ＤＮＡ抗体和ＲＮＡ有交叉反应。动力学研究观察到，抗－ＤＮＡ免疫复合物中抗原抗体的分子比是１：１结合能为３７ｋＪ／ｍｏｌ．     

灵芝对小鼠免疫功能调节作用的研究

报道了灵芝对ＢＡＬＢ／ｃ小鼠产生抗绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）抗体的能力,对 性变态反应（ＤＨＴ）等免疫功能的影响。实验小鼠分为高、中、低剂量组、经胃灌注不同剂量的发芝浸液,每天五次连续灌１５ｄ,对照组自由摄水。用ＳＲＢＣ免疫小鼠,在免疫后第５ｄ用溶血空斑试验（ＰＦＣ）进行体生成细胞检测,以反映Ｂ细胞生成ＩｇＭ抗体的能力;于免疫后第４ｄ用足底厚法测定ＤＨＴ强度,以检测Ｔ细胞功能,用碳粒廓清检测巨噬细胞蚕     

IgM类HBsAg免疫复合物与乙肝肝损害关系初探

对六类不同临床病型２３６例乙３肝患者的ＩｇＭ类ＨＢｓＡｇ循环免疫复合物（ＨＢｓＡｇ／ＩｇＭ－ＣＩＣ）阳性率与ＡＬＴ和肝损害严重性之间的相互关系进行了探讨。结果发现，其阳性率与肝损害严重程度呈正相关，与ＡＬＴ的关系则取决于临床类型。提示免疫复合物的肝损作用具有临床类型相关性的异质性。     

淋巴囊肿病病毒主要衣壳蛋白1.3kb基因真核载体的构建及初步免疫

从LCDV1．3kb／pGEX-4T1质粒酶切获得LCDV1．3kb基因片段,构建重组真核表达质粒LCDV1．3kb/pcDNA3．1（＋）;并将其免疫BALB／c小鼠,用ELISA法检测免疫小鼠血清中抗LCDV抗体和IFN-γ。结果发现免疫小鼠可产生特异性抗LCDV抗体,平均效价为1：40,最高效价达1：320,但小鼠血清IFN-γ平均含量在30pg／mL左右,与阴性对照组无明显差异。结果表明,所构建的重组表达质粒LCDV1．3kb/pcDNA3．1（＋）免疫小鼠后可成功诱导其特异性体液免疫应答,但细胞免疫应答不明显,可能与所选载体、免疫动物种类及免疫方法有关,其具体原因有待于进一步探索。此研究为LCDV基因工程疫苗的研制提供了实验资料。     

细胞免疫在Tamm－Horsfal蛋白所致肾小管间质性肾炎组织损伤中的作用

采用Ｔａｍｍ－Ｈｏｒｓｆａｌ蛋白（ＴＨＰ）直接肾内注射建立大鼠的小管间质性肾炎（ＴＩＮ）模型，ＴＩＮ组９只动物均发生小管间质性组织病理损伤，局灶性单核、淋巴细胞炎症细胞浸润；对照组仅１只轻度炎症改变。外周血Ｔ淋巴细胞免疫表型分析，术后７ｄＴＩＮ组与对照组间ＣＤ＋４、ＣＤ＋８、ＣＤ＋８－ＣＤ＋２５、ＣＤ＋８－Ｉａ＋抗原的表达及ＣＤ４／ＣＤ８的比值均无显著性差异（Ｐ＞０．０５），而术后１４ｄ、ＴＩＮ组均见升高，与对照组比差异有显著性（Ｐ＜０．０５），表明ＴＩＮ组出现Ｔ淋巴细胞的免疫应答反应和活化性细胞毒Ｔ细胞明显增加，从而证实ＴＨＰ在致ＴＩＮ免疫发病机制中，确实存在免疫系统激活，导致肾间质炎症损伤