小鼠腹水瘤巨噬细胞对大肠杆菌O157免疫应答的膜蛋白质组学研究

采用膜亚蛋白质组学方法研究小鼠腹水瘤巨噬细胞Raw 264.7对致病性大肠杆菌O157的免疫应答反应,筛选并鉴定到24个差异表达的膜蛋白质.这些膜蛋白质与细胞免疫、细胞周期、细胞发育、细胞骨架、细胞生长等有关.在蛋白质水平上对巨噬细胞与大肠杆菌间的相互作用关系进行了一些探索性研究,为进一步揭示机体对病原反应的作用机制提供理论基础.     

健康人C3/Ig双特异性免疫复合物与体液免疫的相关性

采用直线相关分析法,较系统地研究了健康人 Ｃ３／ Ｉｇ 双特异性循环免疫复合物（ Ｃ３／ Ｉｇ Ｍ  Ｔ Ｃ Ｉ Ｃ、 Ｃ３／ Ｉｇ Ｇ Ｔ Ｃ Ｉ Ｃ 和 Ｃ３／ Ｉｇ Ａ Ｔ Ｃ Ｉ Ｃ）与 Ｉｇ Ｍ 、 Ｉｇ Ｇ、 Ｉｇ Ａ 和 Ｃ３ 的相关性．结果发现, Ｃ３／ Ｉｇ Ｍ  Ｔ Ｃ Ｉ Ｃ 和 Ｃ３／ Ｉｇ Ｇ Ｔ Ｃ Ｉ Ｃ 含量主要取决于血清总 Ｉｇ Ｍ 和 Ｉｇ Ｇ 量; Ｃ３／ Ｉｇ Ｇ Ｔ Ｃ Ｉ Ｃ 与复合的 Ｉｇ Ｍ 、复合的 Ｉｇ Ｇ、总的 Ｃ３ 呈正相关,而与复合的 Ｃ３ 呈负相关．这些结果提示, Ｉｇ Ｇ 在健康人体液免疫中的重要作用．同时说明,健康人机体免疫反应是复杂多样的,深入研究 Ｃ３／ Ｉｇ Ｔ Ｃ Ｉ Ｃ 与体液免疫的相关性及其形成机理,将为揭示健康人的体液免疫机制提供重要参考．     

环氧合酶-2单克隆抗体的制备和初步应用

以合成肽COX-2-KLH为完全抗原免疫BALB/c 小鼠,通过脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合的杂交瘤技术,筛选获得4株(1E10、3D6、5B11、6G4)稳定分泌抗COX-2单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞株.采用ELISA的方法鉴定McAb效价、亚型及特异性.各株McAb均属IgG1 亚型,其中1E10腹水纯化后MCAb效价在1∶107以上,SDS-PAGE电泳为单一条带,与同源异构体蛋白不发生交叉反应.获得的McAb被成功应用于COX-2生物学研究中的免疫组织化学(IHC)和Western Blot试验中.本研究获得的单抗具有特异、高效的特点,为COX-2生物学相关研究提供理论依据.     

甲亢患者双特异性免疫复合物的研究

采用捕捉法ELISA,检测108例亢患者的抗体／补体类双特异性免疫合（Ig-C3-TCIC）和抗体／抗体类双特异性免疫复合物（Ig/Ig-TCIC),结果发现,甲亢患者除了C3／IgA-tcic含量显著高于健康人,C3／IgM-TCIC与健康人无显著性差异外,IgM/C3-TCIC、IgG/C3-TCIC、IgA/C3-TCIC和C3／IgG－TCIC的含量均显著低于健康人;各类Ig/Ig－含量,除IgA/IgM-TCIC与健康人无显著差异外,其余均显著高于健康人,结果表明,甲亢患者排除“异己”原的能力低下,而免疫调节水平紊乱,从而出现过高的免疫应答,也证明甲亢患者存在整体的和细胞免疫紊乱。     

健康人Ig/C3双特异性免疫复合物与体液免疫的相关性

采用直线相关分析法,较系统地研究了健康人Ｉｇ／Ｃ３双特异性循环免疫复合物（ＩｇＭ／Ｃ３－ＴＣＩＣ、ＩｇＧ／Ｃ３－ＴＣＩＣ和ＩｇＡ／Ｃ３－ＴＣＩＣ）与ＩｇＭ、ＩｇＧ、ＩｇＡ和Ｃ３的相关性,比较了Ｉｇ／Ｃ３－ＴＣＩＣ和Ｃ３／Ｉｇ－ＴＣＩＣ分别与有关体液免疫指标关系的异同。结果发现,ＩｇＭ／Ｃ３－ＴＣＩＣ与总ＩｇＭ和总ＩｇＡ／Ｃ３－ＴＣＩＣ与总ＩｇＭ、总ＩｇＭ、总ＩｇＧ、总ＩｇＡ、和复合ＩｇＧ以及总Ｃ３     

新一代阳离子聚合物转染试剂(梭华-Sofast) 转染效果研究

采用DNA延滞实验研究新一代阳离子聚合物梭华 Sofast转染试剂与DNA的结合能力,以不同报告基因(绿色荧光蛋白基因、β 半乳糖苷酶基因和荧光素酶基因),分析比较梭华 Sofast与阳离子脂质体Lipofectamine2000和阳离子聚合物JetPEI、Superfect转染HEK293细胞转染效率和细胞毒性,研究梭华 Sofast转染试剂转染效率.实验结果表明梭华 Sofast与DNA有很强的结合能力;以绿色荧光蛋白基因为报告基因,梭华 Sofast转染率最高,约60%左右,而且在单个细胞中表达的GFP量多;转染细胞荧光素酶活性检测结果表明,当梭华 Sofast与DNA质量比为16时,转染率最高,高于109RLU/mg蛋白,分别是JetPEI,Superfect和Lipofectamine2000转染细胞最高活性的1.6,2.3和5倍;梭华 Sofast转染β 半乳糖苷酶的染色结果显示95%以上的阳性细胞转染率;比较基因转染效率最高时的细胞毒性,在最佳转染剂量时,几种试剂的细胞存活率均在83%以上,而梭华 Sofast为94.23%.在目前市场上销售的转染试剂对HUV EC细胞的转染效果均不理想情况下,梭华 Sofast仍具一定的转染效率,阳性细胞约占20%.研究结果表明梭华 Sofast是一种高转染效率,低细胞毒性的转染试剂.