11种杀菌剂对马铃薯组培苗污染真菌室内毒力测定

为了筛选出抑制马铃薯组培苗污染真菌的有效杀菌剂，本研究采用生长速率法，测定了11种杀菌剂对3种污染真菌——粉红螺旋聚孢霉(Clonostachy roseas)、产红青霉(Penicillium rubens)和毛霉菌(Mucor sp.)的室内毒力。结果表明：不同杀菌剂对3种污染真菌的菌丝生长均有不同程度的抑制作用。其中，3%中生菌素可湿性粉剂(WP)和40%腈菌唑悬浮剂(SC)对粉红螺旋聚孢霉的抑菌效果较好，EC₅₀值分别为4.07 mg/L和7.24 mg/L;10%苯醚甲环唑水分散粒剂(WG)、250 g/L嘧菌酯SC、3%中生菌素WP对产红青霉的抑菌效果较好，EC₅₀值分别为3.48、7.94、8.71 mg/L;3%中生菌素WP和250 g/L嘧菌酯SC对毛霉菌的抑菌效果较好，EC₅₀值分别为12.02 mg/L和28.84 mg/L。综上所述，3%中生菌素WP对3种污染真菌均表现出较强的毒力和广谱的杀菌作用，在生产上有一定的应用前景。     

抑菌剂在开放组培中的使用及效果研究

采用平板生长抑制法、菌丝生长速率法和孢子萌发试验法检测了几种抑菌剂对植物组织培养中常见细菌和真菌的抑菌作用．结果表明．YI-1抑菌作用具广潜性．其列微球菌、葡萄球菌最低抑菌浓度均为62．5mg／L;对棕曲霉、黑青霉菌丝生长最低抑菌浓度分别是15．625、7．8125mg／L;对棕曲霉、黑青霉孢子萌发最低抑菌浓度均为3．90625、62．5mg／L的YI-1对马铃薯试管苗生根、分化及生长无抑制作用,且在开放组培中未发生污染,可用作开放性植物组织培养中的抑菌剂．     

二芳胺基呋喃甲酰胺类化合物的合成设计及抗菌活性研究

酰胺类化合物是最重要的农用杀菌剂之一.为了获得具有高抗植物病原真菌活性的新型酰胺类化合物,本论文设计、合成了20种结构新颖的含二芳胺结构的2-甲基-3呋喃甲酰胺类化合物,并通过了1 H NMR的结构确定.采用菌丝生长速率法对合成的化合物进行抗四种植物病原真菌的活性测定,结果表明大部分化合物对油菜菌核病菌和水稻纹枯病菌表现出显著抑菌效果.化合物1i对油菜菌核病菌的EC50值为1.9229mg/L,优于商品杀菌剂啶酰菌胺(2.6736mg/L)和先导杀菌剂甲呋酰胺(9.9667mg/L),显示出较好的抗菌活性,为进一步以此类新型杀菌剂进行先导优化提供理论基础.     

连香树精油对植物病原真菌抑菌作用及对人肝癌细胞株SMMC-7721细胞毒性研究

首次以连香树精油作为天然抑菌剂及抑癌剂,检测连香树精油对6种植物病原真菌的抑菌作用及对人肝癌细胞株SMMC-7721的细胞毒性,旨在探究连香树精油在抑菌和抑癌方面的功能,为天然抗菌剂和抗癌药物的开发打下基础.采用改良琼脂稀释法测定连香树精油对6种植物病原真菌的抑制率、最低抑菌体积分数(MIC)和最小杀菌体积分数(MBC),并采用MTT法检测其对人体肝癌细胞SMMC-7721的细胞毒性.结果表明,连香树精油具有较好的抗菌性和抗癌性.在抗菌方面,对玉米大斑、黑曲霉以及根霉的抑菌效果较好,抑制率分别达到97.8%、99.7%、99.4%;对禾谷镰孢菌的抑菌效果较差(最高抑制率仅为29.1%).在MIC和MBC测定实验中,同样表明连香树精油对黑曲霉的抑菌效果较好(MIC为6.25μL/m L,MBC为50μL/m L).在抑癌方面,连香树精油对SMMC-7721肝癌细胞具有较好的抑制效果,当精油体积分数为8μL/m L时,对SMMC-7721肝癌细胞的抑制率可以达到67.9%,与阳性对照5-氟尿嘧啶(抑制率68.9%)没有显著差异,且对正常肝细胞L02的杀伤作用(抑制率18.7%)要远远低于5-氟尿嘧啶对其伤害(抑制率59%).连香树精油对植物病原真菌和SMMC-7721肝癌细胞具有良好的抑制作用,在农药及医药应用中有较好的应用潜力.     

簸箕柳组培再生体系的建立

【目的】建立簸箕柳组培再生体系,为在簸箕柳中开展功能基因组研究奠定基础。【方法】分别以簸箕柳带腋芽茎段和种子为外植体,比较不同消毒方法、基本培养基类型、光照条件及植物生长调节剂等因素对不同外植体脱分化和再分化能力的影响。【结果】簸箕柳组培基本培养基成分以MS+蔗糖(30 g/L)+Phytagel(植物凝胶)(4.4 g/L)为宜。以幼嫩茎段为外植体,最佳消毒方法为70%(体积分数)酒精处理30 s+20%(质量分数)的次氯酸钠处理10 min,适宜诱导腋芽的生长调节剂组合为6-BA(1 mg/L)+NAA(0.01 mg/L),丛生芽继代增殖的适宜生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.05 mg/L),适宜腋芽生根的生长调节剂组合为IBA(0.2 mg/L)+NAA(0.03 mg/L)。以种子为外植体,最佳消毒方法为70%(体积分数)酒精处理10 s+20%(质量分数)的次氯酸钠处理2 min,光照条件下诱导愈伤组织的生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+ NAA(0.3 mg/L),并利用6-BA(0.5 mg/L)+ NAA(0.5 mg/L)和6-BA(0.5 mg/L)+NAA(0.8 mg/L)两种组合方式交替使用进行愈伤组织的继代培养; 愈伤组织分化成芽的生长调节剂配比为6-BA(0.5 mg/L)+ TDZ(0.2 mg/L),生根培养基只需添加NAA(0.01 mg/L)。【结论】以茎段和种子作为外植体,通过不同的再生途径,均可以建立簸箕柳组织培养再生体系。     

濒危植物延龄草初代培养中无菌培养物的建立

延龄草为国家三级保护植物,近几年,其资源数量急剧减少,急需寻找增加资源的途径.为了获得延龄草初代培养的无菌培养物,对延龄草初代培养中外植体所感染的微生物进行分离纯化、形态学及生理生化鉴定,进一步对污染外植体进行抑菌处理.结果表明,外植体所感染菌株均为埃希氏菌属(Escherichia);在培养基中加200 mg/L链霉素或300 mg/Lα-氨苄青霉素能获得较好的抑菌效果;100 mg/L链霉素或150 mg/Lα-氨苄青霉素浸泡污染外植体6 h也能获得较好的抑菌效果.该研究为延龄草离体繁殖体系的建立奠定了基础,从而为进一步从离体繁殖的角度扩大资源提供了可能.     

草珊瑚内生真菌SgG4抗植物病原真菌的活性物质研究

对草珊瑚内生真菌卷曲木霉Trichoderma spirale SgG4抗植物病原真菌的活性物质进行研究。采用菌丝生长速率法对SgG4发酵产物进行抑菌活性测定,采用硅胶柱层析法并结合活性追踪对发酵产物的活性萃取物进行活性物质分离纯化,运用核磁共振谱和质谱技术对活性化合物进行结构鉴定。结果表明,抗菌活性物质主要存在于发酵产物的乙酸乙酯萃取物中,该萃取物对13种植物病原真菌均有较好的抑制活性,EC₅₀值为0.000 2～2.475 7 g/L,其中对甘蔗凤梨病菌的抑制活性最好。从发酵产物的乙酸乙酯萃取物中分离出1个抑菌活性化合物,鉴定为木霉酸(trichoderma acid)。木霉酸在0.1 g/L时,对13种植物病原真菌均有抑制作用,其中对茶轮斑病菌、烟草黑胫病菌、甘蔗凤梨病菌和白绢病菌的抑菌率为100%,对其余9种植物病原真菌的抑菌率为21.43%～85.71%。可见,木霉酸的抑菌活性较好且抗菌谱广,在微生物源杀菌剂方面具有较好的开发应用前景。     

铃兰高效繁育体系条件探究①

为了解决铃兰组培过程中的污染问题,构建高效繁育体系,采用铃兰不同器官作为外植体,以愈伤组织形成率及污染率作为评价指标,比较培养基配方、抑菌剂种类和浓度对愈伤组织诱导及组培污染菌的影响,筛选出铃兰高效繁育体系。结果表明:(1)不同外植体诱导愈伤组织的能力不同,对激素的要求也有所不同,铃兰嫩芽配合附加0.3mg/L 6-BA和0.2mg/L NAA的MS培养基组合对愈伤组织的诱导效果最好;(2)浓度为0.20g/L的代森锰锌能够有效的抑制组培污染菌的形成,污染率可降低至4.70%,同时对愈伤组织的形成具有促进作用,是最佳的抑菌剂选择。     

真菌对重金属Pb(Ⅱ), Cd(Ⅱ), As(Ⅲ)和Cr(Ⅵ)耐受性的比较研究

从两种不同土壤环境中筛选获得19 株真菌, 并对其重金属耐受性进行比较分析。其中, 从重金属污染严重的湖南水口山有色金属矿区土壤中筛选获得17 株真菌, 经鉴定分别属于曲霉属、木霉属、青霉属和镰孢属; 从重金属污染较轻的廊坊经济开发区绿化用地中筛选获得2 株真菌, 经鉴定均为黑曲霉。研究重金属对不同土壤环境中分离的真菌的最小抑制浓度(MICs), 分析菌种、生存环境、重金属浓度等因素对真菌重金属耐受性的影响, 探讨真菌耐受高浓度重金属的机理。研究表明, 从矿区分离获得的真菌中, Aspergillus niger PTN84 等可耐受144 mmol/L Pb(Ⅱ), A. terreus PTN21, A. flavus PTN29 和Trichoderma asperellum PTN1 可耐受36 mmol/L Cd(Ⅱ), Fusarium sp. PTN12, A. terreus PTN21 和T. asperellum PTN1 可耐受36 mmol/L Cu(Ⅱ), Fusarium sp. PTN12 可耐受72 mmol/L As(Ⅲ), 整体上其重金属耐受能力高于文献报道的菌株, 在重金属土壤修复方面具有潜在的应用价值。     

黄皮叶超声提取物的抑菌性能研究

利用超声回流法获取不同溶剂(水、乙酸乙酯、无水乙醇、丙酮、环己烷)的黄皮叶提取物,选用滤纸片扩散法进行抑菌试验、二倍稀释法测定最小抑菌浓度,研究黄皮叶提取物对十种微生物的抑制作用.结果表明:乙酸乙酯、无水乙醇、丙酮提取物对供试的细菌(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、白色葡萄球菌、四联微球菌、蜡状芽孢杆菌)有明显抑菌效果.乙酸乙酯提取物对大肠杆菌、白色葡萄球菌的最小抑菌浓度为3.2 mg/mL;对金黄色葡萄球菌、蜡状芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌的最小抑菌浓度为6.3 mg/mL;对四联微球菌的最小抑菌浓度是12.5 mg/mL.乙酸乙酯提取物抑菌性受温度、pH影响较大,受光照影响不明显.各种溶剂的超声提取物对供试真菌(黑曲霉、青霉、根霉、白色念珠菌)均无抑菌效果.该研究结果为开发利用黄皮叶的防腐、抑菌作用提供参考.     

蛇足石杉的组织培养初探

针对蛇足石杉资源分散,资源更新周期长,难以大规模开采的情况,初步探讨了蛇足石杉的组织培养技术.以蛇足石杉茎尖为外植体,分别在1/2MS+0.05 μmol/L IBA+1.4 μmol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺、MS+0.05 μmol/L IBA+1.4 μmol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺、1/2MS+2 mg/L谷氨酰胺/无激素、MS+2 mg/L谷氨酰胺/无激素等4种培养基中培养.结果显示:较为适宜的初代培养基为2号培养基,即MS+0.05 μmol/L IBA+1.4μ mol/L KT+2 mg/L谷氨酰胺.在组织培养工作中,污染问题比较严重,本实验中,采用了以下2种方法对外植体进行消毒：（1）70%酒精浸泡1 min→5% NaOCl浸泡1 min→7%H₂O₂浸泡10 min;（2）0.1%升汞液灭菌3’ →无菌水冲洗5次.结果显示第2种方法比较理想.     

兰州百合组织培养及快速繁殖技术研究

【目的】建立适于兰州百合(Lilium davidii var.Unicolor(Hoog)Cotton)的快速无性繁殖技术,为食用兰州百合试管苗规模化生产提供技术参考。【方法】以球根鳞片为外植体,采用不同消毒方法、取材部位、接种方法和植物生长调节剂及其浓度配比,筛选适合的诱导、增殖和生根培养基。【结果】球根鳞片先用75%酒精处理后,用10%的次氯酸钠与0.13%的升汞等体积混合液消毒,再用0.13%升汞消毒为最佳消毒方式;接种选择与鳞茎盘相连的下部鳞片为初代培养的最佳外植体;外植体在MS+6-BA 1.5mg/L+GA30.8mg/L+2,4-D 1.0mg/L的培养基中,能诱导出较多长势健壮的不定芽;在MS+6-BA 1.0mg/L+NAA 0.1mg/L的培养基中,增殖倍数达1.25;而生根培养以MS+NAA 0.6mg/L+IBA 0.1mg/L为最佳,生根苗生长良好,生根率达100%。【结论】获得适合兰州百合快速繁殖的培养基配方,建立了兰州百合的快速繁殖技术。     

多孔陶瓷负载钯催化剂及污水处理研究

本研究以廉价的高岭土、滑石粉、氧化铝为主要原料,水泥为固化剂,疏水型活性碳粉为泡沫稳定剂,采用直接起泡法制备了高开气孔率的多孔陶瓷,采用浸渍和反应法负载氢氧化高钯催化剂.利用次甲基蓝模拟污水,并作为钯基催化剂催化次氯酸钠分解的标识物.研究了催化剂负载量、温度、次氯酸钠用量对催化剂降解次甲基蓝的影响.结果显示,多孔陶瓷负载的钯催化剂能有效催化次氯酸钠分解,极大地提高了次甲基蓝氧化褪色的速率,随温度升高,最终褪色所需时间急剧减少.在温度为40℃,催化剂量为0.4g,NaClO量为5mL,pH值为7.88的条件下,50mL浓度为10mg/L的次甲基蓝仅需要58min就能褪至无色.     

垂柳的组织培养及植株再生体系研究

对垂柳愈伤组织和植株再生体系进行了研究,结果显示茎段比较适合诱导愈伤组织,质量浓度为1.0mg/L和2.0mg/L的6-BA均能诱导垂柳茎段愈伤组织;MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+KT 0.5 mg/L的激素配比最为适合胚状体和芽的分化;MS+6-BA 1.0 mg/L+Ac 0.3%培养基能促使垂柳根的形成,且能促使芽生长,最终形成幼苗。     

粉葛再生体系建立的研究

为建立高效粉葛组织培养再生体系,以不同消毒方式、基本培养基、蔗糖浓度、外植体等处理,研究其对粉葛初代培养、继代培养和生根培养的影响。结果表明,以75%酒精30 s+0.1%升汞+吐温-80消毒8 min时,外植体的成活率最高,可达83.33%。外植体的最佳取材部位为带芽茎段,其平均株高可达2.13 cm,繁殖系数为2。MS为最佳的基本培养基,繁殖系数为1.26;蔗糖浓度以30 g/L为最佳,其平均株高为1.69 cm,繁殖系数为1.55;最佳初代培养基为MS+琼脂5.5 g/L+蔗糖30 g/L+6-BA 0.2 mg/L+IBA 0.6 mg/L,其平均株高为3.13 cm,繁殖系数为3.17;最佳的继代培养基为MS+琼脂5.5 g/L+蔗糖30 g/L+6-BA 0.6 mg/L+IBA 0.8 mg/L+KT 0.2 mg/L,其平均株高为1.86 cm,繁殖系数为3.44;最佳的生根培养基为MS+琼脂5.5 g/L+蔗糖30 g/L+IBA 1.0 mg/L,其生根率为100%,平均主根数达7.1根。通过组培条件优化,初步建立粉葛的再生体系。     

丽格海棠的组织培养与快速繁殖研究

以丽格海棠的茎状、叶柄、叶片为外植体进行组织培养。最佳培养基：（1）诱导培养基MS＋6－BA4．0mg/L(单位下同）＋IBA1．0；（2）增殖培养基MS＋6－BA0．5＋IAA0．2；（3）生根培养基MS＋NAA0．2．生根壮苗培养50d左右，经移栽，成活率达92％左右。     

化学预氧化强化铁锰复合氧化物混凝除污染效能

通过混凝杯罐试验,研究了化学预氧化与铁锰复合氧化物(FeMnO)联用对有机物的去除效果,考察了氧化剂投量、预氧化时间对有机物的去除效果的影响.结果表明,FeMnO对有机物有一定的去除效果,高锰酸钾、过氧化氢及次氯酸钠作为预氧化剂可以提高FeMnO混凝对有机物的去除效果,最佳投药量分别为15、20、30 mg/L,最佳预氧化时间为20 min,在最佳投量和最佳预氧化时间下,对TOC的去除率分别为6510%、5515%及5631%;对UV254去除率分别为5105 %、5305 %及6040 %.化学预氧化强化了FeMnO混凝对有机物的去除效果,是一种良好的除微污染技术.     

黑果枸杞组培繁殖培养基选择

以黑果枸杞种子为材料,通过配比不同质量浓度植物生长调节剂的方法,研究在其组织培养快速繁殖过程中培养基的选择.结果表明:MS培养基适合黑果枸杞种子萌发与生长;无菌苗在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA培养基中可以形成较好的愈伤组织;在MS+0.4 mg/L 6-BA+0.1 mg/L IBA培养基中不定芽数量较多;适宜生根的培养基为1/2 MS+1.5 mg/L IBA,生根率为98%.组培苗在泥炭土、蛭石、珍珠岩(2∶1∶1)混合基质中移栽成活率高达93%.     

间苯三酚生产废水处理的试验研究

采用两段化学絮凝-湿式催化氧化-氯氧化-硅藻土混凝和微滤分离膜过滤组合工艺对间苯三酚生产废水进行处理,研究Fenton试剂、絮凝剂、NaClO用量对处理效果的影响.废水经组合工艺处理后,间苯三酚浓度由5.08g/L下降为0.36mg/L,去除率接近100%;COD由46450mg/L下降为24.6mg/L,去除率接近100%;颜色由深棕色完全褪尽,去除率为100%;处理后的出水浊度为0.18NTU,色度为5度.处理后的每吨水可回收硫酸钠、氯化钠等无机盐40千克.实验结果表明该处理工艺效果优良,实现了废水的处理与资源化.     

风信子子房的组织培养

通过组织培养技术可以从风信子（ＨｙａｃｉｎｔｈｕｓｏｒｉｅｎｔａｌｉｓＬ．）子房诱导出完整植株．在我们的研究中,ＭＳ＋ＢＡ５ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ１ｍｇ／Ｌ较适于诱导愈伤组织和芽．适于芽生长的培养基是ＭＳ＋ＢＡ２ｍｇ／Ｌ＋ＮＡＡ２ｍｇ／Ｌ．ＭＳ（不加任何外源激素）培养基适于诱导生根