鱼肉中LMG的分子印迹仿生ELISA检测方法

针对水产品中隐性孔雀石绿(leuco malachite green,LMG)残留的问题,建立了鱼肉中LMG的分子印迹仿生酶联免疫吸附法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测方法。以LMG为模板分子,在p H=8. 5的Tris-HCl介质中,多巴胺(dopamine,DA)经氧化自聚合4 h即可在微孔板表面形成聚合物膜,经V(甲醇)∶V(乙酸)=9∶1混合溶液洗脱模板分子后,形成LMG分子印迹聚合物膜(membrane of molecularly imprinted polymer,MIP)。以LMG-MIP膜为仿生抗体,建立了鱼肉中LMG残留的仿生ELISA检测方法。该方法灵敏度为5. 18μg/L,检出限达0. 03μg/L。利用隐性结晶紫和孔雀石绿这2种LMG的结构类似物进行方法的特异性试验,交叉反应率为21. 3%。实际样品加标回收实验表明,方法的回收率为71. 8%～73. 5%,RSD≤4. 2%。结果表明,该检测方法可用于鱼肉中LMG残留的快速筛查。     

仪器分析教学与应用型人才培养

针对仪器的专门化人才培养与当前经济社会发展对应用型人才提出高要求的脱节问题,立足于《仪器分析》教学,探讨了如何从教材内容、学习方法、启发思维、实验教学方面,逐步提高学生解决问题的能力,为社会培养符合时代要求的应用型人才。     

柑橘溃疡病相关基因CitEX3的克隆与表达分析

利用RT-PCR和PCR扩增技术,获得纽荷尔脐橙富亮氨酸重复序列受体样蛋白激酶EXS(EXTRA SPOROGENOUS CELLS)基因CDs全长,命名为Cit EX3.生物信息学分析表明,该基因CDs全长2 667bp,编码888个氨基酸,最大开放阅读框2 667bp,属于富亮氨酸重复序列蛋白激酶家族(LRR-RLKs).Cit EX3基因所编码蛋白EXS3分为胞外域、跨膜域和胞内激酶结构域,胞外域中存在保守的LRR重复序列,胞内激酶结构域中存在一个保守的丝/苏氨酸催化域重复序列.Southern Blot分析表明,在纽荷尔、椪柑、四季桔和金柑中该基因都以单拷贝形式存在.实时荧光定量PCR分析表明,接种溃疡病病菌后,该基因受溃疡病诱导上调表达,推测该基因可能与柑橘溃疡病抗性相关.     

高效液相色谱法测定乳制品中三聚氰胺的含量

为建立乳制品中三聚氰胺含量的高效液相色谱测定方法,通过超声提取,离子交换萃取小柱净化,结合高效液相色谱进行样品测定.色谱条件:Eclipse XDB-C18柱(5μm,4.6 mm×150 mm,Agi-lent);流动相:A为离子对缓冲液(1.05 g柠檬酸和1.01 g辛烷磺酸钠定容至500 mL,pH值为2.6),B为乙腈,配制比例为90%A+10%B,流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样量20μL,检测波长240 nm.结果表明:三聚氰胺标准曲线为y=0.009x+0.362 7,相关系数R=0.999 8,在0.17~110.0 mg/L范围内线性关系良好,方法检出限为0.12 mg/L,两个样品三个水平的加标回收率分别为96.34%(RSD=4.76)、84.86%(RSD=7.21)、104.29%(RSD=7.63)和95.31%(RSD=4.39)、89.25%(RSD=3.88)、92.59%(RSD=5.27).     

单扫描示波极谱法测定保健食品中的叶酸

建立了保健食品中叶酸的单扫描二阶导数示波极谱测定方法,并用正交条件试验确定了测定叶酸的最佳底液条件.在B R(Britton Robinson)缓冲体系(pH=7.22)中,叶酸产生一灵敏的极谱还原波,峰电位Ep=-0.89V(vs.SCE),其二阶导数波峰电流与叶酸浓度在3×10-7～5×10-6mol L范围内呈线性关系,线性方程i″p=59.441c+9.627,相关系数r=0.9991,检出极限为3×10-7mol L.     

铅－茜素紫配合物极谱行为的研究

在ｐＨ为６．７的０．０２ｍｏｌ／Ｌ柠檬酸盐缓冲溶液中，铅－茜素紫配合物在单扫示波极谱仪上分别于－０．５７Ｖ和－０．７１Ｖ（ｖＳ．ＳＣＥ）产生两个极谱还原波，第二个波的二次导数峰电流与铅（Ⅱ）浓度在２．０×１０－８～４．０×１０－８ｍｏｌ／Ｌ范围内呈线性关系，检测极限为１×１０－８ｍｏｌ／Ｌ．详细研究了茜素紫及其铅（Ⅱ）配合物的电极反应机理．用拟定的方法测定了大米和蔬菜中的铅，结果满意．     

海洋小球藻（Chlorella sp.）高密度培养条件优化研究

为提高小球藻（Chlorella sp.）的生物量,须对f/2配方培养基进行响应面优化。首先须确定小球藻培养基的最佳pH值和盐度。在此基础上,利用Plackett-Burman设计方案筛选出影响小球藻生长的3个主要因素分别为NaHCO3、KNO3和维生素B12,然后通过 Box-Behnken 设计试验确定这3个主要因素的最佳质量浓度参数。结果表明,当培养基组成为:NaHCO3 0.93 g/L、MgSO4 0.40 g/L、KNO3 0.46 g/L、K2HPO4 0.020 g/L、维生素B1 0.60 mg/L、维生素B12 1.8 μg/L、生物素 2.0 μg/L时,小球藻经实验室培养72 h后的生物量达到4.5×107个/mL,较优化前提高了32.5%。     

ISM优化巴戟天多糖的超声波辅助提取工艺

利用响应面分析法(RSM),对超声波水提巴戟天多糖的工艺进行优化.在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken中心组合设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,运用SAS 8.2和Design-Expert 7.1.1分析软件对实验数据进行二次响应面分析.获得巴戟天多糖的最佳提取条件料液比(原料质量与提取液体积的比,gmL)为113,超声波提取时间为30 min,提取次数为2次.在此最优工艺条件下,测得巴戟天多糖质量比为35.93 mg·g-1.     

太子参总皂苷的含量测定方法研究

建立了太子参总皂苷含量的测定方法．以人参皂苷Re为对照品，5％（W／V）香草醛冰醋酸溶液和60％（V/V）硫酸溶液为显色剂，60℃恒温反应20min，分光光度法测定太子参总皂苷的含量．最大吸收波长535nm，在3．88—34．96mg／L范围内浓度与吸光度线性关系良好，相关系数r=0．9983.方法回收率在96％-105%之间．测定了不同提纯方法得到的太子参总皂苷含量，结果表明方法简便，重现性好，可作为太子参总皂苷的质量控制方法．     

单扫描示波极谱法测定氯霉素的应用研究

在0．3mol／L的KCl（pH6．5）底液中，用单扫描示波极谱法可得到一个灵敏的氯霉素导数还原波，峰电位为-840mV（vs．SEE）．峰电流与氯霉素浓度在0．075～0．250mg／L范围内呈现良好的线性关系（r=0．9986），检出限为0．025mg／L．利用该法测定了氯霉素针剂、眼药水、氯霉素片剂和鱼血中的氯霉素，并与高效液相色谱法和紫外分光光度法的测量结果进行对比，结果令人满意。