HBs和HCVc基因双顺反子质粒在BALB/c小鼠体内的分布

 采用注射含双顺反子质粒后,PCR法扩增不同组织中HBsAg和HCVc基因,同时检测HBV和HCV抗体应答水平.研究注射基因免疫用双顺反子质粒在小鼠组织中的分布.pcDNA3.0BApc154S₂S 1次注射BALB/c小鼠后,24 h内主要分布于血液、肝、脾、骨髓、淋巴结、注射部位肌肉、肺和肾等含血液丰富的组织中.注射后2 d主要在骨髓、血液和注射部位肌肉中存在.7 d后仅在注射部位肌肉中能检测出来,并可持续到第9周.组织切片镜检质粒注射初期肌肉细胞轻度浊肿,随后肌膜细胞轻度增生,未见其它明显的组织病理学变化.质粒多次免疫BALB/c小鼠未见明显的临床症状和病理组织学变化.质粒在小鼠体内不同组织存在时间不一致.     

良好生产管理规范与全面质量管理及其在生物制品生产管理中的应用

从质量及生物制品质量的概念出发,阐述了良好生产管理规范（ＧＭＰ）管理模式和全面质量管理（ＴＱＣ）模式的基本内容及其在生物制品行业中的应用,认为ＴＱＣ是当今工业企业的现代化管理手段和方法,而ＧＭＰ是针对药品生产行业制定的一整套保证产品质量的基本要求．要想不断提高企业管理素质,改进产品质量,在生物制品企业中进行ＧＭＰ管理的同时,必须实行ＴＱＣ管理,ＴＱＣ所涉及的内容要比ＧＭＰ更广泛、更全面,而ＧＭＰ的实施又为ＴＱＣ的进行打下了良好的基础．     

脊灰疫苗生产中零星细菌污染的菌谱情况及其药敏分析

在疫苗生产实践中,细菌污染是影响疫苗质量和产量的关键性因素,笔者通过了两年左右的时间,选取正常生产中零星细菌污染的细胞培养瓶、病毒培养瓶及收毒污染样品等共７０３份,进行细菌学检查,并对造成污染的主要细菌种类进行了各种抗菌药物的耐药性实验,结果表明：①我所脊灰疫苗生产中主要的污染威胁来自环境中的葡萄球菌,潜在威胁是杆菌和链球菌;②强力霉素、林可霉素、配方２、噻孢霉素钠盐、庆大霉素、新霉素、金霉素和红霉素等抗生素对目前引起污染优势细菌－葡萄球菌有明显的抑菌效果,可作为疫苗生产后备抗菌手段参考     

无血清微载体培养MDCK细胞和甲型流感病毒H1N1的条件优化

 血清微载体培养MDCK细胞,并接种流感病毒H1N1,优化培养条件,为细胞流感疫苗的工艺研发奠定基础.采用不同的细胞接种量在50mL无血清微载体搅拌瓶中培养MDCK细胞,并接种甲型流感病毒H1N1,检测不同pH值和TPCK-胰酶含量的病毒培养液,不同病毒接种量,补加TPCK-胰酶,以及不同收毒时间对血凝效价的影响.以1.0×10⁵mL^-1的MDCK细胞数量接种到无血清微载体上,病毒培养液pH值为7.2~7.4范围内,TPCK-胰酶质量浓度为1.0μg/mL,接种后不补加胰酶,病毒接种量MOI=1.0,并在72h收获,最高血凝效价达到512.由此获得了在无血清为载体上培养MDCK细胞和甲型流感病毒H1N1的适宜条件.     

PCR技术对肺炎支原体DNA的检测

作者首次在国内利用自己的条件完成了肺炎支原体从培养基制备、实验室培养、菌种检定、引物设计、ＤＮＡ提取．到ＰＣＲ扩增条件的摸索、产物检测等一整套技术,与非肺炎支原体、部分相关细菌进行了鉴别,并同时进行了临床样品和模拟样品的实验,结果表明该方法的特异性和灵敏性都是好的．     

生物反应器培养CHO细胞的生长与代谢研究

 在搅拌式生物反应器中,应用批培养、流加培养和灌流培养3种方法对CHO-k1细胞进行了培养.3种方法最大活细胞密度分别达到了2.0×10⁶,2.7×10⁶和9.6×10⁶mL^-1.对培养过程中葡萄糖和氨基酸及代谢产物氨和乳酸的动态变化进行了检测和分析.结果表明,CHO细胞对葡萄糖和谷氨酰胺的摄取以及氨和乳酸的产生与培养液中葡萄糖和谷氨酰胺的浓度正相关,培养过程中控制葡萄糖和谷氨酰胺的加入量能够明显降低氨和乳酸的产生,提高代谢效率,增加细胞产量.     

硫鱼精蛋白去除OPV中Vero细胞基质DNA的研究

以不同浓度的硫鱼精蛋白（ＰＳ）对Ｖｅｒｏ细胞制备的Ⅰ,Ⅱ,Ⅲ型脊髓灰质炎口服活疫苗（ＯＰＶ）病毒悬液进行后处理去除细胞基质ＤＮＡ研究．ＰＳ浓度大于１ｍｇ／ｍＬ,纯化后疫苗中ＤＮＡ残余含量低于１００ｐｇ／剂量．随着病毒液中ＰＳ浓度的增加,ＤＮＡ残余含量减少,但病毒回收率亦降低．结果表明ＰＳ沉淀法,病毒回收率高,ＤＮＡ残余含量能达到ＷＨＯ规程ＤＮＡ限量要求,对脊灰病毒ｒｃｔ／４０特征及病毒壳蛋白等生物学性状无显著影响,是Ｖｅｒｏ细胞制备ＯＰＶ简便的纯化方法     

良好生产管理规范与全面质量管理及其在生物制品生产管？…

从质量及生物制品质量的概念出发，阐述了良好生产管理规范（ＧＭＰ）管理模式和全面质量管理（ＴＱＣ）模式的基本内容及其在生物制品行业中的应用，认为ＴＱＣ是当今工业企业的现代化管理手段和方法，而ＧＭＰ是针对药品生产行业制定的一整套保证产品质量的基本要求。要想不断提高企业管理素质，改进产品质量，在生物制品企业中进行ＧＭＰ管理的同时，必须实行ＴＱＣ管理，ＴＱＣ所涉及的内容要比ＧＭＰ更广泛、更全面、而ＧＭＰ的     

复合稳定剂增加脊髓灰质炎糖丸疫苗的稳定性

该研究改进了现行脊髓灰质炎糖丸疫苗的稳定性，由１ｍｏｌ·Ｌ－１ＭｇＣｌ２稳定性改为１ｍｏｌ·Ｌ－１ＭｇＣｌ２＋０．５ｍｏｌ·Ｌ－１磷酸盐缓冲液复合稳定剂（１ｍｏｌ·Ｌ－１ＭｇＣｌ２＋０．５ｍｏｌ·Ｌ－１ＰＢ）．采用复合稳定剂后，大大增加了疫苗的稳定性．２２℃保存时间比１ｍｏｌ·Ｌ－１ＭｇＣｌ２稳定剂延长了一周，即保存时间从１２ｄ延长至１８～２１ｄ．疫苗于４℃保存了６个月，滴度降低甚微．在３７℃保存３ｄ，疫苗的滴度降仍符合ＷＨＯ规程的要求     

昆明地区1株HAM野毒株的基因分型

免疫捕获粪便悬液中的HAV，RT－PCR扩增目的的片段，将其连接到载体pUC18中，测序并对序列进行分析和比较，HAV野毒株W在核苷酸3024－3191与HM175/wt序列相同，表明W株为ⅠB亚型；该株5'NTR的核苷酸29－258与其它国际毒株有很大的不同，有碱基的、缺失和插入，其中插入的15个碱基是其它毒株所没有的。